人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

24168 敵草隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：330-54-1 250mg
24169  多果定 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：1g
24170  多拉菌素 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：117704-25-3 100mg
24171 *鹽（脫氧*）標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 24390-14-5 100mg
24172  因滅汀（Emamectin-benzoate(苯甲酸鹽)） 155569-91-8 250mg
24173  硫丹（α+β~2+1）標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 115-29-7 250mg
24174  草燕滅一水合物 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：62059-43-2 250mg
24175 異狄氏劑 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：72-20-8 250mg
24176 * 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：93106-60-6 100mg
24177  氟環(huán)唑 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：135319-73-2 100mg
24178 依普菌素 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：123997-26-2 100mg
24179 丙草丹 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：759-94-4 250mg
24180  * 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：114-07-8 100mg
24181  氟消草 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：55283-68-6 250mg
24182  胺苯磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：97780-06-8 100mg
24183  乙烯利 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：16672-87-0 250mg
24184 乙硫磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：563-12-2 250mg
24185  乙呋草黃 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：26225-79-6 250mg
24186 乙氧酰胺苯甲酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：100mg
24187 丙線磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：13194-48-4 100MG
24188 乙氧喹啉 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：91-53-2 250mg
24189 乙氧嘧磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：126801-58-9 100mg
24190  乙氧嘧磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：126801-58-9 100mg
24191  二溴乙烯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：106-93-4 1g
24192 1,1-二氯乙烯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 75-35-4 500mg
24193  醚菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：80844-07-1 100mg
24194 乙螨唑 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：153233-91-1 10mg
24195  氯唑靈(土菌靈) 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：2593-15-9 100mg
24196  丁香油酚 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：97-53-0 250mg
24197  惡唑菌酮 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：131807-57-3 2ml
24198 伐滅磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：52-85-7 250mg
24199 咪唑菌酮 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：161326-34-7 100mg
24200  克線磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：22224-92-6 250mg
24201  氯苯嘧啶醇 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：60168-88-9 250mg
24202  腈苯唑（解草唑） 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：114369-43-6 100mg
24203 苯丁錫 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：13356-08-6 250mg
24204  皮蠅磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：299-84-3 250mg
24205  環(huán)酰菌胺 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：126833-17-8 100mg
24206 殺螟硫磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：122-14-5 250mg
24207 仲丁威 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：3766-81-2 250mg
24208  2,4,5滴丙酸（2，4，5-TP） 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：93-72-1 250mg
24209  苯硫威 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：62850-32-2 100mg
24210  惡唑禾草靈 66441-23-4 100mg
24211 雙氧威 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)72490-01-8 250mg
24212  甲氰菊酯標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 39515-41-8 250mg
24213  粉銹啉 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：67306-03-0 250mg
24214  唑螨酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：111812-58-9 100mg
24215  倍硫磷 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：55-38-9 250mg
24216  氰戊菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：51630-58-1 250mg
24217  氟蟲清（氟蟲腈） 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：120068-37-3 100mg
24218  甲氟燕靈（麥草氟甲酯）標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)： 52756-25-9 250mg
24219 嘧啶磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：104040-78-0 50mg
24220  * 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：76639-94-6 250mg
24221 嘧螨酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：229977-93-9 100mg
24222  吡氟禾草靈 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：69335-91-7 2ml
24223  氟啶胺 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：79622-59-6 100mg
24224  啶蜱脲 標(biāo)準(zhǔn)品  人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒CAS號(hào)：86811-58-7 100mg
24225  氟苯噠唑 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：31430-15-6 100mg
24226 氟酮磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：79660-72-3 10ng/ul 10ml
24227  氟氰戊菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品  CAS號(hào)：70124-77-5 100mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人封閉抗體(BA)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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