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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-13 19:49:00瀏覽次數(shù):161次
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人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
23948 2-乙酰氨基-5-硝基噻唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:140-40-9 100mg
23949 2-苯基* 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:90-43-7 250mg
23950 對氯苯氧乙酸 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:122-88-3 250mg
23951 阿維菌素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:71751-41-2 100mg
23952 乙酰甲胺磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:30560-19-1 250mg
23953 滅螨醌 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:57960-19-7 1ml
23954 吡蟲清 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:160430-64-8 100MG
23955 乙草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:34256-82-1 100mg
23956 苯并噻二唑(簡稱BTH) 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:135158-54-2 0.1g
23957 三氟羧草醚標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 50594-66-6 250MG
23958 氟丙菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:101007-06-1 100MG
23959 阿克洛胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:3011-89-0 100MG
23960 甲草胺 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:15972-60-8 250MG
23961 棉鈴?fù)?biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 83130-01-2 1ML
23962 涕滅威 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:116-06-3 100MG
23963 涕滅砜威 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1646-88-4 10mg in Ampule
23964 艾氏劑標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 309-00-2 250MG
23965 狄氏劑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:60-57-1 100MG
23966 丙烯菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:584-79-2 100MG
23967 草毒死標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 93-71-0 100MG
23968 枯殺達(dá) 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:55635-13-7 250MG
23969 烯丙孕素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:850-52-2 100MG
23970 莠滅凈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:834-12-8 250MG
23971 艾維激素 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:55720-26-8 5mg
23972 雙甲脒 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:33089-61-1 250MG
23973 氨芐* 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:7177-48-2 250MG
23974 氨丙啉 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:137-88-2 250MG
23975 莎稗磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:64249-01-0 250MG
23976 阿布拉霉素標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 65710-07-8 0.25 g
23977 殺螨特標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 140-57-8 2000 μg/mL
23978 *標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 61336-70-7 250MG
23979 磺草靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:3337-71-1 250MG
23980 莠去津標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 1912-24-9 250MG
23981 氧環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 60207-31-0 250MG
23982 甲基吡惡磷 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:35575-96-3 250MG
23983 氯丁酰苯哌嗪標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1649-18-9 50MG
23984 四唑嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 120162-55-2 10MG
23985 甲基谷硫磷標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 86-50-0 250MG
23986 腈嘧菌酯標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 131860-33-8 100MG
23987 * 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1405-87-4 250MG
23988 燕麥靈標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 101-27-9 100MG
23989 苯霜靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:71626-11-4 250MG
23990 惡蟲威標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 22781-23-3 250MG
23991 乙丁氟靈 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 1861-40-1 250MG
23992 丙硫克百威標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 82560-54-1 100MG
23993 解草酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 98730-04-2 250MG
23994 芐嘧磺隆 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:83055-99-6 100MG
23995 地散磷標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 741-58-2 250MG
23996 苯達(dá)松 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:25057-89-0 250MG
23997 苯并雙環(huán)酮 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:156963-66-5 10ml
23998 氨苯乙酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:34584 100MG
23999 吡草酮 標(biāo)準(zhǔn)品 人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒 CAS號:82692-44-2 1ml
24000 6-苯甲?;汆堰?nbsp;標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 1214-39-7 100MG
24001 芐* 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號:1538-09-6 250MG
24002 *標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號: 378-44-9 50MG
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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