人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

23571 人參皂苷Rg2 Ginsenoside Rg2 52286-74-5 HPLC≥98% 20mg/支
23572 * Ginsenoside Rg3 14197-60-5 HPLC≥98% 20mg/支
23573 人參皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 63223-86-9 HPLC≥98% 20mg/支
23574 人參皂苷Rh2 Ginsenoside Rh2 78214-33-2 HPLC≥98% 20mg/支
23575 人參皂苷Rh3 Ginsenoside Rh3 105558-26-7 HPLC≥98% 20mg/支
23576 人參皂苷Rc Ginsenoside Rc 11021-14-0 HPLC≥98% 20mg/支
23577 人參皂苷Re Ginsenoside Re 51542-56-4 HPLC≥98% 20mg/支
23578 人參皂苷Rd Ginsenoside Rd 52705-93-8 HPLC≥98% 20mg/支
23579 人參皂苷Rf Ginsenoside Rf 52286-58-5 HPLC≥98% 20mg/支
23580 擬人參皂苷RT5 Pseudoginsenoside RT5 98474-78-3 HPLC≥98% 20mg/支
23581 原人參二醇 Protopanaxdiol 30636-90-9 HPLC≥98% 20mg/支
23582 原人參三醇 Protopanaxatriol 1453-93-6 HPLC≥98% 20mg/支
23583 人參二醇 Panaxadiol 19666-76-3 HPLC≥98% 20mg/支
23584 人參三醇 Panaxatriol 32791-84-7 HPLC≥98% 20mg/支
23585 刺五加皂苷B Ciwujianoside B 114902-16-8 HPLC≥98% 20mg/支
23586 紫*苷 紫*甙;刺五加甙B;紫丁香苷；刺五加苷B Syringin 118-34-3 HPLC≥98% 20mg/支
23587 刺五加苷E 刺五加甙E Eleutheroside E 39432-56-9 HPLC≥98% 20mg/支
23588 竹節(jié)香附素A 銀蓮花素A Raddeanin A 89412-79-3 HPLC≥98% 20mg/支
23589 注:刺五加葉中 Hederasaponin B 36284-77-2 HPLC≥98% 20mg/支
23590 柴胡皂苷A Saikosaponin A 20736-09-8 HPLC≥98% 20mg/支
23591 柴胡皂苷C Saikosaponin C 20736-08-7 HPLC≥98% 20mg/支
23592 柴胡皂苷D Saikosaponian D 20874-52-6 HPLC≥98% 20mg/支
23593 柴胡皂苷B1 Saikosaponin B1 58558-08-0
23594 柴胡皂苷B2 Saikosaponin B2 58316-41-9 HPLC≥98% 20mg/支
23595 土貝母苷甲 Tubeimoside I 102040-03-9 HPLC≥98% 20mg/支
23596 牛蒡子苷 牛蒡苷 Arctiin 20362-31-6 HPLC≥98% 20mg/支
23597 靛藍(lán) 靛蘭 Indigo 482-89-3 HPLC≥98% 20mg/支
23598 黃柏酮 奧巴叩酮 Obacunone 751-03-1 HPLC≥95% 20mg/支
23599 吳茱萸堿 Evodiamine 518-17-2 HPLC≥98% 20mg/支
23600 吳茱萸次堿 Rutaecarpine 84-26-4 HPLC≥98% 20mg/支
23601 松脂醇二葡萄糖苷 松酯醇二葡萄糖苷 Pinoresinol diglucoside 63902-38-5 HPLC≥98% 20mg/支
23602 2,3,5,4-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷 2,3,5,4-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷 2,3,5,4-tetrahydroxyl diphenylethylene-2-o-glucoside 82373-94-2 HPLC≥98% 20mg/支
23603 貝母素甲 貝母甲素 Peimine 23496-41-5 HPLC≥98% 20mg/支
23604 貝母素乙 貝母乙素 Peiminine 18059-10-4 HPLC≥98% 20mg/支
23605 連翹苷 Phillyrin 487-41-2; 96420-61-0 HPLC≥98% 20mg/支
23606 三七皂苷R1 三七皂甙R1 Notoginsenoside R1 80418-24-2 HPLC≥98% 20mg/支
23607 酸棗仁皂苷A 酸棗仁皂甙A Jujuboside A 55466-04-1 HPLC≥98% 20mg/支
23608 酸棗仁皂苷B 酸棗仁皂甙B Jujuboside B 55466-05-2 HPLC≥98% 20mg/支
23609 酸棗仁皂苷D 酸棗仁皂甙D Jujuboside D
23610 白樺脂酸 白樺酯酸 Betulinic acid 472-15-1 HPLC≥98% 20mg/支
23611 升麻素苷 升麻苷 Prim-O-glucosylcimifugin 80681-45-4 HPLC≥98% 20mg/支
23612 升麻素 Cimifugin 37921-38-3 HPLC≥98% 20mg/支
23613 類葉升麻苷 麥角甾苷；毛蕊花糖苷 Acteoside 61276-17-3 HPLC≥98% 20mg/支
23614 異類葉升麻苷 異麥角甾苷;異毛蕊花糖苷 Isoacteoside 61303-13-7 HPLC≥98% 20mg/支
23615 松果菊苷 海膽苷 Echinacoside 82854-37-3 HPLC≥98% 20mg/支
23616 5-O-甲基維斯阿米醇苷 5-O-Methylvisammioside 84272-85-5 HPLC≥98% 20mg/支
23617 異土木香內(nèi)酯 異阿蘭內(nèi)酯 Isoalantolactone 470-17-7 HPLC≥98% 20mg/支
23618 鹽酸藥根堿 Jatrorrhizine Hydrochloride 960383-96-4 HPLC≥98% 20mg/支
23619 白屈菜紅堿 白屈菜赤堿 Chelerythrine 34316-15-9 HPLC≥98% 20mg/支
23620 血根堿 人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒Sanguinarine 2447-54-3 HPLC≥98% 20mg/支
23621 氯化兩面針堿 Nitidine chloride 13063-04-2 HPLC≥98% 20mg/支
23622 * Homoharringtonine 26833-87-4 HPLC≥98% 20mg/支

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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