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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-13 21:20:29瀏覽次數(shù):171次
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人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
28797 SABOURUD-1% dextrose-1%maltoseagar 沙氏1%右旋糖1%麥芽糖瓊脂 1.07662.0500 MERCK默克
28798 SABOURUD 4% maltose agar 4%麥芽糖瓊脂 1.05439.0500 MERCK默克
28799 Salmonella agar acc.to ONOZ 沙門氏菌瓊脂 1.15034.0500 MERCK默克
28800 Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT 沙門氏菌富集肉湯 1.10236.0500 MERCK默克
28801 Salmonella enrichment broth acc.to RAPPAPORT-VASSILIADIS( RVS) 1.07700.0500 MERCK默克
28802 沙門氏菌富集肉湯
28803 Salmosyst broth base Salmosyst 肉湯基礎(chǔ) 1.10153.0500 MERCK默克
28804 Salmosyst selective supplement tablets Salmosyst選擇添加片 1.10141.0500 MERCK默克
28805 Selective agar for pathogenic fungi致病真菌選擇瓊脂 1.05467.0500 MERCK默克
28806 Selenite cystine enrichment btoth for microbiology 1.07709.0500 MERCK默克
28807 SIM medium SIM培養(yǎng)基 1.05470.0500 MERCK默克
28808 SIMMONS citrate agar simmons檸檬酸鹽瓊脂 1.02501.0500 MERCK默克
28809 Sodium-chloride peptone broth(buffered) 氯化鈉蛋白胨肉湯(緩沖) 1.10582.0500 MERCK默克
28810 Sorbitol-MacCONKEY agar(SMAC agar)SMAC瓊脂/*麥康凱瓊脂 1.09207.0500 MERCK默克
28811 SPS agar ANGELOTTI perfringens selective agar SPS瓊脂/ANGELOTTI 1.10235.0500 MERCK默克
28812 產(chǎn)氣莢膜菌選擇瓊脂梭
28813 SS agar Salmonella-Shigella agar SS瓊脂/沙門氏菌-志賀氏菌瓊脂 1.07667.0500 MERCK默克
28814 SSDC agar(Salmonella-Shigella agar with sodium dexoycholate and calcium chloride) SSDC 瓊脂/沙門氏菌-志賀氏菌瓊脂(含脫氧膽鹽氯化鈣) 1.16724.0500 MERCK默克
28815 Standard count agar標(biāo)準(zhǔn)計數(shù)瓊脂 1.01621.0500 MERCK默克
28816 Standard nutrient agar標(biāo)準(zhǔn)I營養(yǎng)瓊脂 1.07881.0500 MERCK默克
28817 Standard nutrient broth 標(biāo)準(zhǔn)I營養(yǎng)瓊脂 1.07882.0500 MERCK默克
28818 Standard 11 nutrient agar標(biāo)準(zhǔn)11營養(yǎng)瓊脂 1.07883.0500 MERCK默克
28819 Staphylococcus enrichment broth( base)acc.to BAIRD葡萄狀球菌富集肉湯(基礎(chǔ)) 1.07899.0500 MERCK默克
28820 TB medium acc.to LOENSTIN-JENSEN( base) TB培養(yǎng)基(基礎(chǔ)) 1.05400.0500 MERCK默克
28821 TCBS agar Vibrio selective agar TCBS瓊脂/弧菌選擇瓊脂 1.10263.0500 MERCK默克
28822 Test agar fo the residue test acc.to KUNDRAT測試瓊脂(殘余測試) 1.10662.0500 MERCK默克
28823 Agar test PH6.0 for the inhibitor test測試瓊脂PH6.0(抑制劑測試) 1.10663.0500 MERCK默克
28824 Test test PH7.2 for the inhibitor test測試瓊脂PH7.2(抑制劑測試) 1.15787.0500 MERCK默克
28825 Test test PH8.0for the inhibitor test測試瓊脂PH8.0(抑制劑測試) 1.10664.0500 MERCK默克
28826 Tetrathionate enrichment broth( base) acc.to MULLER-KAUFFMAN 1.10863.0500 MERCK默克
28827 TGE agar Tryptone glucose extract agarTCE 瓊脂/胰蛋白胨葡萄糖瓊脂 1.10128.0500 MERCK默克
28828 THAYER-MARTIN agar base THAYER-MARTIN瓊脂基礎(chǔ)/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)基 1.10728.0500 MERCK默克
28829 THAYER-MARTIN supplement1( VCT inhibitor combination) 1.10729.0001 MERCK默克
28830 THAYER-MARTIN添加劑1/奈瑟氏菌選擇培養(yǎng)添加劑1(抑制劑)
28831 孟加拉紅*瓊脂 即DRBC瓊脂,促進(jìn)霉菌和酵母菌的生長而抑制細(xì)菌的生長 500g
28832 DRBC Agar (Dichloran Rose Bengal Chloramphenicol)
28833 緩沖蛋白胨水 用于食品中沙門氏菌的預(yù)增菌 500g
28834 Buffered Peptone Water Preenrichment
28835 Fluid Tetrathionate Medium
28836 RV R10肉湯 食品、污水或其它樣本中選擇培養(yǎng)沙門氏菌 500g
28837 Rappaport-Vassiliadis R10 Broth
28838 Fluid Selenite - Cystine Medium
28839 Bismuth Sulfite Agar
28840 亮綠瓊脂 選擇分離除傷寒沙門菌外的沙門氏菌,可與新生霉素添加劑合用 500g
28841 Brilliant Green Agar
28842 HE瓊脂 從其它腸道革蘭氏陰性菌中分離沙門氏菌和志賀氏菌 500g
28843 Hektoen Enteric Agar
28844 CHROMagarTM沙門菌顯色培養(yǎng)基 用于沙門菌的分離、鑒別和計數(shù) 374g
28845 CHROMagarTM Salmonella
28846 三糖鐵瓊脂 根據(jù)葡萄糖、乳糖和蔗糖的發(fā)酵及硫化氫的產(chǎn)生、鑒定革蘭氏陰性菌 500g
28847 Triple Sugar Iron Agar
28848 賴氨酸鐵瓊脂 檢測微生物,依據(jù)對賴氨酸的代謝(脫羧、脫氨基、產(chǎn)生硫化氫) 500g
28849 Lysine Iron 人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒Agar
28850 月桂胰胨肉湯 即LST肉湯,用于大腸菌群檢測 500g
28851 Lauryl Sulfate Broth
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人糖皮質(zhì)激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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