人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

21788 氯美扎酮 對(duì)照品 UV法溶出度檢查 100408-200401 100mg
21789 * 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定 100410-200301 100mg
21790 *  對(duì)照品 HPLC含量測(cè)定 100411-200501 100mg
21791 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100412-200401 100mg
21792 * 對(duì)照品 含量測(cè)定（UV） 100414-200501 100mg
21793 * 對(duì)照品 含量測(cè)定用 100415-200301 50mg
21794 曲可蘆丁 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100416-200503 100mg
21795 二羥丙* 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100417-200501 100mg
21796 茜素雙酯 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定 100418-200401 50mg
21797 苯甲酸 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100419-200301 50mg
21798 鹽酸* 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100420-200301 100mg
21799 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100421-200401 100mg
21800 * 對(duì)照品 含量測(cè)定（HPLC） 100422-200501 100mg
21801 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100424-200301 50mg
21802 * 對(duì)照品 含量測(cè)定用 100425-200301 50mg
21803 * 對(duì)照品 供鑒別用 100426-200301 50mg
21804 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100427-200301 50mg
21805 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100428-200401 50mg
21806 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100429-200401 50mg
21807 * 對(duì)照品 UV法溶出度檢查 100430-200501 100mg
21808 * 對(duì)照品 含量測(cè)定 100431-200401 50mg
21809 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100432-200401 50mg
21810 * 對(duì)照品 HPLC含量測(cè)定 100433-200301 50mg
21811 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100434-200301 50mg
21812 *（*異煙肼） 對(duì)照品 UV法溶出度檢查 100438-200401 100mg
21813 * 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定用 100439-200301 50mg
21814 * 對(duì)照品 TLC法檢查用 100440-200301 50mg
21815 * 對(duì)照品 UV法溶出度檢查 100441-200401 50mg
21816 * 對(duì)照品 UV法溶出度檢查用 100442-200301 100mg
21817 對(duì)羥基苯甲酸丙酯 對(duì)照品 HPLC檢查 100444-200401 100mg
21818 * 對(duì)照品 含量測(cè)定（HPLC） 100446-200501 100mg
21819 * 對(duì)照品 HPLC含量測(cè)定 100452-200301 50mg
21820 * 對(duì)照品 含量測(cè)定（HPLC） 100454-200501 100mg
21821 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100455-200401 100mg
21822 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100456-200301 50mg
21823 硫必利雜質(zhì)A【2-甲氧基-5-甲磺?；郊姿帷?對(duì)照品 TLC法鑒別 100457-200401 50mg
21824 硫必利雜質(zhì)B  【2-甲氧基-5-甲磺?；郊姿峒柞ァ?對(duì)照品 TLC法鑒別 100458-200401 50mg
21825 * 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定 100459-200401 50mg
21826 新*鈉 對(duì)照品 含量測(cè)定（HPLC） 100462-200501 100mg
21827 * 對(duì)照品 TLC法含量測(cè)定 100463-200401 100mg
21828 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100465-200401 50mg
21829 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100466-200401 100mg
21830 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100468-200401 50mg
21831 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定 100469-200401 50mg
21832 溴丙胺肽林 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100471-200301 50mg
21833 * 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100472-200401 50mg
21834 * 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定 100473-200401 50mg
21835 * 對(duì)照品 含量測(cè)定 100476-200301 50mg
21836 無(wú)水* 對(duì)照品 含量測(cè)定  100480-200501 100mg
21837 * 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定 100483-200402 50mg
21838 水楊酰胺 對(duì)照品 HPLC法含量測(cè)定用 100485-200301 100mg
21839 * 對(duì)照品 UV法溶出度檢查用 100487-200301 50mg
21840 * 對(duì)照品 UV法含量測(cè)定 100489- 100mg
21841 三氯叔丁醇 對(duì)照品 GC鑒別用 100492-200301 50mg

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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