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人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白（AFP）ELISA試劑盒

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產(chǎn)品簡介

人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒，ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。

詳細(xì)介紹

人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

22007 雌酮對照品系統(tǒng)適用性（HPLC） 100849-200501 100mg
22008 人參二醇對照品鑒別 110701-200412 20mg
22009 人參三醇對照品鑒別 110702-200311 20mg
22010 人參皂苷Rgl 對照品含量測定 110703-200425 20mg
22011 人參皂苷Rb1 對照品含量測定 110704-200420 20mg
22012 士的寧對照品含量測定 110705-200306 20mg
22013 * 對照品含量測定 110707-200107 1ml
22014 丹皮酚對照品含量測定 110708-200506 200mg
22015 * 對照品含量測定 110709-200505 50mg
22016 桂皮醛對照品含量測定 110710-200513 0.5ml
22017 粉防己堿對照品含量測定 110711- 20mg
22018 鹽酸水蘇堿對照品含量測定 110712-200508 20mg
22019 * 對照品含量測定 110713-200208 30mg
22020 * 對照品含量測定 110715-200514 40mg
22021 靛藍(lán) 對照品鑒別 110716-200509 30mg
22022 * 對照品含量測定 110717-200204 30mg
22023 酯蟾毒配基對照品含量測定 110718-200507 20mg
22024 麝香酮對照品 GC含量測定 110719-200511 0.15ml
22025 * 對照品含量測定 110721-200512 20mg
22026 柚皮苷對照品含量測定 110722-200309 20mg
22027 甘草次酸對照品含量測定 110723-200411 20mg
22028 去氧膽酸對照品鑒別 110724-200207 100mg
22029 * 對照品鑒別 110725-200209 0.5ml
22030 延胡索乙素對照品含量測定 110726-200409 20mg
22031 辛弗林對照品含量測定 110727-200306 30mg
22032 * 對照品含量測定 110728-200506 100mg
22033 厚樸酚對照品含量測定 110729-200309 20mg
22034 和厚樸酚對照品含量測定 110730-200307 20mg
22035 甘草酸銨對照品含量測定 110731-200511 20mg
22036 鹽酸巴馬汀對照品含量測定 110732-200506 50mg
22037 鹽酸藥根堿對照品鑒別 110733-200005 20mg
22038 酸棗仁皂苷A 對照品含量測定 110734-200509 20mg
22039 * 對照品鑒別 110735-200102 200mg
22040 芍藥苷對照品含量測定 110736-200526 20mg
22041 淫羊藿苷對照品含量測定 110737-200414 20mg
22042 異補(bǔ)骨脂素對照品含量測定 110738-200511 20mg
22043 補(bǔ)骨脂素對照品含量測定 110739-200511 20mg
22044 秦皮甲素對照品含量測定 110740-200406 20mg
22045 秦皮乙素對照品含量測定 110741-200506 20mg
22046 熊果酸對照品含量測定 110742-200516 20mg
22047 * 對照品含量測定 110743-200504 200mg
22048 菝契皂苷元對照品含量測定 110744-200508 20mg
22049 三七皂苷R1 對照品含量測定 110745-200415 20mg
22050 馬兜鈴酸A 對照品鑒別 110746-200507 20mg
22051 樟腦對照品含量測定 110747-200507 50mg
22052 α-香附酮對照品鑒別 110748-200507 0.15ml
22053 梔子苷對照品含量測定 110749-200511 20mg
22054 貝母素甲對照品鑒別人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒 110750-200506 20mg
22055 貝母素乙對照品含量測定 110751-200504 20mg
22056 * 對照品含量測定 110752-200511 20mg
22057 綠原酸對照品含量測定 110753-200413 20mg

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1）標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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