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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-01 16:04:06瀏覽次數(shù):252次
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人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
23679 山茱萸新苷
23680 山茱萸苷
23681 莫諾苷 Morroniside 25406-64-8 HPLC≥97% 20mg/支
23682 (R型)人參皂苷Rg2 20(R)人參皂苷Rg2 20(R)Ginsenoside Rg2 分子式: C42H72O13
分子量: 784
HPLC≥98% 20mg/支
23683 商陸皂苷甲 分子式:C42H72O13
分子量: 784 HPLC≥98% 20mg/支
23684 白當(dāng)歸腦 Byakangelicol 26091-79-2 HPLC≥98% 20mg/支
23685 新*二氫查爾酮 Neosperidin dihydrochalcone 20702-77-6 HPLC≥98% 20mg/支
23686 馬錢苷酸 馬錢酸; 落干酸 Loganic acid 22255-40-9 HPLC≥98% 20mg/支
23687 仙鶴草酚B Agrimol B 55576-66-4 HPLC≥98% 10mg/支
23688 升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷 Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside 分子式: C35H56O9
分子量: 620.81 HPLC≥98% 10mg/支
23689 牡荊素鼠李糖苷 vitexin-2″-o-rhamnoside 64820-99-1 HPLC≥98% 20mg/支
23690 牡荊素 5, 7, 4’-三羥基黃酮-8-C-β-D-葡萄糖苷 Vitexin 3681-93-4 HPLC≥98% 20mg/支
23691 20(R)* 20(R)Ginsenoside Rg3 HPLC≥98% 20mg/支
23692 20(R)原人參三醇 20(R)Protopanaxatriol 分子式: C30H52O4
分子量: 476
HPLC≥98% 20mg/支
23693 *甲
23694 *乙
23695 蔓荊子黃素 紫花牡荊素 Vitexicarpin 479-91-4 HPLC≥98% 20mg/支
23696 龍血素B
23697 原蘇木素B 原巴西蘇木素 Protosappanin B 102036-29-3 HPLC≥98% 10mg/支
23698 辛夷脂素
23699 *醚內(nèi)酯 Linderane 13476-25-0 HPLC≥98% 20mg/支
23700 漆黃素 非瑟酮;紫鉚素;非瑟素 Fisetin 528-48-3 HPLC≥98% 20mg/支
23701 苦玄參苷IA
23702 苦玄參苷IA
23703 蘆薈苷 蘆薈甙;蘆薈大黃素甙 Aloin 1415-73-2 HPLC≥98% 20mg/支
23704 白術(shù)內(nèi)酯Ⅰ 蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅰ Atractylenolide I 73069-13-3 HPLC≥98% 20mg/支
23705 白術(shù)內(nèi)酯Ⅱ 蒼術(shù)內(nèi)酯Ⅱ
23706 白術(shù)內(nèi)酯III 蒼術(shù)內(nèi)酯III Atractylenolide III 73030-71-4 HPLC≥98% 20mg/支
23707 蟾毒靈
23708 根皮素 Phloretin 60-82-2 HPLC≥98% 20mg/支
23709 * Bilirubin 635-65-4 HPLC≥98% 20mg/支
23710 大葉茜草素
23711 *皂苷A
23712 羥基*A Hydroxysafflor yellow A 78281-02-4 HPLC≥98% 20mg/支
23713 琥珀酸
23714 槐角堿
23715 胡蘆巴堿
23716 * 祖師麻甲素 Daphnetin 207-632-8 HPLC≥98% 20mg/支
23717 小白菊內(nèi)酯 Parthenolide 20554-84-1 HPLC≥98% 20mg/支
23718 重樓皂苷I 重樓皂甙I Polyphyllin I 50773-41-6 HPLC≥98% 20mg/支
23719 重樓皂苷II 重樓皂甙II Polyphyllin II 76296-72-5 HPLC≥98% 20mg/支
23720 鼠尾草酚 鼠尾草苦內(nèi)脂 Carnosol 5957-80-2 HPLC≥98% 20mg/支
23721 重樓皂苷VI 重樓皂甙VI Polyphyllin VI 55916-51-3 HPLC≥98% 20mg/支
23722 重樓皂苷VII 重樓皂苷VII Polyphyllin VII 76296-75-8 HPLC≥98% 20mg/支
23723 烏金苷 烏金甙 HPLC≥98% 20mg/支
23724 獐牙菜苷 獐牙菜苷; 當(dāng)藥苷 Sweroside 14215-86-2 HPLC≥98% 20mg/支
23725 豆腐果苷 豆腐果甙;* Helicid 80154-34-3 HPLC≥98% 20mg/支
23726 * (?)-Huperzine A 102518-79-6 HPLC≥98% 20mg/支
23727 川陳皮素 川皮亭;蜜橘黃素 Nobiletin 478-01-3 HPLC≥98% 20mg/支
23728 告達(dá)亭苷元人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒 告達(dá)亭甙元 HPLC≥98% 20mg/支
23729 青陽參苷元A 青陽參甙元A Qingyangshengenin A HPLC≥98% 20mg/支
23730 青陽參苷元B 青陽參甙元B Qingyangshengenin B HPLC≥98% 20mg/支
23731 補(bǔ)骨脂酚 此產(chǎn)品為液體 Bakuchiol 10309-37-2 HPLC≥98% 20mg/支
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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