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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-02-22 17:45:30瀏覽次數(shù):140次
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人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
24229 氟噻草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:142459-58-3 100mg
24230 氟蟲脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:101463-69-8 250mg
24231 氟甲喹 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:42835-25-6 250mg
24232 氟氯苯菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:69770-45-2 100mg
24233 氟唑嘧磺草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:98967-40-9 100mg
24234 氟烯草酸 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:87546-18-7 100mg
24235 丙炔氟草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:103361-09-7 100mg
24236 氟尼辛* 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:100mg
24237 伏草隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:2164-17-2 250mg
24238 FLUOROIMIDE 41205-21-4 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:10ng/ul 10ml
24239 喹唑菌酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:136426-54-5 100mg
24240 氟草煙 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:69377-81-7 100mg
24241 氟哇唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:85509-19-9 100mg
24242 氟硫滅 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:106917-52-6 100mg
24243 氟噻乙草酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:117337-19-6 100mg
24244 氟酰胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:66332-96-5 100mg
24245 粉唑醇 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:76674-20-1 100mg
24246 氟胺氰菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:102851-06-9 250mg
24247 滅菌丹 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:133-07-3 250mg
24248 氟磺胺草醚 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:72178-02-0 100mg
24249 甲酰胺黃隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:173159-57-4 100MG
24250 氯吡脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:68157-60-8 100mg
24251 伐蟲脒鹽酸鹽 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:23422-53-9 250mg
24252 安果 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:2540-82-1 250mg
24253 Fosetyl-aluminum 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:39148-24-8 250mg
24254 Fosfomycin Calcium 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:25992-22-7 100mg
24255 唑磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:98886-44-3 30mg
24256 四氯苯酞標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 87-41-2 100mg
24257 呋線威 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:65907-30-4 250mg
24258 Gentamycin-2,5-sulfate hydrate 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1405-41-0 250mg
24259 赤霉素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:28281 100mg
24260 Gibberellin A3標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 28281 250mg
24261 草胺磷銨鹽 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:77182-82-2 250mg
24262 GLYCALPYRAMIDE標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 200mg
24263 草甘膦標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 1071-83-6 250mg
24264 芐螨醚 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:111872-58-3 100mg
24265 常山酮乳酸鹽 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:82186-71-8 1ml
24266 氯吡嘧磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:100784-20-1 100mg
24267 哈洛克酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:321-55-1
24268 吡氟氯禾靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:69806-34-4 250mg
24269 七氯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:76-44-8 100mg
24270 六氯苯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:118-74-1 250mg
24271 六那唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:79983-71-4 100mg
24272 氟鈴脲 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:86479-06-3 100mg
24273 環(huán)嗪酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:51235-04-2 100mg
24274 噻螨酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:78587-05-0 100mg
24275 氟蟻腙 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:67485-29-4 100mg
24276 * 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:7803-51-2 10G
24277 惡霉靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:10004-44-1 20mg
24278 烯菌靈標(biāo)準(zhǔn)品 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒 CAS號: 35554-44-0 100mg
24279 IMAZAMETHABENZ METHYL ESTER 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:81405-85-8 100mg
24280 銨基咪草啶酸 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:114311-32-9 100mg
24281 Imazapic 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:104098-48-8 100mg
24282 滅草煙 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:81334-34-1 100mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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