人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

30048 *麥康凱瓊脂基礎(chǔ)(SMAC)    250 用于大腸桿菌0157的分離培養(yǎng)(SN標(biāo)準(zhǔn))
30049 * A 1.25μg/支*5 添加于100ml HB0121中
30050 1%亞碲酸鉀溶液 5ml*10 適量添加于HB0121 
30051 mEC 肉湯       250 用于0157選擇性增菌(USDA-FSIS方法)
30052 mTSB肉湯 250 用于0157選擇性增菌(ISO方法)
30053 新生霉素A 2mg/支*5 添加于100ml mEC肉湯和mTSB肉湯中用于0157選擇性增菌
30054 SD-39瓊脂 250 用于濾膜法大腸桿菌0157的分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)
30055 平板計(jì)數(shù)瓊脂（PCA） 標(biāo)準(zhǔn)平板計(jì)數(shù)瓊脂,含糖,用于細(xì)菌總數(shù)的測定(SN標(biāo)準(zhǔn))
30056 4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷 0.01g添加于100ml HB0102中用于大腸桿菌及0157鑒定
30057 煌綠乳糖膽鹽肉湯 （BGLB）     用于大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標(biāo)準(zhǔn))
30058 EC 肉湯       用于糞大腸菌群、大腸桿菌的測定(SN標(biāo)準(zhǔn))
30059 伊紅美藍(lán)瓊脂 (EMB) 弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病菌，特別是大腸桿菌(SN標(biāo)準(zhǔn))
30060 營養(yǎng)肉湯 (NB)    一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯、增菌等(GB標(biāo)準(zhǔn))
30061 營養(yǎng)瓊脂 (NA)    細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(GB標(biāo)準(zhǔn))
30062 乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基      用于大腸菌群，糞大腸菌群，大腸桿菌的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))
30063 乳糖復(fù)發(fā)酵培養(yǎng)基     用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))
30064 去氧膽酸鹽瓊脂      用于大腸桿菌固體平板測定,腸道菌選擇性分離
30065 MR-VP培養(yǎng)基      用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
30066 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 (VRBA)     用于大腸菌群的固體平板檢測(SN標(biāo)準(zhǔn))
30067 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂      用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
30068 腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂 (VRBDA)      用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)
30069 菌種保存培養(yǎng)基    用于常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇４?BR>30070 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液     用于飲用水，水源水中總大腸菌群的測定(GB標(biāo)準(zhǔn))
30071 Cary-Blair 氏*        250 用于運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本
30072 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ) 250 營養(yǎng)非常豐富，用各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(AFNOR EP IDF標(biāo)準(zhǔn))
30073 亮綠乳糖培養(yǎng)基    250 用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
30074 腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)    250 用于腸道菌的增菌培養(yǎng)(GB、FDA標(biāo)準(zhǔn))
30075 TTC營養(yǎng)瓊脂    250 用于細(xì)菌總數(shù)測定
30076 LB肉湯     250 用于細(xì)菌培養(yǎng)
30077 LB營養(yǎng)瓊脂    250 用于細(xì)菌培養(yǎng)
30078 苯*脫氨酶培養(yǎng)基    100 用于苯*脫氨酶試驗(yàn)
30079 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基 250 用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標(biāo)準(zhǔn))
30080 2216E瓊脂 250 用于海生細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
30081 腸球菌瓊脂(膽鹽－七葉苷－疊氮鈉瓊脂) 250 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
30082 BDS培養(yǎng)基 250 用于培養(yǎng)擬桿菌
30083 葡萄糖瓊脂 250 用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn)
30084 Andrade氏糖類肉湯 250 用于細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn)
30085 Korser氏枸椽酸鹽肉湯 100 用于細(xì)菌枸椽酸鹽試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))
30086 Endo 培養(yǎng)基 250 用于大腸菌群的確診試驗(yàn)(APHA)
30087 緩沖MUG瓊脂 100 用于濾膜MUG法檢測食品中大腸桿菌數(shù)(SN/T1059.2)
30088 乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂 250 用于濾膜MUG法檢測食品中大腸菌群數(shù)(SN/T1059.2)
30089 茜素-β-半乳糖苷瓊脂 250 用于食品、飲料和飲用水中大腸菌群快速檢測和計(jì)數(shù)(GB/T)
30090 Tergitol-7 瓊脂 250 用于大腸菌群的鑒定(NMKL)
30091 TTC 溶液(0.125%) 2ml*10 添加于HB0127中
30092 標(biāo)準(zhǔn)I號營養(yǎng)瓊脂 250 標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌計(jì)數(shù)、含糖(MERCK方法)
30093 標(biāo)準(zhǔn)II號營養(yǎng)瓊脂 250 細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用(MERCK方法)
30094 A1 培養(yǎng)基 250 用于檢測水中的大腸菌群(US-EPA標(biāo)準(zhǔn))
30095 哥倫比亞CNA瓊脂基礎(chǔ) 用于分離革蘭氏陽性球菌(Acumedia方法)
30096 m-FC 瓊脂 用于大腸菌群的濾膜法檢測(MERCK方法)
30097 m-FC肉湯 用于大腸菌群的濾膜法檢測(MERCK方法)
30098 濾膜腸球菌瓊脂 用于腸球菌的濾膜法檢測(MERCK方法)
30099 酵母粉瓊脂 人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒用于水中細(xì)菌總數(shù)的檢測(ISO標(biāo)準(zhǔn))
30100 去氧膽酸鹽枸椽酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 用于致病性腸桿菌的分離培養(yǎng)
30101 去氧膽酸鹽枸椽酸鹽瓊脂 用于細(xì)菌總數(shù)的測定和分離培養(yǎng)
30102 胰胨大豆胨固綠瓊脂 用于濾膜細(xì)菌總數(shù)的測定和分離培養(yǎng)(NEOGEN方法)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人前列腺素E2(PGE2)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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