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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-08 22:54:35瀏覽次數(shù):212次
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人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
27366 * Mycophenolate mofetil ≥98%
27367 迷迭香酸 Rosmarinic acid ≥97%
27368 棉籽糖 Raffinose ≥98%
27369 棉子糖 Raffinose ≥98%
27370 莫諾苷 (莫諾忍冬苷) Morroniside 97%
27371 牡荊素 Vitexin ≥98%
27372 牡荊素葡萄糖苷 Vitexin-4 ≥95%
27373 擬人參皂苷-RT5 Pseudoginsenoside-RT5 ≥98%
27374 鳥苷 GUANOSINE ≥98%
27375 * Allantoin ≥98%
27376 檸檬酸 Citric acid monohydrate ≥98%
27377 牛蒡子苷 Arctiin ≥98%
27378 牛蒡子苷元 Arctigenin ≥98%
27379 ?;切廴パ跄懰?Aesculetin ≥98%
27380 牛七堿 Szechenyine ≥98%
27381 派利文堿 Perivine ≥98%
27382 七葉苷 Esculin ≥98%
27383 漆黃素 Fisetin ≥98%
27384 羥基積雪草酸 Madecassic acid ≥97%
27385 羥基酪醇 Hydroxytyrosol ≥97%
27386 羥基吳茱萸堿 Hydroxyevodiamine ≥98%
27387 茄尼醇 Solanesol 98%
27388 芹菜苷元 Apigenin ≥98%
27389 芹菜素 Apigenin ≥98%
27390 芹黃素 Apigenin ≥98%
27391 秦艽甲素 Gentiannine ≥95%
27392 秦皮苷 Fraxin ≥98%
27393 秦皮乙素 Aesculetin ≥98%
27394 青* Artesunate ≥98%
27395 青陽參苷元 Qingyangshengenin ≥98%
27396 * Scopolamine Hydrobromide ≥98%
27397 * LAPPACONITINE HYDROBROMIDE ≥98%
27398 * Colchicine ≥97%
27399 去甲氧基姜黃素 Demethoxycurcumin ≥96%
27400 去甲異波爾定 Norisoboldine ≥98%
27401 人參苷元F11 Aglycone F11 ≥97%
27402 人參皂苷 Rh3 Ginsenoside Rh3 ≥98%
27403 人參皂苷Rc Ginsenoside-Rc ≥96%
27404 人參皂苷Rd Ginsenoside-Rd ≥98%
27405 人參皂苷Rg1 Ginsenoside-Rg1 ≥98%
27406 人參皂苷Rg2 Ginsenoside-Rg2 ≥97%
27407 人參皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 ≥98%
27408 人參皂苷Rh3 Ginsenoside Rh3 ≥98%
27409 人參皂苷Ro Ginsenoside-Ro ≥97%
27410 鞣花酸 Ellagic acid 95% 98%
27411 * Daphnetin ≥95%
27412 三尖杉寧堿 Cephalomannine ≥95%
27413 傘形花內酯 Umbelliferone 98%
27414 桑色素 Morin ≥90%
27415 山奈酚人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒 Kaempferol ≥98%
27416 山奈酚葡萄糖醛酸苷 Kaempferol-3-beta-O-glucuronide ≥98%
27417 山奈苷 Kaempferitrin ≥98%
27418 山梔苷甲酯 Shanzhiside methyl ester 97%
27419 商陸皂苷甲 Esculentoside A ≥98%
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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