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人糖蛋白49A（Gp49a）ELISA試劑盒

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人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

28293 葡萄糖胰蛋白胨瓊脂 250(g)
28294 LIM培養(yǎng)基 250(g)
28295 酵母葡萄糖*瓊脂（YDC） 250(g)
28296 CVT瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
28297 麥康凱肌醇阿東醇羧芐*瓊脂基礎(chǔ)（MIAC） 100(g)
28298 腸球菌瓊脂（膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂） 250(g)
28299 腸球菌肉湯 250(g)
28300 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g)
28301 膽汁七葉苷瓊脂(BEA) 100(g)
28302 濾膜腸球菌瓊脂 250(g)
28303 CATC瓊脂 250(g)
28304 D/E中和瓊脂 250(g)
28305 D/E中和肉湯 250(g)
28306 AC肉湯 250(g)
28307 標(biāo)準(zhǔn)2號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250(g)
28308 m-TGE肉湯 250(g)
28309 m-TEC瓊脂 250(g)
28310 酵母粉瓊脂 250(g)
28311 液體沙氏培養(yǎng)基 250(g)
28312 A1培養(yǎng)基 250(g)
28313 LES Endo瓊脂 250(g)
28314 強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基 250(g)
28315 強(qiáng)化梭菌鑒別培養(yǎng)基 250(g)
28316 Wilkns-Chalgren瓊脂 250(g)
28317 TPGYT培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
28318 SC瓊脂基礎(chǔ) 250(g)
28319 Schaedler瓊脂 250(g)
28320 M17肉湯 100(g)
28321 M17瓊脂 100(g)
28322 改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
28323 改良麥康凱肉湯基礎(chǔ)（CT-MAC） 250(g)
28324 改良MC培養(yǎng)基 250(g)
28325 TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂 250(g)
28326 LB肉湯 250(g)
28327 LB瓊脂 250(g)
28328 玉米粉瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
28329 高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基 250(g)
28330 L型細(xì)菌高滲糖* 250(g)
28331 L型細(xì)菌高滲鹽* 250(g)
28332 疊氮鈉葡萄糖肉湯 250(g)
28333 乙基紫疊氮鈉肉湯 250(g)
28334 孟加拉紅（虎紅）培養(yǎng)基 250(g)
28335 孟加拉紅（虎紅）培養(yǎng)基 1000(g)
28336 KF鏈球菌瓊脂 100(g)
28337 KF鏈球菌瓊脂 100(g)
28338 BCYE瓊脂基礎(chǔ) 100(g)
28339 GVPC瓊脂基礎(chǔ) 100(g)
28340 GVPC添加物 5支/盒
28341 胰蛋白胨大豆瓊脂（TSA） 250(g)
28342 改良平板計(jì)數(shù)瓊脂（MPCA） 250(g)
28343 Honda氏產(chǎn)毒肉湯基礎(chǔ) 250(g)
28344 Elek氏培養(yǎng)基人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒 250(g)
28345 麥芽浸粉瓊脂（MEA） 250(g)
28346 結(jié)晶紫中性紅膽鹽MUG瓊脂（VRBA-MUG） 100(g)
28347 MUGal（4-甲基傘形酮-β-半乳糖苷）肉湯基礎(chǔ) 100(g)

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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