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人軍團(tuán)菌抗原（LP Ag）ELISA試劑盒

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人軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒，ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

26136 龍膽（堅(jiān)龍膽） TLC法鑒別 120988-200403 1.0g
26137 遠(yuǎn)志 TLC法鑒別 120989-200505 1.0g
26138 苦地丁 TLC法鑒別 120990-200404 0.5g
26139 刺五加 TLC法鑒別 120991- 5.0g
26140 柴胡 TLC法鑒別 120992-200705 0.5g
26141 * TLC法鑒別 120993-200604 1.0g
26142 射干 TLC法鑒別 120994-201005 1.0g
26143 野菊花 TLC法鑒別 120995-200704 1.0g
26144 番瀉葉（狹葉番瀉） TLC法鑒別 120996-200504 0.5g
26145 西洋參 TLC法鑒別 120997-200608 1.0g
26146 黃精(滇黃精) TLC法鑒別 120998-200403 2.0g
26147 八角茴香 TLC法鑒別 120999-200804 1.0g
26148 川貝母 TLC法鑒別 121000-201007 2.0g
26149 小檗皮 TLC法鑒別 121001-200202 1.0g
26150 馬鞭草 TLC法鑒別 121002-200202 2.0g
26151 木瓜 TLC法鑒別 121003-200504 0.5g
26152 太子參 TLC法鑒別 121004-2001006 1.0g
26153 止瀉木子 TLC法鑒別 121005-200302 1.0g
26154 片姜黃 TLC法鑒別 121006-200903 1.0g
26155 節(jié)裂小茴香 TLC法鑒別 121007-200302 1.0g
26156 玄參 TLC法鑒別 121008-200906 1g
26157 西紅花 TLC法鑒別 121009-200502 0.5g
26158 合歡花 TLC法鑒別 121010-200402 1.0g
26159 決明子（決明） TLC法鑒別 121011-200604 0.5g
26160 紅豆蔻 TLC法鑒別 121012-200502 1.0g
26161 麥冬 TLC法鑒別 121013-200908 1.0g
26162 兩面針 TLC法鑒別 201014-201003 1g
26163 訶子（訶子） TLC法鑒別 121015-200503 0.5g
26164 青蒿 TLC法鑒別 121016-200403 1.5g
26165 苦木 TLC法鑒別 121017- 0.5g
26166 苦玄參 TLC法鑒別 121018-200503 1g
26167 苦參 TLC法鑒別 121019-200705 1.0g
26168 羅漢果 TLC法鑒別 121020-200804 2g
26169 萎陵菜 TLC法鑒別 121021-200002 1.0g
26170 珍珠（皺紋冠蚌） TLC法鑒別 121022-200403 20mg
26171 蓽茇 TLC法鑒別 121023-200202 1.0g
26172 牽牛子 TLC法鑒別 121024-200804 1g
26173 香加皮 TLC法鑒別 121025-200503 1.0g
26174 *味 TLC法鑒別 121026-201005 1.0g
26175 穿山甲 TLC法鑒別 121027-200403 1.0g
26176 桔梗 TLC法鑒別 121028-200909 1.0g
26177 益智 TLC法鑒別 121029-200503 1g
26178 蛇床子 TLC法鑒別 121030-200405 0.5g
26179 鹿茸（梅花鹿） TLC法鑒別 121031-201003 0.4g
26180 淫羊藿(朝鮮淫羊藿) TLC法鑒別 121032-200501 0.2g
26181 續(xù)斷(川續(xù)斷) TLC法鑒別 121033-200909 3.0g
26182 綿馬貫眾 TLC法鑒別 121034-200302 1.0g
26183 滿山紅（興安杜鵑） TLC法鑒別 121035-200204 5.0g
26184 漏蘆（祁州漏蘆） TLC法鑒別 121036-200302 1.0g
26185 獐牙菜 TLC法鑒別 121037- 1g
26186 槲寄生 TLC法鑒別人軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒 121038-200403 1.5g
26187 丁香 TLC法鑒別 121039-200503 0.5g
26188 大棗 TLC法鑒別 121040-201006 1.0g
26189 女貞子 TLC法鑒別 121041-200703 1.0g

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑；
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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