人白介素1受體相關(guān)激酶4(IRAK4)ELISA試劑盒
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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-13 19:46:36瀏覽次數(shù):248次
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人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
23305 * 對照品 含量測定 171203-200303 50mg
23306 * 對照品 含量測定 1205-200203 100mg
23307 O6-單乙酰*鹽酸鹽 對照品 含量測定 171207-200512 20mg
23308 O3-單乙酰*氨基磺酸鹽 對照品 含量測定 171208-200508 20mg
23309 乙??纱?對照品 含量測定 171209-200507 20mg
23310 鹽酸甲基安非它明 對照品 含量測定 171212-9802 20mg
23311 * 對照品 含量測定 171216-200403 100mg
23312 * 對照品 含量測定 171217-200402 100mg
23313 阿普唑侖 對照品 含量測定 1218-9702 100mg
23314 艾司唑侖 對照品 含量測定 1219-0102 100mg
23315 * 對照品 含量測定 1220-9201 100mg
23316 異戊* 對照品 溶出度檢查 171221-200402 100mg
23317 苯* 對照品 含量測定 171222-200504 100mg
23318 司可*鈉 對照品 鑒別檢查 171223-200402 100mg
23319 * 對照品 含量測定 171224-200403 100mg
23320 氯* 對照品 含量測定 171227-200302 100mg
23321 2-氨基-2’-氯-5-硝基二苯酮 對照品 檢查 1228-9701 100mg
23322 * 對照品 含量測定 171229-200302 100mg
23323 鹽酸愛康寧 對照品 含量測定 171231-200505 20mg
23324 鹽酸甲基愛康寧 對照品 含量測定 171232-200504 20mg
23325 苯甲酰愛康寧 對照品 含量測定 171233-200405 20mg
23326 * 對照品 含量測定 171239-200504 50mg
23327 (-)-4,5-α-環(huán)氧基-3,14-二羥基*喃-6-酮 對照品 檢查 1240-9701 20mg
23328 對照品 含量測定 171244-200001 20mg
23329 * 對照品 含量測定 171246-200301 20mg
23330 氯氮卓 對照品 含量測定 171248-200301 100mg
23331 鹽酸納曲酮 對照品 HPLC法含量測定用 171249-200301 20mg
23332 馬來酸* 對照品 UV法含量測定用 171250-200401 50mg
23333 鹽酸二氫埃托啡 對照品 UV法含量測定用 171251-200401 20mg
23334 * 對照品 HPLC法含量測定用 171252-200401 50mg
23335 * 對照品 HPLC法含量測定 171253-200401 100mg
23336 2-氨基-2’,5-二氯二苯甲酮(*雜質(zhì)B) 對照品 TLC法有關(guān)物質(zhì)檢查 171254-200401 100mg
23337 鹽酸* 對照品 鑒別 171256-200401 100mg
23338 銀杏酸 對照品 含量測定 20mg
23339 橄欖苦苷 橄欖苦甙 Oleuropein 32619-42-4 HPLC≥98% 20mg/支
23340 黨參炔苷 黨參炔甙 Lobetyolin 136085-37-5 HPLC≥98% 10mg/支
23341 鼠尾草酸 Carnosic acid 639426 HPLC≥98% 20mg/支
23342 迷迭香酸 Rosmarinic acid 20283-92-5 HPLC≥98% 20mg/支
23343 黃豆黃苷 黃豆黃甙 Glycitin 40246-10-4 HPLC≥98% 20mg/支
23344 黃豆黃素 Glycitein 40957-83-3 HPLC≥98% 20mg/支
23345 大豆苷 大豆甙 Daidzin 552-66-9 HPLC≥98% 20mg/支
23346 大豆苷元 大豆甙元;* Daidzein 486-66-8 HPLC≥98% 20mg/支
23347 染料木素 染料木黃酮;金雀異黃酮 Genistein 446-72-0 HPLC≥98% 20mg/支
23348 染料木苷 5,7-三羥異黃酮-7-糖苷 Genistin 529-59-9 HPLC≥98% 20mg/支
23349 歐前胡素 Imperatorin 482-44-0 HPLC≥98% 20mg/支
23350 異歐前胡素 Isoimperatorin 482-45-1 HPLC≥98% 20mg/支
23351 遠志酸 Polygalacic acid 人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒22338-71-2 HPLC≥98% 20mg/支
23352 遠志皂苷元 Senegenin 2469-34-3 HPLC≥98% 20mg/支
23353 萊苞迪甙A 萊苞迪苷A Rebaudioside A 58543-16-1 HPLC≥98% 10mg/支
23354 * 黃芩甙 Baicalin 21967-41-9 HPLC≥98% 20mg/支
23355 野* 野黃芩甙;燈盞花乙素;* Scularin 27740-01-8 HPLC≥98% 20mg/支
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人促胃液素受體(GsaR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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