人皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質量。

29992 12164 HTM 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于副嗜血桿菌紙片擴散法藥敏試 驗，每升培養(yǎng)基中需添加  15mg 無 菌 NAD
29993 10134 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鮮乳中抗生素殘留檢驗
29994 10266 LB 瓊脂LB  250g/瓶 含 0.5%NaCl，用于分子生物學中大 腸桿菌的培養(yǎng)
29995 10267 NZCYM 肉湯 250g/瓶 用于大腸桿菌菌株培養(yǎng)，配方被推 薦用于重組l噬菌體的復制
29996 10268 NZYM 肉湯 250g/瓶 不含酸水解酪蛋白，用于大腸桿菌 菌株培養(yǎng)，配方被*用于重組l 噬菌體的復制
29997 10269 Luria 肉湯基礎 250g/瓶 含  0.05%NaCl，用于大腸桿菌的培 養(yǎng)和保存，視需要每 1L 培養(yǎng)基中無 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液
29998 10270 Luria 瓊脂基礎 250g/瓶 含  0.05%NaCl，用于大腸桿菌的培 養(yǎng)和保存，視需要每 1L 培養(yǎng)基中無 菌添加 10ml20%葡萄糖溶液
29999 10271 2×YT 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于重組大腸桿菌菌株的培養(yǎng)
30000 10272 M9 低鹽培養(yǎng)基 250g/瓶 用于制備  M9 低鹽培養(yǎng)基，培養(yǎng)重 組大腸桿菌菌株
30001 10274 麥康凱瓊脂基礎 250g/瓶 不含碳水化合物，用于大腸桿菌的 發(fā)酵研究
30002 10275 低限肉湯（不含葡萄糖） 250g/瓶 用于分離和表現(xiàn)營養(yǎng)突變型大腸桿 菌和枯草芽孢桿菌的特性
30003 10276 低限瓊脂 250g/瓶 用于分離和表現(xiàn)營養(yǎng)突變型大腸桿 菌的特性
30004 10277 SOC 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于基因工程大腸桿菌的培養(yǎng)
30005 10278 SOB 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于大腸桿菌分子遺傳學菌株的培 養(yǎng)
30006 10279 *肉湯Terrific 250g/瓶 用于大腸桿菌培養(yǎng)
30007 10280 選擇性 APS 肉湯基礎 250g/瓶 非動物源配方，用于分子生物學試 驗中大腸桿菌的保存和培養(yǎng)
30008 10281 選擇性 APS 超級肉湯基礎 250g/瓶 非動物源配方，用于培養(yǎng)重組大腸 桿菌菌株，提高質粒產量
30009 11148 YPD 瓊脂 250g/瓶 用于分子生物學實驗中酵母菌的培 養(yǎng)和保存
30010 11149 YPD 肉湯 250g/瓶 用于分子生物學實驗中酵母菌的培 養(yǎng)和保存
30011 12111 K 氏培養(yǎng)基 250g/瓶 用于飲料中耐熱耐酸菌的檢測，需 使用蘋果酸調節(jié) pH
30012 10710 肝浸液培養(yǎng)基 250g/瓶 用于布魯氏菌屬分離
30013 10711 胰蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于布魯氏菌屬檢驗
30014 12103 阿須貝氏（Ashby）培養(yǎng)基 250g/瓶 用于固氮菌的培養(yǎng)
30015 12105 根瘤菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于根瘤菌的保藏和培養(yǎng)
30016 12106 硅酸鹽細菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于硅酸鹽細菌的培養(yǎng)
30017 12107 固氮（莖瘤）根瘤菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于（莖瘤）根瘤菌培養(yǎng)
30018 12109 聯(lián)合固氮菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于固氮螺菌的培養(yǎng)
30019 12110 光合細菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于光合細菌的培養(yǎng)
30020 12144 *乳糖無電解質培養(yǎng)基 250g/瓶 無抑制性，用于泌尿系統(tǒng)致病菌的分離和培養(yǎng)，也可做深部培養(yǎng)的貯 運
30021 12145 包姜氏瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于百日咳桿菌的分離，需添加 1%甘油和 15%脫纖維羊血 50701
30022 12147 纖維素分解菌培養(yǎng)基 250g/瓶 用于纖維素分解菌的分離和鑒別， 纖維素分解菌周圍有紅色分解圈
30023 12159 腦膜炎奈瑟氏菌糖發(fā)酵瓊脂基礎 250g/瓶 用于腦膜炎奈瑟氏菌糖發(fā)酵試驗
30024 12161 幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基 250g/瓶 用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng)，需添 加抗生素及馬血
30025 12401 碎肉培養(yǎng)基 250g/瓶 用于痤瘡丙酸桿菌的培養(yǎng)，不含維 生素  K，需添加  11002（庖肉牛肉 粒）
30026 11943 黃原膠液體發(fā)酵培養(yǎng)基 1 萬 ml/包 以葡萄糖為碳源，用于黃原膠生產
30027 12501 Tinsdale 瓊脂基礎 250g/瓶 用 于 白 喉 桿 菌 的 分 離 培 養(yǎng) ， 每100ml 培養(yǎng)基中需添加  10ml  血清 以及 1 支 22501
30028 22501 Tinsdale 瓊脂基礎添加劑 5ml×10 支/盒 每支用于 100ml12501 中
30029 12502 亞碲酸鉀血瓊脂基礎 250g/瓶 用于白喉桿菌的分離培養(yǎng)，需添加 亞碲酸鉀及羊血
30030 12309 吡哆醇 Y 培養(yǎng)基 100g/瓶 用于吡哆醇測定
30031 12601 Korthof 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鉤端螺旋體的增菌培養(yǎng)，每 100ml 培養(yǎng)基中需添加兔（羊、或 馬）血清 8ml
30032 12610 EMJH 培養(yǎng)基 250g/瓶 用于鉤端螺旋體的增菌培養(yǎng)，每 90ml 培養(yǎng)基中添加 1 支 22601
30033 12173 發(fā)根農桿菌培養(yǎng)基 250g/瓶
30034 大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時，顯蘭色
30035 大腸菌群顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準確檢測大腸菌群大腸菌群培養(yǎng)24小時，顯蘭色
30036 大腸桿菌／大腸菌群顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準確同時檢測大腸桿菌和大腸菌群，培養(yǎng)24小時，大腸桿菌顯紫色,大腸菌群顯紅色
30037 TBX 培養(yǎng)基 1000ml 用于快速、準確檢測大腸桿菌大腸桿菌培養(yǎng)24小時，顯蘭色
30038 細菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基 250 用于快速、準確檢測細菌總數(shù)，培養(yǎng)24小時，細菌顯紅色
30039 O157顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于O157菌的顯色培養(yǎng)
30040 沙門氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)
30041 李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于李斯特氏菌的顯色培養(yǎng)
30042 金黃色葡萄球顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于*的顯色培養(yǎng)
30043 霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基人皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒 1000ml 用于霉菌和酵母菌的顯色培養(yǎng)
30044 弧菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于弧菌的顯色培養(yǎng)，副溶血性弧菌顯藍色，其它弧菌顯無色。
30045 坂崎桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于坂崎桿菌的顯色培養(yǎng)，坂崎桿菌顯藍色，其它腸桿菌顯無色。
30046 尿道定位顯色培養(yǎng)基 1000ml 用于分離和鑒別常見尿道致病菌

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人皮質酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質量?，F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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