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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-19 02:53:00瀏覽次數(shù):169次
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人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
29376 2 x YT Top Agar 培養(yǎng)基 250g
29377 2 x YT Top Agar-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29378 1511 NsM 神經(jīng)前體細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29379 1531 NPCM 神經(jīng)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
29380 1831 AM-a 動(dòng)物星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29381 1921 MaM 巨噬細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29382 2201 MelM 黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29383 2211 MelM-2 黑色素細(xì)胞培養(yǎng)基-2(不含TPA) 500 ml
29384 2331 FM-2 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2(用于心肌成纖維細(xì)胞) 500 ml
29385 4651 CM 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29386 7201 AdM 脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29387 2111 KM-d 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基(特定) 500 ml
29388 2121 KM-acf 角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29389 1001-prf ECM-prf 內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29390 1111-prf SMCM-sf-prf 平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29391 1201-prf PM-prf 周邊細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29392 1401-prf MenCM-prf 腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29393 1521-prf NM-prf 神經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29394 1601-prf OPCM-prf 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29395 1611-prf OsM-prf 球狀少突細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29396 1621-prf OM-prf 少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29397 1631-prf OPCDM-prf 少突膠質(zhì)前體細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
29398 1701-prf SCM-prf 雪旺細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29399 1801-prf AM-prf 星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29400 1901-prf MM-prf 小膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29401 2321-prf FM-acf-prf 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29402 2331-prf FM-2-prf 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml
29403 2561-prf TEpiCM-prf 扁桃體上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500ml
29404 2611-prf OKM-prf 口腔角質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29405 3201-prf AEpiCM-prf 肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29406 3211-prf BEpiCM-prf 支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29407 3231-prf SAEpiCM-prf 小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29408 3501-prf SkMCM-prf 骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29409 4101-prf EpiCM-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29410 4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml
29411 4131-prf EpiCM-a-prf 動(dòng)物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29412 4201-prf MCM-prf 腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29413 4321-prf UCM-prf 尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29414 4411-prf PEpiCM-prf 前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29415 4601-prf ObM-prf 成骨細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29416 4701-prf SM-prf 滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29417 4801-prf NPCM-prf 髓核細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29418 5201-prf HM-prf 肝細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29419 5301-prf SteCM-prf 星形細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29420 6201-prf CMM-prf 心肌細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29421 6511-prf CEpiCM-prf 角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29422 7121-prf TM-prf 滋養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29423 7211-prf PAM-prf 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29424 7221-prf PADM-prf 前脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
29425 7311-prf OEpiCM-prf 卵巢上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29426 7521-prf MSCM-acf-prf 人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
29427 7531-prf MODM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞成骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
29428 7541-prf MADM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞脂肪細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
29429 7551-prf MCDM-prf 間充質(zhì)干細(xì)胞軟骨細(xì)胞分化培養(yǎng)基 500 ml
29430 7611-prf MEpiCM-prf 乳腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 500 ml
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人卵泡抑素(FS)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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