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人內(nèi)皮素1（ET-1）ELISA試劑盒

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產(chǎn)品簡介

人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒，ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細介紹

人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

30542 HPMEC 人肺微血管內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30543 HPMEC-a 人肺微血管內(nèi)皮細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
30544 HPAEC 人肺動脈內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30545 HPASMC 人肺動脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30546 HPAF 人肺動脈成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30547 HPAEpiC 人肺泡上皮細胞 1 x 10^6 cells/vial
30548 HBEpiC 人支氣管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30549 HTEpiC 人氣管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30550 HSAEpiC 人小氣道上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30551 HPF 人肺成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30552 HPF 人肺成纖維細胞 1 x 10^6 cells/vial
30553 HBSMC 人支氣管平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30554 HTSMC 人氣管平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30555 HBF 人支氣管成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30556 HSkMC 人骨骼肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30557 HSkMSC 人骨骼肌衛(wèi)星細胞 5 x 10^5 cells/vial
30558 HSkMM 人骨骼肌成肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30559 HACC 人腎上腺皮質(zhì)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30560 HRGEC 人腎小球內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30561 HRPTEpiC 人腎小管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30562 HRCEpiC 人腎皮質(zhì)上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30563 HREpiC 人腎臟上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30564 HRMC 人腎系膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
30565 HBIMEC 人膀胱微血管內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30566 HBdSMC 人膀胱平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30567 HUC 人尿道上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30568 HBdSF 人膀胱基質(zhì)成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30569 HPrMEC 人前列腺微血管內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30570 HPEpiC 人前列腺上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30571 HPSMC 人前列腺平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30572 HPrF 人前列腺成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30573 HCO 人顱骨成骨細胞 5 x 10^5 cells/vial
30574 HO-f 人股骨成骨細胞 5 x 10^5 cells/vial
30575 HC-a 人軟骨細胞 5 x 10^5 cells/vial
30576 HS 人滑膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
30577 HNPC 人髓核細胞 5 x 10^5 cells/vial
30578 HAFC 人纖維環(huán)細胞 5 x 10^5 cells/vial
30579 HHSEC 人肝竇內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30580 HIBEpiC 人肝內(nèi)膽管上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30581 HH 人肝細胞 1 x 10^6 cells/vial
30582 HHSteC 人肝星形細胞 5 x 10^5 cells/vial
30583 HSEC 人脾臟內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30584 HSF 人脾臟成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30585 HCMEC 人心臟微血管內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30586 HCAEC 人冠狀動脈內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30587 HAEC 人主動脈內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30588 HASMC 人主動脈平滑肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30589 HAF 人主動脈成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30590 HCM 人心肌細胞 5 x 10^5 cells/vial
30591 HCM-a 人心肌細胞-成人 5 x 10^5 cells/vial
30592 HCF 人心臟成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30593 HCF-av 人心臟成纖維細胞-成人心室 5 x 10^5 cells/vial
30594 HCF-aa 人心臟成纖維細胞-成人心房 5 x 10^5 cells/vial
30595 HCEpiC 人角膜上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30596 HK 人角膜細胞 5 x 10^5 cells/vial
30597 HREC 人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30598 HRPEpiC 人視網(wǎng)膜色素上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30599 HLEpiC 人晶狀體上皮細胞人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 5 x 10^5 cells/vial
30600 HIPEpiC 人虹膜色素上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30601 HConF 人結(jié)膜成纖維細胞 5 x 10^5 cells/vial
30602 HNPCEpiC 人無色素睫狀上皮細胞 5 x 10^5 cells/vial
30603 HTMC 人小梁網(wǎng)細胞 5 x 10^5 cells/vial

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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