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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-06 15:24:36瀏覽次數(shù):267次
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人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
29024 *-EDTA,
0.25%*,EDTA。4Na 不含鈣鎂離子,含酚紅
保存:-5 - -20° 25200-056 100ml
29025 25200-072 500ml
29026 *(1:250),干粉 保存:2-8° 27250-018 100g
29027 DPBS,(1X)(IVD) 含鈣鎂離子,不含酚紅 14040-141 100ml
29028 14040-133 500ml
29029 14040-117 1000ml
29030 DPBS,(1X),(IVD) 含1000mg/l葡萄糖,36mg/l丙酮酸鈉,
鈣鎂離子,不含酚紅 14287-080 500ml
29031 14287-072 1000ml
29032 DPBS,(10X),(IVD) 含鈣鎂離子,不含酚紅 14080-055 500ml
29033 PBS,(1X) pH7.2 20012-027 500ml
29034 20012-043 1000ml
29035 PBS,(10X) pH 7.2 70013-032 500ml
29036 PBS,(1X) pH 7.4 10010-023 500ml
29037 10010-031 1000ml
29038 PBS,(10X) pH 7.4 70011-044 500ml
29039 RPMI 1640,(1X),液體(IVD) 含L-* 11875-093 500ml
29040 RPMI 1640,(1X),液體(IVD) 含25mM HEPES,和L-* 22400-089 500ml
29041 RPMI 1640,干粉
(IVD) 含L-*,不含* 31800-022 10*1L
29042 31800-089 1*10L
29043 RPMI 1640,干粉
(IVD) 含L-*,25mM HEPES,不含* 23400-021 10*1L
29044 RPMI 1640,(1X),液體 ( IVD) 不含L-* 21870-076 500ml
29045 DMEM(低糖),液體 含1000mg/l葡萄糖,L-*,
110mg/l丙酮酸鈉 11885-084 500ml
29046 DMEM(低糖),干粉 含1000mg/l葡萄糖,L-*,
110mg/l丙酮酸鈉,不含* 31600-034 10*1L
29047 DMEM(高糖),液體 含4500ml/l葡萄糖,L-*
不含丙酮酸鈉 11965-092 500ml
29048 11965-084 1000ml
29049 DMEM(高糖),液體 含4500ml/l葡萄糖,L-*110mg/l丙酮酸鈉 11995-065 500ml
29050 DMEM(高糖),液體 含4500mg/l葡萄糖,L-*
25mM HEPES,不含丙酮酸鈉 12430-054 500ml
29051 DMEM(高糖),干粉 含4500mg/l葡萄糖,L-*
不含丙酮酸鈉及* 12100-046 10*1L
29052 12100-061 1*10L
29053 DMEM(高糖),干粉 含4500mg/l葡萄糖,L-*
110mg/l丙酮酸鈉,不含* 12800-017 10*1L
29054 12800-082 1*10L
29055 優(yōu)級胎牛血清 的FBS產(chǎn)品。高品質(zhì),高價值,適于各種一般的應用 澳洲
10099-133 100ml
29056 10099-141 500ml
29057 ES級別胎牛血清 經(jīng)過ES細胞的培養(yǎng)測試,讓您培養(yǎng)ES細胞時無需再預實驗試批號 新西蘭 30044-333 500ml
29058 新生牛血清 采集自出生20天內(nèi)的新生牛 新西蘭 16010-159 500ml
29059 16010-142 1000ml
29060 馬血清 供體動物的EIA檢測呈陰性 新西蘭 16050-130 100ml
29061 16050-122 500ml
29062 熱滅活馬血清 供體動物的EIA檢測呈陰性56°下加熱30分鐘進行熱滅活 新西蘭 26050-070 100ml
29063 26050-088 500ml
29064 山羊血清 采集自供體動物 新西蘭 16210-064 100ml
29065 16210-072 500ml
29066 念珠菌顯色培養(yǎng)基 用于分離和鑒定主要致病性念珠菌 1000ml
29067 25L
29068 定位顯色培養(yǎng)基 用于尿道細菌分離和鑒別,也可用于傷口感染標本的病原菌分離 1000ml
29069 25L
29070 大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 用于大腸桿菌鑒定和計數(shù) 1000ml
29071 25L
29072 ECC顯色培養(yǎng)基 用于大腸桿菌和大腸菌群的鑒定和計數(shù) 1000ml
29073 25L
29074 O157顯色培養(yǎng)基 用于大腸桿菌O157的分離和鑒定 1000ml
29075 人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒25L
29076 O157顯色培養(yǎng)基(改進型) 用于大腸桿菌O157的分離和鑒定 1000ml
29077 O104顯色培養(yǎng)基 用于大腸桿菌O104的分離和鑒定 1000ml原裝
29078 *顯色培養(yǎng)基 用于*的鑒定和計數(shù) 1000ml
29079 500ml
29080 5L
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人8異前列腺素(8-iso-PG)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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