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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-04 17:26:25瀏覽次數(shù):186次
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人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
24503 蟲酰肼 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):112410-23-8 100mg
24504 吡螨胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):119168-77-3 0.1g
24505 特丁隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):34014-18-1 250mg
24506 四氯硝基苯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):117-18-0 250mg
24507 氟苯脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):83121-18-0 250mg
24508 七氟菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):79538-32-2 100mg
24509 雙硫磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):3383-96-8 250mg
24510 得殺草 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):149979-41-9 100mg
24511 特草定 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):5902-51-2 250mg
24512 特丁磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):13071-79-9 100mg
24513 特丁凈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):886-50-0 250mg
24514 特丁津 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):5915-41-3 250mg
24515 殺蟲威 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):22248-79-9 250mg
24516 四克利 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):112281-77-3 0.1g
24517 四氯殺螨砜 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):116-29-0 250mg
24518 噻菌靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):148-79-8 250mg
24519 噻蟲啉 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):111988-49-9 100mg
24520 快勝 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):153719-23-4 100mg
24521 * 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):15318-45-3 100mg
24522 噻草啶 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):117718-60-2 100mg
24523 賽苯隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):51707-55-2 250mg
24524 甲基噻吩磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):79277-27-3 100mg
24525 禾草丹 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):28249-77-6 250mg
24526 甲基乙拌磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):640-15-3 100mg
24527 硫粘菌素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):55297-96-6 100mg
24528 * 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):108050-54-0 100mg
24529 * 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):100mg
24530 托芬那酸 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):13710-19-5 100mg
24531 甲苯三嗪酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):69004-03-1 100mg
24532 甲苯氟磺胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):731-27-1 250mg
24533 *苯草酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):87820-88-0 250mg
24534 三唑酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):43121-43-3 250mg
24535 三唑醇(異構(gòu)體A) 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):250m'g
24536 三唑醇(異構(gòu)體A和B混合物) 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):250mg
24537 野麥畏 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):2303-17-5 250mg
24538 醚苯黃隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):82097-50-5 100mg
24539 三唑磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):24017-47-8 250mg
24540 苯黃隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):101200-48-0 100mg
24541 敵百蟲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):52-68-6 250mg
24542 三氯吡氧乙酸標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 55335-06-3 250MG
24543 十三嗎啉 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):24602-86-6 100MG
24544 * 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):141517-21-7 100MG
24545 氟菌唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):68694-11-1 100mg
24546 殺鈴脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):64628-44-0 100MG
24547 氟樂靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):1582-09-8 250MG
24548 氟胺磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):126535-15-7 100MG
24549 嗪氨靈標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 26644-46-2 250MG
24550 甲氧芐氨嘧啶 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):738-70-5 250MG
24551 抗倒酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):95266-40-3 100MG
24552 吡那敏 標(biāo)準(zhǔn)品 人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒 CAS號(hào):91-81-6 25G
24553 滅菌唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):131983-72-7 10MG
24554 單克素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):200MG
24555 井崗霉素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):37248-47-8 250MG
24556 完滅硫磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):2275-23-2 100MG
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人抗白蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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