人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

28741 MacCONKEY agar 麥康凱瓊脂 1.05465.0500 MERCK默克
28742 MacCONKEYbroth 麥康凱肉湯 1.05396.0500 MERCK默克
28743 Malachite-green broth （ｂａｓｅ）孔雀石綠肉湯（基礎(chǔ)） 1.10329.0500 MERCK默克
28744 Malt extract agar麥芽瓊脂 1.05398.0500 MERCK默克
28745 Malt extract broty 麥芽瓊脂 1.05397.0500 MERCK默克
28746 Mannitol salt phenol-red agar*鹽酚紅瓊脂 1.05404.0500 MERCK默克
28747 Maximum Recovery Diluent zui大恢復(fù)稀釋液 1.12535.0500 MERCK默克
28748 M-Broth M肉湯/甘露糖肉湯 1.10658.0500 MERCK默克
28749 Mcaso broth with novobiocin( Mtsb+N) m乙醇白酶大豆肉湯（含新生霉素） 1.09205.0500 MERCK默克
28750 Meat liver agar 肉肝瓊脂 1.15045.0500 MERCK默克
28751 m EC-broth with Nocobiocin mEC肉湯（含新生霉素） 1.14582.0500 MERCK默克
28752 Agar MFC Mfc 瓊脂 1.11278.0500 MERCK默克
28753 Enterobacteriac enrichment broth acc.to MOSSEL腸桿菌富集肉湯 1.05394.0500 MERCK默克
28754 MRS agar Lactobacillus agar acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS 1.10660.0500 MERCK默克
28755 瓊脂/乳酸菌瓊脂
28756 MRS agar Lactobacillus broth acc.to DEMAN,ROGOSA and SHARPE MRS 1.10661.0500 MERCK默克
28757 瓊脂/乳酸菌瓊脂
28758 MR-VP broth Methylred-VOGES-PROSKAUER broth MR-VP肉湯/甲基紅 VOGES-PROSKAUER肉湯 1.05712.0500 MERCK默克
28759 MSRV selective supplement MSRV 選擇添加劑 1.09874.0001 MERCK默克
28760 MSRV medium( base) modified MSRV改性培養(yǎng)基（基礎(chǔ)） 1.09878.0500 MERCK默克
28761 MUELLER-HINTON agar MUELLER-HINTON 瓊脂 1.05437.0500 MERCK默克
28762 MUELLER-HINTON agar .to NCCLS MUELLER-HINTON瓊脂 1.05435.0500 MERCK默克
28763 MUELLER-HINTON broth MUELLER-HINTON 肉湯 1.10293.0500 MERCK默克
28764 Nutrient agar營養(yǎng)瓊脂 1.05450.0500 MERCK默克
28765 Nutrient broth 營養(yǎng)瓊脂 1.05443.0500 MERCK默克
28766 OF basal medium acc.to HUGH and LEIFSON OF基礎(chǔ)肉湯 1.10282.0500 MERCK默克
28767 OGYE Agar Oxytetracycline-Glucose-Yeast Ectract Agar Base 1.05978.0500 MERCK默克
28768 OGYE瓊脂/*葡萄糖酵母瓊脂
28769 OGYE 選擇添加劑 1.09877.0001 MERCK默克
28770 Orange serum agar橙血清瓊脂 1.10673.0500 MERCK默克
28771 Oxford Listeria selective agar( base) 牛津李斯特氏菌選擇瓊脂（基礎(chǔ)） 1.07004.0500 MERCK默克
28772 Oxford Listeria selective supplement 牛津李斯特氏菌選擇添加劑 1.07006.001 MERCK默克
28773 PALCAM Listeria selective agar( base) acc.to van Netten et al.PALCAM 1.11755.0500 MERCK默克
28774 李斯特氏菌瓊脂（基礎(chǔ)）
28775 PALCAM Listeria selective-Supplement acc.to van Netten et al PALCAM 1.12122.0001 MERCK默克
28776 李斯特氏菌選擇添加劑
28777 L-PALCAM-Listeria selective enrichment broth( base) acc.van Netten et al. L-PALCAM 李斯特氏菌選擇富集肉湯（基礎(chǔ)） 1.10823.0500 MERCK默克
28778 Peptone water( buffered) 緩沖蛋白胨水 1.07228.0500 MERCK默克
28779 Phenol-re broth( base) 酚紅肉湯（六亞） 1.10987.0500 MERCK默克
28780 Plate count agar Casein-peptone dextrose yeast extract agar 1.05463.0500 MERCK默克
28781 平板計數(shù)瓊脂/酪蛋白右旋糖酵母瓊脂
28782 Plate count skim milk agar平板計數(shù)脫脂乳瓊脂 1.15338.0500 MERCK默克
28783 Potato glucose agar 馬鈴薯葡萄糖瓊脂 1.10130.0500 MERCK默克
28784 Presence-Absence Broth 存在-缺乏肉湯 1.00414.0500 MERCK默克
28785 Pseudomonas agar F base 假單胞菌瓊脂F(xiàn)基礎(chǔ) 1.10989.0500 MERCK默克
28786 Pseudomonas agar P base 假單胞菌瓊脂P基礎(chǔ) 1.10988.0500 MERCK默克
28787 Pseudomonas CFC Supplement 1.07627.0001 MERCK默克
28788 Pseudomonas CN Selective supplement 1.07624.0001 MERCK默克
28789 Pseudomonas Selective Agar 1.07620.500 MERCK默克
28790 R2A agar R2A瓊脂 1.00416.0500 MERCK默克
28791 IST Rambach agar Rambach瓊脂 1.07500.0001 MERCK默克
28792 Rogosa agar Lactobacillus selective agar Rogosa瓊脂/乳酸菌選擇瓊脂 1.05413.0500 MERC人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒K默克
28793 Ropse-Bengal Chloramphenicol Agar羅斯-孟加拉*瓊脂 1.00467.0500 MERCK默克
28794 SABOURUD 2％ dextrose agar沙氏 2％右旋糖瓊脂 1.07315.0500 MERCK默克
28795 SABOURUD 4％ glucose agar 沙氏 4％葡萄糖瓊脂 1.05438.0500 MERCK默克

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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