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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司


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人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒

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更新時間:2017-02-23 15:54:17瀏覽次數(shù):160次

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產(chǎn)品簡介

人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒實(shí)驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。

22274 芒果苷 對照品 含量測定 111607-200402 20mg
22275 金龍膽草提取物 對照品 鑒別 111608-200301 500mg
22276 甘草苷 對照品 含量測定 111610-200503 20mg
22277 苯* 對照品 鑒別 111615-200301 20mg
22278 牛磺酸 對照品 含量測定 111616-200301(暫行) 20mg
22279 二甲基甲酰胺 對照品 內(nèi)標(biāo)物 111617-200301 0.5ml
22280 * 對照品 鑒別 111618-200301 50mg
22281 氧化鋅 對照品 UV法含量測定用 111619-200301 100mg
22282 硒 對照品 含量測定 111620-200301 100mg
22283 油酸 對照品 鑒別 111621-200301 0.2ml
22284 * 對照品 含量測定 111622-200301 0.2ml
22285 柯里拉京 對照品 含量測定 111623-200302 20mg
22286 α-亞麻酸甲酯 對照品 GC法含量測定 111624-200301 0.2ml
22287 *甲酯 對照品 GC法含量測定 111625-200301 0.2ml
22288 5-羥甲基糠醛 對照品 鑒別 111626-200503 10mg
22289 沙棘油 對照品 鑒別 111627-200301 0.2ml
22290 2"-O-沒食子?;鸾z桃苷 對照品 含量測定 111629-200301 10mg
22291 糠酸 對照品 鑒別 111630-200301 20mg
22292 α-亞麻酸 對照品 含量測定 111631-200502 0.2ml
22293 射干苷 對照品 含量測定 111632-200501 20mg
22294 正十八烷 對照品 內(nèi)標(biāo)物 111636-200402 0.2ml
22295 羥基*A 對照品 含量測定 111637-200502 20mg
22296 蛻皮甾酮 對照品 含量測定 111638-200402 20mg
22297 馬錢苷(番木鱉苷、馬錢素) 對照品 含量測定 111640-200502 20mg
22298 正己酸 對照品 GC法鑒別 111641-200301 0.2ml
22299 甲基* 對照品 含量測定 111642-200301 0.2ml
22300 香葉醇 對照品 GC法含量測定 111643-200301 0.2ml
22301 * 對照品 含量測定 111645-200301 20mg
22302 D-半乳糖醛酸 對照品 UV法含量測定 111646-200301 50mg
22303 千金藤素 對照品 含量測定 111647-200301 20mg
22304 異* 對照品 鑒別 111649-200301 20mg
22305 苯甲醛 對照品 GC法含量測定 111650-200301 0.5ml
22306 卡維丁 對照品 含量測定用 111651-200301 20mg
22307 氧化槐果堿 對照品 TLC法有關(guān)物質(zhì)檢查 111652-200301 20mg
22308 白鮮堿 對照品 含量測定 111654-200301 20mg
22309 5-羥色胺鹽酸鹽 對照品 UV法含量測定 111656-200401 20mg
22310 烈香杜鵑油 對照品 鑒別 111657-200301 0.2ml
22311 * 對照品 鑒別 111658-200301 0.2ml
22312 * 對照品 鑒別 111659-200301 30mg
22313 龍血素A 對照品 含量測定 111660-200402 20mg
22314 表木栓醇 對照品 鑒別 111664-200502 20mg
22315 牻牛兒酮 對照品 含量測定 111665-200401 20mg
22316 二氫辣椒素(二氫*) 對照品 鑒別 111666-200401 20mg
22317 脫水卡維丁 對照品 含量測定 111667-200401 20mg
22318 牡荊素鼠李糖苷 對照品 含量測定 111668-200401 20mg
22319 松果菊苷 對照品 含量測定 111670-200503 20mg
22320 醋酸辛酯 對照品 GC法含量測定 111671-200401 0.5ml
22321 焦性沒食子酸 對照品 含量測定 111672-200401 100mg
22322 萘 對照品 GC內(nèi)標(biāo)物 111673-200401 100mg
22323 環(huán)己酮 對照品 GC內(nèi)標(biāo)物人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒 111674-200401 0.2ml
22324 正十九烷 對照品 GC內(nèi)標(biāo)物 111675-200402 0.2ml
22325 酪醇 對照品 含量測定 111676-200401 20mg
22326 正十五烷 對照品 GC內(nèi)標(biāo)物 111677-200401 0.2ml
22327 *乙酯 對照品 含量測定 111678-200401 50mg

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因: 
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣; 
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法: 
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因: 
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*; 
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法: 
1) 貼封片或加蓋; 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因: 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法: 
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干; 
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人表面活性蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒顯色:可能原因: 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑; 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法: 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流; 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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