人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

28685 DIASALM acc.to VAN NETTEN and VAN der ZEE DIASALM培養(yǎng)基 1.09803.0500 MERCK默克
28686 DCA agar acc.to Weenk et al 梭狀芽孢桿菌鑒別瓊脂 1.10259.0500 MERCK默克
28687 Dnase test agar DNA酶測試瓊脂 1.10449.0501 MERCK默克
28688 EC Broth EC肉湯 1.10765.0502 MERCK默克
28689 Agar EMB Eosin methylene-blue lactose sucrose agar 1.01347.0503 MERCK默克
28690 伊紅*乳糖蔗糖瓊脂
28691 ENDO agar ENDO氯脂 1.04044.0504 MERCK默克
28692 M-ENDO agar LES 膜過濾ENDO瓊脂 1.11277.0505 MERCK默克
28693 M-ENDO broth 膜過濾ENDO肉湯 1.10750.0500 MERCK默克
28694 Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜過濾腸球菌選擇瓊脂（基礎(chǔ)） 1.05289.0500 MERCK默克
28695 Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLE 1.05262.0500 MERCK默克
28696 膜過濾腸球菌選擇瓊脂
28697 Esculin bile agar 七葉苷膽鹽瓊脂 1.11432.0500 MERCK默克
28698 Thioglycolate medium G 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基G 1.16761.0500 MERCK默克
28699 Fluid thilglycolate medium 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基 1.08191.0500 MERCK默克
28700 FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base) 1.10398.0500 MERCK默克
28701 弗雷澤李斯特菌選擇富集肉湯（基礎(chǔ)）
28702 FRASER Listeria Selective　Supplement 弗雷澤李斯特菌選擇添加劑 1.10399.0001 MERCK默克
28703 Agar for fungi acc.to KIMMIG( base) modified 真菌改性瓊脂（氯化） 1.05414.0500 MERCK默克
28704 Agar GASSNER Water-blue metachrome-yellow lactose agar acc.to GASSNER GASSNER 瓊脂/水溶藍(lán)偏烙黃乳糖瓊脂 1.01282.0500 MERCK默克
28705 GLOLITTI-CANTONI broth Staphylococcus enrichment broth base GLOLITTI-CANTONI 肉湯/葡萄糖球菌富集肉湯基礎(chǔ) 1.10675.0500 MERCK默克
28706 GN enrichment broth acc.to HAJUNA GN富集肉湯 1.10756.0500 MERCK默克
28707 GSP agar Paeudomonas Aeromonas selective agar acc.to KIEL WEIN( base) 過氧化苯甲酰酚紅瓊脂/假單胞菌氣單胞菌選擇瓊脂（基礎(chǔ)） 1.10230.0500 MERCK默克
28708 Hektoen enteric agar Hektoen 腸瓊脂 1.11681.0500 MERCK默克
28709 ITC broth ( base) irgasan-ticarcillin-potassium chlorate broth 1.16723.0500 MERCK默克
28710 ITC肉湯（基礎(chǔ)）
28711 Kanamycin esculin azide agar*七葉苷疊氮瓊脂 1.05222.0500 MERCK默克
28712 KING agar B base（Dank Standard）ＫＩＮＤ　瓊脂Ｂ基礎(chǔ) 1.10991.0500 MERCK默克
28713 KLIGLER agar Double sugar iron agar acc.toKLIGLER KLIGLER 1.03913.0500 MERCK默克
28714 雙糖鐵瓊脂
28715 Lactose broth 乳糖肉湯 1.07661.0500 MERCK默克
28716 AgarLactose TTC with Tergitol( base) 乳糖TTC瓊脂 1.07680.0500 MERCK默克
28717 LB agar acc.to MILLER LB瓊脂 1.10283.0500 MERCK默克
28718 LB broth acc.to MILLER LB瓊脂 1.10285.0500 MERCK默克
28719 Legionella CYE agar basis 軍團(tuán)桿菌CYE瓊脂基礎(chǔ) 1.10242.0001 MERCK默克
28720 Legionella BCYE alpha-growth supplement 軍團(tuán)桿菌CYEa-生長添加劑 1.10240.0001 MERCK默克
28721 Legionella Combi-Pack 軍團(tuán)桿菌復(fù)合包 1.10425.0001 MERCK默克
28722 Legionella GVPC selective supplement 軍團(tuán)桿菌GVPC選擇添加劑 1.10241.0001 MERCK默克
28723 LB broth acc.to Lennox LB肉湯 1.00547.0500 MERCK默克
28724 LEIFSON agar deoxycholate citrate agar acc.to LEIFSON ,modified LEIFSON 改性瓊脂/脫氧膽鹽檸檬檬酸鹽瓊脂 1.02896.0500 MERCK默克
28725 Letheen agar base modified letheen 改性瓊脂基礎(chǔ) 1.10404.0500 MERCK默克
28726 Letheen-Broth Base modified letheen 改性肉湯基礎(chǔ) 1.10405.0500 MERCK默克
28727 Agar LEVINE-EMB eosine-methylene blue-lactose agar acc.to LEVINE, 1.01342.0500 MERCK默克
28728 列文EMB 瓊脂/伊紅*乳糖瓊脂
28729 Listeria enrichment broth acc.to FDA 李斯特氏菌富集肉湯 1.10549.0500 MERCK默克
28730 Buffered Listeria Enrichment Broth base acc.to FDA/BAM1955 1.09628.0500 MERCK默克
28731 緩沖李斯特氏菌富集肉湯基礎(chǔ)
28732 Listeria enrichment broth( base)FDA/IDF-FIL 1.11951.0500 MERCK默克
28733 李斯特氏菌富集肉湯（基礎(chǔ)）
28734 Listeria selective enrichment supplement acc.to FDA-BAM 1992 1.11883.0500 MERCK默克
28735 李斯特氏菌選擇富集添加劑
28736 Buffered Listeria Enrichment Broth base acc.to FDA/BAM1955/IDE-FIL 1.11781.0001 MERCK默克
28737 人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒李斯特氏菌選擇富集添加劑
28738 Lysine iron agar賴氨酸鐵瓊脂 1.11640.0500 MERCK默克
28739 M 17 agar acc.to TERZAGHI M17瓊脂 1.15108.0500 MERCK默克

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人免疫反應(yīng)性生長激素(irGH)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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