人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

23356 黃芩素 *元; 黃芩黃素 Baicalein 491-67-8 HPLC≥98% 20mg/支
23357 秦皮素 秦皮亭;白蠟樹內(nèi)酯 Fraxetin 574-84-5 HPLC≥98% 20mg/支
23358 秦皮甲素 Esculin 531-75-9 HPLC≥98% 20mg/支
23359 秦皮乙素 6,7-Dihydroxycoumarin 305-01-1 ≥98% 20mg/支
23360 綠原酸 Chlorogenic acid 327-97-9 HPLC≥98% 20mg/支
23361 新綠原酸 5-咖啡?？鼘幩?Neochlorogenic acid 906-33-2 HPLC≥98% 20mg/支
23362 隱綠原酸 4-咖啡?？鼘幩?Cryptochlorogenic acid 905-99-7 HPLC≥98% 20mg/支
23363 異綠原酸A 3,5-二咖啡酰奎寧酸 Isochlorogenic acid A 2450-53-5 HPLC≥98% 20mg/支
23364 異綠原酸B 3,4-二咖啡?？鼘幩?Isochlorogenic acid B 14534-61-3 HPLC≥98% 20mg/支
23365 異綠原酸C 4,5-二咖啡?？鼘幩?Isochlorogenic acid C 32451-88-0 HPLC≥98% 20mg/支
23366 1-咖啡酰奎寧酸 HPLC≥98% 20mg/支
23367 1,3-二咖啡?？鼘幩?洋薊酸;朝鮮薊酸;朝薊素;菜薊素 Cynarin 1182-34-9 HPLC≥98% 20mg/支
23368 1,5-二咖啡酰奎寧酸 1,5-Dicaffeoylquinic acid 30964-13-7 HPLC≥98% 20mg/支
23369 鹽酸巴馬汀 *;棕櫚堿 Palmatine hydrochloride 10605-02-4 HPLC≥98% 20mg/支
23370 * 橙皮甙 Hesperidin 520-26-3 HPLC≥98% 20mg/支
23371 新* 新橙皮甙 Neohesperidin 13241-33-3 HPLC≥98% 20mg/支
23372 柴胡皂苷B 柴胡皂甙B Saikosaponin B 此產(chǎn)品為柴胡皂苷B1和B2的混合體 HPLC≥98% 20mg/支
23373 橙皮素 Hesperitin 520-33-2 HPLC≥98% 20mg/支
23374 *內(nèi)酯 Andrographolide 5508-58-7 HPLC≥98% 20mg/支
23375 甘草酸 甘草甜素;甘草皂苷 Glycyrrhizic acid 1405-86-3 HPLC≥98% 20mg/支
23376 甘草次酸 Glycyrrhetinic acid 1449-05-4;471-53-4? HPLC≥98% 20mg/支
23377 *鹽 甘草酸銨 Glycyrrhizic acid ammonium salt 53956-04-0 HPLC≥98% 20mg/支
23378 甘草苷 甘草甙 Liquiritin 551-15-5 HPLC≥98% 20mg/支
23379 異甘草苷 異甘草甙 Isoliquiritin 5041-81-6 HPLC≥98% 10mg/支
23380 甘草素 甘草醇 Liquiritigenin 578-86-9 HPLC≥98% 20mg/支
23381 大黃酸 Rhein 478-43-3 HPLC≥98% 20mg/支
23382 大黃素 朱砂蓮甲素 Emodin 518-82-1 HPLC≥98% 20mg/支
23383 大黃素甲醚 Physcion 521-61-9 HPLC≥98% 20mg/支
23384 大黃酚 大黃根酸 Chrysophanol 481-74-3 HPLC≥98% 20mg/支
23385 蘆薈大黃素 蘆薈瀉素 Aloeemodin 481-72-1 HPLC≥98% 20mg/支
23386 楊梅素 楊梅黃酮;楊梅酮 Myricetin 529-44-2 HPLC≥98% 20mg/支
23387 二氫楊梅素 Dihydromyricetin 27200-12-0 HPLC≥98% 20mg/支
23388 阿魏酸 Ferulic acid 1135-24-6 HPLC≥98% 20mg/支
23389 白藜蘆醇 Resveratrol 501-36-0 HPLC≥98% 20mg/支
23390 虎杖苷 白藜蘆醇苷 Polydatin 27208-80-6 HPLC≥98% 20mg/支
23391 薄荷醇
23392 丹皮酚 芍藥醇;牡丹酚 Paeonol 552-41-0 HPLC≥98% 20mg/支
23393 丹酚酸A 丹參酚酸A Salvianolic acid A 96574-01-5 HPLC≥98% 20mg/支
23394 丹酚酸B 丹參酚酸B Salvianolic acid B 115939-25-8 HPLC≥98% 20mg/支
23395 丹參酮IIA Tanshinone IIA 568-72-9 HPLC≥98% 20mg/支
23396 丹參酮IIA-磺酸鈉
23397 丹參酮I Tanshinone I 568-73-0 HPLC≥98% 20mg/支
23398 二氫丹參酮I 二氫丹參酮 Dihydrotanshinone I 87205-99-0 HPLC≥98% 20mg/支
23399 隱丹參酮 Cryptotanshinone 35825-57-1 HPLC≥98% 20mg/支
23400 丹參素鈉 Sodium Danshensu 67920-52-9 HPLC≥98% 20mg/支
23401 冬凌草甲素 Oridonin 28957-04-2 HPLC≥98% 20mg/支
23402 * Coenzyme Q10 303-98-0 HPLC≥98% 20mg/支
23403 粉防己堿 * Tetrandrine 518-34-3 HPLC≥98% 20mg/支
23404 防己諾林堿 漢防已乙素 Fangchinoline 33889-68-8 HPLC≥98% 20mg/支
23405 *人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒 Podophyllotoxin 518-28-5 HPLC≥98% 20mg/支
23406 * 葛根黃酮 Puerarin 3681-99-0 HPLC≥98% 20mg/支
23407 黃芪總皂苷 Astragaloside 17429-69-5 UV≥98% 20mg/支
23408 黃芪甲苷 黃芪甲甙；黃芪皂苷IV Astragaloside IV 84687-43-4 HPLC≥98% 20mg/支

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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