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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2016-12-28 00:52:47瀏覽次數(shù):189次
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人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
21304 酸棗仁皂甙B Jujuboside B HPLC≥98% 20mg/支
21305 酸棗仁皂甙D Jujuboside D HPLC≥98% 20mg/支
21306 白樺脂酸 Betulinic acid HPLC≥98% 20mg/支
21307 升麻素苷 Prim-o-glucosylcimifugin HPLC≥98% 20mg/支
21308 升麻素 cimifugin HPLC≥98% 20mg/支
21309 類(lèi)葉升麻苷(麥角甾苷) acteoside HPLC≥98% 20mg/支
21310 異類(lèi)葉升麻苷(異麥角甾苷) Isoacteoside HPLC≥98% 20mg/支
21311 松果菊苷 Echinacoside HPLC≥98% 20mg/支
21312 5-O-甲基維斯阿米醇苷 4’-O-glucopyranosyl-5-O- HPLC≥98% 20mg/支
21313 methylvisamminol
21314 鹽酸吐根酚堿 Cephaeline hydrochloride HPLC≥98% 20mg/支
21315 鹽酸藥根堿 Jatrorrhizine Hydrochloride HPLC≥98% 20mg/支
21316 白屈菜紅堿 Chelerythrine HPLC≥98% 20mg/支
21317 血根堿 Sanguinarine HPLC≥98% 20mg/支
21318 氯化兩面針堿 Nitidine Chloride HPLC≥98% 20mg/支
21319 * Homoharringtonine HPLC≥98% 20mg/支
21320 蘆竹堿 Gramine HPLC≥98% 20mg/支
21321 * Reserpine HPLC≥98% 20mg/支
21322 白楊素 Chrysin HPLC≥98% 20mg/支
21323 白楊素-6-C-葡萄糖基-8-C-阿拉伯糖甙 HPLC≥98% 20mg/支
21324 * Camptothecine HPLC≥98% 20mg/支
21325 續(xù)隨二萜醇 Euhorbiasteroid HPLC≥98% 20mg/支
21326 千金子二萜醇 Lathyrol HPLC≥98% 20mg/支
21327 龍腦 Borneol HPLC≥98% 20mg/支
21328 5-羥甲基糠醛 5-hydroxymethyl-2-furaldehyde HPLC≥95% 20mg/支
21329 β-胡蘿卜素 β-Carotene HPLC≥90% 20mg/支
21330 百秋李醇 Patchouli alcohol HPLC≥98% 20mg/支
21331 去氫木香內(nèi)酯 Dehydrocostus Lactone HPLC≥98% 20mg/支
21332 木香烴內(nèi)酯 Costunlide HPLC≥98% 20mg/支
21333 補(bǔ)骨脂素 Psoralen HPLC≥98% 20mg/支
21334 異補(bǔ)骨脂素 Isopsoralen HPLC≥98% 20mg/支
21335 肉桂酸 Cinnamic acid HPLC≥98% 20mg/支
21336 肉桂醇 Cinnamyl alcohol HPLC≥98% 20mg/支
21337 肉桂醛 Cinnamaldehyde HPLC≥98% 20mg/支
21338 果糖 Fructose HPLC≥98% 20mg/支
21339 芒果苷 Mangiferin HPLC≥98% 20mg/支
21340 新芒果苷 Neomangiferin HPLC≥98% 20mg/支
21341 DL-薄荷醇 Menthol HPLC≥98% 20mg/支
21342 酪醇 1-Butanol HPLC≥98% 20mg/支
21343 (R型)人參皂苷Rh1 Ginsenoside Rh1 HPLC≥98% 20mg/支
21344 濱蒿內(nèi)酯 Scoparone HPLC≥98% 20mg/支
21345 蝙蝠葛堿 Dauricine HPLC≥98% 20mg/支
21346 馬錢(qián)苷(馬錢(qián)素) Loganin HPLC≥98% 20mg/支
21347 鉤藤堿 Rhynchophylline HPLC≥98% 20mg/支
21348 異鉤藤堿 Isorhychophylline HPLC≥98% 20mg/支
21349 吉馬酮 Germacrone HPLC≥99% 20mg/支
21350 桔梗皂苷D Platycodin D HPLC≥98% 20mg/支
21351 野百合堿 Crotaline HPLC≥95% 20mg/支
21352 葒草苷 Orientin HPLC≥98% 20mg/支
21353 異葒草苷人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒 Homoori entin HPLC≥98% 20mg/支
21354 紫云英苷 astragalin HPLC≥98% 20mg/支
21355 對(duì)葉百部堿 tuberostemonine HPLC≥98% 20mg/支
21356 仙茅苷 Curculigoside HPLC≥98% 20mg/支
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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