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人抗呼吸道合胞病毒抗體（RSV）ELISA試劑盒

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人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

27476 雄烯二酮 Androstenedione ≥98%
27477 熊果苷 Arbutin ≥98%
27478 *甲 Hemslecin A ≥97%
27479 雪上一枝蒿乙素 Bullatine B ≥98%
27480 血根堿 Sanguinarine ≥97%
27481 亞麻木酚素(SDG) Lignans ≥97%
27482 延齡草苷 Trillin ≥98%
27483 鹽酸黃連堿 Coptisine hydrochloride ≥97%
27484 鹽酸去氫駱駝蓬堿 Harmine. hydrochloride ≥98%
27485 鹽酸石蒜堿 Lycorine hydrochloride ≥98%
27486 鹽酸水蘇堿   Stachydrine hydrochloride ≥98%
27487 鹽酸拓?fù)涮婵?Topotecan hydrochloride ≥98%
27488 * Berbamine Hydrochloride ≥98%
27489 鹽酸依立替康 Irrotecan hydrochloride ≥99%
27490 鹽酸育亨賓 Yohimbine hydrochloride ≥98%
27491 楊梅素 Myricetin ≥98%
27492 洋薊素/1,3-二咖啡?？鼘幩?Cynarin ≥98%
27493 葉黃素   Xanthophyll ≥90%
27494 乙酰蒲公英萜醇 Taraxeryl acetate ≥90%
27495 乙酰紫草素   Acetylshikonin ≥98%
27496 異佛手柑內(nèi)酯 Isobergapten ≥98%
27497 異甘草苷 Isoliquiritin ≥98%
27498 異甘草素 Isoliquiritigenin ≥98%
27499 異古倫賓 Isocolumbin ≥98%
27500 異葒草素 Isoorientin ≥98%
27501 異茴芹內(nèi)酯 Isopimpinellin ≥95%
27502 異蓮心堿 Isoliensinine 98%
27503 異綠原酸A（3,5-二咖啡?？鼘幩幔?Isochlorogenic acid A(3',5') ≥96%
27504 異綠原酸B（3,4-二咖啡?？鼘幩幔?Isochlorogenic acid B(3,4') ≥97%
27505 異綠原酸C（4,5-二咖啡酰奎寧酸） Isochlorogenic acid C(4,5') ≥97%
27506 異麥角甾苷 Isoacteoside ≥98%
27507 異木香內(nèi)脂   isoalantolactone ≥98%
27508 異嗪皮啶   Isofraxidin ≥98%
27509 異鼠李素-3-O-新橙皮糖苷 Isorhamnetin-3-O-neohesperidoside ≥98%
27510 異* Isosilybin (A+B) mixture ≥98%
27511 異香蘭素 Isovanillin ≥98%
27512 茵陳色原酮   Capillarisin ≥98%
27513 茵芋苷 Skimmin ≥98%
27514 淫羊藿次苷Ⅱ Icarisid Ⅱ 95%
27515 銀鍛苷 Tiliroside 97%
27516 銀杏內(nèi)酯C Gingkolide C ≥99%
27517 銀杏內(nèi)酯J Ginkgolide J ≥99%
27518 銀杏酸(C13:0) Ginkgolic Acid (C13:0) ≥98%
27519 銀杏酸(C17:1) Ginkgolic Acid (C17:1) ≥99%
27520 吲哚醇 Indolol ≥98%
27521 隱綠原酸/4-咖啡?？鼘幩?nbsp; 4-Dicaffeoylquinic Acid ≥97%
27522 柚皮甙二氫查爾酮 Naringin dihydrochalcone ≥98%
27523 柚皮素 Naringenin ≥98%
27524 右旋比靈堿 d-Bicuculline ≥98%
27525 右旋四氫巴馬汀 d-Tetrahydropalmatine ≥98%
27526 羽扇豆醇人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒 Lupeol ≥98%
27527 育亨賓 Yohimbine ≥97%
27528 鳶尾苷元磺酸鈉   Tectorigenin ≥98%
27529 鳶尾黃素 Tectorigenin ≥97%

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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