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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-04 20:22:48瀏覽次數:211次
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人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
22164 * 對照品 鑒別 110873-9802 100mg
22165 * 對照品 鑒別 110874-9802 100mg
22166 瓜氨酸 對照品 鑒別 110875-200205 20mg
22167 * 對照品 鑒別 110876-200204 100mg
22168 兒茶素 對照品 含量測定 110877-200001 20mg
22169 表兒茶素 對照品 含量測定 110878-200102 20mg
22170 腺苷 對照品 含量測定 110879-200202 20mg
22171 土荊皮乙酸 對照品 含量測定 110880-200502 20mg
22172 龍腦 對照品 含量測定 110881-2005 20mg
22173 木蘭脂素 對照品 含量測定 110882-200504 20mg
22174 葫蘆巴堿 對照品 鑒別 110883-200502 20mg
22175 大葉茜草素 對照品 含量測定 110884-200203 20mg
22176 * 對照品 含量測定 110885-200102 20mg
22177 腺嘌呤 對照品 含量測定 110886-200001 20mg
22178 尿苷 對照品 鑒別 110887-200202 20mg
22179 環(huán)維黃楊星D 對照品 uv含量測定 110888-200502 20mg
22180 * 對照品 鑒別 110889-200102 100mg
22181 * 對照品 鑒別 110890-200001 100mg
22182 黃山藥皂苷提取物 對照品 鑒別 110891-200001 200mg
22183 積雪草苷 對照品 鑒別 110892-200403 20mg
22184 羥基積雪草苷 對照品 鑒別 110893-200201 20mg
22185 甜菜堿 對照品 含量測定 110894-200503 50mg
22186 雪上一枝蒿甲素 對照品 供比色法含量測定用 110895-200404 20mg
22187 琥珀酸 對照品 鑒別 110896-200202 20mg
22188 α-蒎烯 對照品 含量測定 110897-200001 0.5ml
22189 γ-亞麻酸甲酯 對照品 含量測定 110898-200202 0.2ml
22190 二十八烷醇 對照品 含量測定 110899-200302 10mg
22191 祖師麻甲素 (曾用名:*) 對照品 含量測定 110900-200405 20mg
22192 * 對照品 含量測定 111501-200001 50mg
22193 大豆苷元 對照品 鑒別 111502-200402 20mg
22194 芳樟醇 對照品 鑒別 111503-200001 50mg
22195 D-果糖 對照品 鑒別 111504-200001 30mg
22196 L(+)阿拉伯糖 對照品 鑒別 111506-200202 30mg
22197 蔗糖 對照品 含量測定 111507-200001 50mg
22198 D-木糖 對照品 含量測定 111508-200001 50mg
22199 三十烷醇 對照品 含量測定 111509-200302 20mg
22200 愈創(chuàng)木酚 對照品 含量測定 111510-200202 0.3ml
22201 濱蒿內酯 對照品 含量測定 111511-200001 20mg
22202 異龍腦 對照品 含量測定 111512-200201 20mg
22203 7—甲氧基香豆素 對照品 鑒別 111513-200001 20mg
22204 漢黃芩素 對照品 鑒別 111514-200403 20mg
22205 甜菊苷 對照品 鑒別 111515-200001 20mg
22206 棉酚 對照品 鑒別 111517-200001 20mg
22207 木犀草素 對照品 含量測定 111520-200504 20mg
22208 金絲桃苷 對照品 含量測定 111521-200303 20mg
22209 升麻素苷 對照品 含量測定 111522-200406 20mg
22210 5-O-甲基維斯阿米醇苷 對照品 含量測定 111523-200405 20mg
22211 木香烴內酯 對照品 含量測定 111524-200503 20mg
22212 去氫木香內酯 對照品 鑒別 111525-200404 20mg
22213 蒙花苷 對照品 含量測定人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒 111528-200504 20mg
22214 五味子酯甲 對照品 鑒別 111529-200302 20mg
22215 毛蕊花糖苷(麥角甾苷) 對照品 含量測定 111530-200505 20mg
22216 毛兩面針素 對照品 鑒別 111531-200001 20mg
22217 * 對照品 鑒別 111532-200202 50mg
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人基質金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F(xiàn)在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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