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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-01-26 07:11:43瀏覽次數(shù):148次
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人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
25539 聚丙烯酸銨酯Ⅱ 供鑒別用 190055-201001 200mg
25540 人參二醇 含量測定 110701-200613 20mg
25541 人參三醇 鑒別 110702-200311 20mg
25542 人參皂苷 Rgl 含量測定 110703-200726 20mg
25543 人參皂苷 Rb1 含量測定 110704-200921 20mg
25544 ▲士的寧 含量測定 110705-200306 20mg
25545 * 含量測定 110707-201011 1ml
25546 丹皮酚 含量測定 110708-200506 200mg
25547 * 含量測定 110709-200505 50mg
25548 桂皮醛 含量測定 110710-201016 0.5ml
25549 粉防己堿 含量測定 110711-200708 20mg
25550 鹽酸水蘇堿 含量測定 110712-201010 20mg
25551 * 含量測定 110713-200911 30mg
25552 * 含量測定 110715-201016 40mg
25553 靛藍(lán) 含量測定 110716-200610 20mg
25554 * 含量測定 110717-200204 20mg
25555 酯蟾毒配基 含量測定 110718-200507 20mg
25556 麝香酮 含量測定 110719-200512 0.15ml
25557 * 含量測定 110721-201014 20mg
25558 柚皮苷 含量測定 110722-200610 20mg
25559 甘草次酸 含量測定 110723-200612 20mg
25560 去氧膽酸 鑒別 110724-200207 100mg
25561 * 含量測定 110725-200711 0.5ml
25562 延胡索乙素 含量測定 110726-200711 20mg
25563 辛弗林 含量測定 110727-200306 20mg
25564 * 含量測定 110728-200506 100mg
25565 厚樸酚 含量測定 110729-200411 20mg
25566 和厚樸酚 含量測定 110730-201011 20mg
25567 甘草酸銨 含量測定 110731-200614 20mg
25568 鹽酸巴馬汀 含量測定 110732-200907 50mg
25569 鹽酸藥根堿 鑒別 110733-200806 20mg
25570 酸棗仁皂苷 A 含量測定 110734-200510 20mg
25571 * 鑒別 110735-200102 100mg
25572 芍藥苷 含量測定 110736-201035 20mg
25573 淫羊藿苷 含量測定 110737-200415 20mg
25574 異補(bǔ)骨脂素 含量測定 110738-200511 20mg
25575 補(bǔ)骨脂素 含量測定 110739-200814 20mg
25576 秦皮甲素 含量測定 110740-200104 20mg
25577 秦皮乙素 含量測定 110741-200506 20mg
25578 熊果酸 含量測定 110742-200516 20mg
25579 * 含量測定 110743-200905 200mg
25580 菝契皂苷元 含量測定 110744-200509 20mg
25581 三七皂苷 R1 含量測定 110745-200617 20mg
25582 馬兜鈴酸 A TLC檢查 110746-200507 20mg
25583 樟腦 含量測定 110747-200507 100mg
25584 α-香附酮 鑒別 110748-201010 0.15ml
25585 梔子苷 含量測定 110749-200714 20mg
25586 貝母素甲 含量測定 110750-200608 20mg
25587 貝母素乙 含量測定 110751-200709 20mg
25588 * 含量測定人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒 110752-200912 20mg
25589 綠原酸 含量測定 110753-200413 20mg
25590 人參皂苷 Re 含量測定 110754-200822 20mg
25591 * 含量測定 110755-9003 20mg
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗丁型肝炎病毒抗體(anti-HDV)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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