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人戊型肝炎病毒IgM（HEV-IgM）ELISA試劑盒

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人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

27804 甲基蓮心堿 Neferine 97%
27805 假荊芥屬苷 Nepetin-7-glucoside >96%
27806 姜黃素 Curcumin ≥98%
27807 芥子堿硫氰酸鹽 Sinapine thiocyanate ≥97%
27808 金石蠶苷 Poliumoside ≥98%
27809 金絲桃苷 Hyperoside ≥97%
27810 金絲桃素 Hypericin ≥95%
27811 京尼平苷/梔子苷 Geniposide ≥98%
27812 * Vinorelbine Tartrate ≥97%
27813 酒石酸長(zhǎng)春質(zhì)堿 Catharanthine Tartrate ≥98%
27814 桔梗皂苷D PlatycodinD 98%
27815 桔皮素 Tangeretin ≥98%
27816 菊苣酸 Cichoric acid ≥98%
27817 * Caffeic acid ≥98%
27818 開(kāi)環(huán)異落葉松樹(shù)脂酚 Secoisolariciresinol ≥98%
27819 開(kāi)環(huán)異落葉松樹(shù)脂酚二葡萄糖苷 Secoisolariciresinol diglucoside ≥98%
27820 柯里拉京 Corilagin 98%
27821 柯諾辛 Corynoxine ≥94%
27822 * Matrine ≥98%
27823 苦蒿素 Blinin （新增金龍膽草標(biāo)準(zhǔn)品） ≥95%
27824 苦杏仁苷 Amygdalin ≥98%
27825 奎寧 Quinine ≥95%
27826 * Capsaicin ≥98%
27827 老鸛草素 Geraniin 97%
27828 *次堿 wilforine ≥98%
27829 *定堿 wilfordine ≥97%
27830 *紅素，南蛇藤素 Celastrol (Tripterin, Tripterine) ≥98%
27831 *吉堿 wilforgine ≥97%
27832 *甲素（*內(nèi)酯醇） Triptolide ≥98%
27833 *內(nèi)酯甲 wilforlide A 98%
27834 *內(nèi)酯酮 Triptonide 97%
27835 * Reserpine ≥98%
27836 櫟櫻酸 Roburic acid ≥98%
27837 連翹苷 Forsythin ≥98%
27838 連翹脂苷 A Forsythiaside A ≥95%
27839 連翹脂苷B Forsythoside B ≥98%
27840 蓮心堿高氯酸鹽 Liensinine perchlorate ≥98%
27841 靈芝酸A GANODERIC ACID A ≥94%
27842 靈芝酸B GANODERIC ACID B ≥94%
27843 龍膽苦苷 Gentiopicroside ≥98%
27844 龍血素A Loureirin A 95%
27845 龍血素B Loureirin B ≥98.0%
27846 蘆丁 Rutin ≥95%
27847 蘆薈大黃素 Aloe-emodin ≥95%
27848 蘆薈苷A Barbaloin A ≥98%
27849 蘆竹堿 Gramine ≥98%
27850 魯斯可皂苷元 RUSCOGENIN 鑒別用（80%）
27851 綠原酸 Chlorogenic Acid ≥98%
27852 氯化兩面針堿 Nitidine Chloride ≥98%
27853 氯化木蘭花堿 magnoflorine chloride ≥98% 96%
27854 羅漢果甜苷V人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒 Mogroside V ≥98%
27855 羅漢果甜苷VI Mogroside VI ≥98%
27856 羅漢果皂甙IV Mogroside IⅤ ≥98%
27857 洛塞琳 Rosarin ≥95%
27858 洛緦 Rosin 97%

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)y以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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