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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-29 21:52:31瀏覽次數(shù):133次
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人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
29251 虎紅*瓊脂基礎(chǔ) (CM0549) Oxoid
29252 假單胞菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0559) Oxoid
29253 十六烷*基*瓊脂 (CM0579) Oxoid
29254 產(chǎn)氣莢膜菌瓊脂基礎(chǔ) (TSC/SFP) (CM0587) Oxoid
29255 BiGGY 瓊脂 (Nickerson 培養(yǎng)基) (CM0589) Oxoid
29256 *七葉甙疊氮瓊脂基礎(chǔ)(CM0591) Oxoid
29257 胰蛋白胨膽汁瓊脂 (CM0595) Oxoid
29258 艱難梭菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0601) Oxoid
29259 改良*鹽礦物培養(yǎng)基(CM0607) Oxoid
29260 *選擇瓊脂基礎(chǔ)(CM0617) Oxoid
29261 Wilkins-Chalgren 厭氧瓊脂 (Wilkins - Chalgren Anaerobe Agar) Oxoid 500g
29262 Rogosa 瓊脂 (CM0627) Oxoid
29263 營養(yǎng)明膠 (CM0135a) Oxoid
29264 Vogel-Johnson 瓊脂 (CM0641) Oxoid
29265 Wilkins-Chalgren Anaerobe Broth/Wilkins Chalgren 厭氧肉湯 Oxoid 500G
29266 通用啤酒瓊脂 (CM0651) Oxoid
29267 耶爾森選擇瓊脂基礎(chǔ)(CIN 瓊脂基礎(chǔ)/Schiemann 培養(yǎng)基基礎(chǔ)) (CM0653) Oxoid
29268 軍團菌 CYE 瓊脂基礎(chǔ) (CM0655) Oxoid
29269 橙血清瓊脂 (CM0657) Oxoid
29270 Rappaport-Vassiliadis (RV) 增富肉湯 (CM0669) Oxoid
29271 牛奶平板計數(shù)瓊脂 (含無抗脫脂乳) (CM0681) Oxoid
29272 彎曲菌瓊脂基礎(chǔ) (CM0689) Oxoid
29273 K-F 鏈球菌瓊脂 (CM0701) Oxoid
29274 DRBC 瓊脂基礎(chǔ) (CM0727) Oxoid
29275 氯硝胺甘油瓊脂基礎(chǔ) (CM0729) Oxoid
29276 AFPA 基礎(chǔ) (CM0731) Oxoid
29277 zui大恢復(fù)稀釋液 (蛋白胨鹽肉湯) (CM0733) Oxoid
29278 彎曲菌無血選擇瓊脂基礎(chǔ) (CM0739) Oxoid
29279 GBS 瓊脂基礎(chǔ) (Islam) (CM0755) Oxoid
29280 Raka Ray 瓊脂基礎(chǔ)(CM0777) Oxoid
29281 Casein 干酪素 500g
29282 NZCYM Agar-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29283 NZYM Agar capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29284 SOC Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29285 LB Broth-capsules 培養(yǎng)基 5capsules
29286 Polypeptone 多聚蛋白胨 500g
29287 Peptone 蛋白胨 500g
29288 Peptone, bacteriological 蛋白胨 500g
29289 Agar B 瓊脂B 500g
29290 Beef Extract 牛肉浸膏 500g
29291 Carrageenan 卡拉膠 500g
29292 Nutrient agar 營養(yǎng)瓊脂 100g
29293 SOB Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29294 SOB Agar-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29295 NZM Broth-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29296 NZM Agar-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29297 NZYM-capsule 培養(yǎng)基 5capsules
29298 Agar 瓊脂粉 500g
29299 Agar A 瓊脂A 100g
29300 Agar D (Purified Agar) 純化瓊脂 500g
29301 Casamino Acid 酪蛋氨基酸(酪蛋白水解物) 500g
29302 Malt Extract 麥芽浸膏 500g
29303 Yeast Extract 酵母浸膏 500g
29304 HYLB-Capsules 培養(yǎng)基 5capsules
29305 Peptone 140 (Soytone) 蛋白胨-140 100g
29306 Peptone-A (From Meat) 蛋白胨A 100g
29307 Peptone-B (Soy Protein Enzymatic Hydrolysate) 蛋白胨B 500g
29308 Peptone-C (Peptonized Milk) 蛋白胨C 500g
29309 Peptone-D (Protease peptone) 蛋白胨 D 100g
29310 Peptone-E (Gelatin Peptone) 蛋白胨 E 100g
29311 Peptone F (Lactalbumin Hydrolysate) 蛋白胨F 500g
29312 Tryptone 胰蛋白胨 500g
29313 Tryptone Powder (Casein Peptone) 胰蛋白胨 500g
29314 Yeast Extract人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒 酵母提取物 100g
29315 Yeast Nitrogen Base, without Amino Acids 培養(yǎng)基 100g
29316 Yeast Nitrogen Base, without Amino Acids & Ammonium Sulfate 培養(yǎng)基 500g
29317 H Medium Broth 培養(yǎng)基 100g
29318 H Medium Broth-capsules 培養(yǎng)基 5capsules
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人血管緊張素原(aGT)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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