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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
20985 Human growth-associated protein 43,GAP-43 ELISA Kit 人生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43 96T
20986 Human Cyclic AMP response element binding protein,CREB ELISA Kit 人cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白 96T
20987 Human Agrin ELISA Kit 人聚集蛋白 96T
20988 Human Agouti Related Protein,AGRP ELISA Kit 人Agouti相關(guān)蛋白 96T
20989 Human membrane cofactor protein,MCP ELISA Kit 人膜輔蛋白 96T
20990 Human elongin A,EloA ELISA Kit 人延伸蛋白A 96T
20991 Human Acylation Stimulating Protein,ASP ELISA Kit 人?;碳さ鞍? 96T
20992 Human bactericidal/permeabilityincreasingprotein,BPI ELISA Kit 人殺菌性/通透性增加蛋白 96T
20993 Human matrix extracellular phosphoglycoprotein,MEPE ELISA Kit 人細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白 96T
20994 Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 人復(fù)制蛋白A 96T
20995 Human cartilage oligomeric matrix protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白 96T
20996 Human transporter associated with antigen processing,TAP ELISA Kit 人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T細(xì)胞活化蛋白 96T
20997 Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit 人免疫抑制酸性蛋白 96T
20998 Human Gliadin IgA ELISA Kit 人麥角蛋白IgA 96T
20999 Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人發(fā)動(dòng)蛋白2 96T
21000 Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 人著絲粒蛋白B 96T
21001 Human macrophage stimulating protein,MSP ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞刺激蛋白 96T
21002 Human mammalian target of rapamyein,mTOR ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白 96T
21003 Human Nuclear matrix protein 22,NMP-22 ELISA Kit 人核基質(zhì)蛋白22 96T
21004 Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚蛋白 96T
21005 Human multidrug resistance-associated protein,MRP ELISA Kit 人多藥耐藥相關(guān)蛋白 96T
21006 Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit 人高速泳動(dòng)蛋白17 96T
21007 Human Vacuolating cytotoxin A,VacA ELISA Kit 人空泡毒素相關(guān)蛋白A 96T
21008 Human vitronectin,VNR ELISA Kit 人玻連蛋白/體外粘連蛋白 96T
21009 Human vimentin,VIM ELISA Kit 人波形蛋白 96T
21010 Human Surfactant Protein D,SP-D ELISA Kit 人表面活性蛋白D 96T
21011 Human arabinogalactan proteins,AGPs ELISA Kit 人阿拉伯半乳糖蛋白 96T
21012 Human Beta Lactoglobulin, Beta-Lg ELISA Kit 人β乳球蛋白 96T
21013 Human Beta catenin, Beta-Cat ELISA Kit 人β連環(huán)蛋白/聯(lián)蛋白 96T
21014 Human Beta amyloid precursor protein, BetaAPP ELISA Kit 人淀粉樣前體蛋白 96T
21015 Human beta2 glycoprotein, Beta2-GP ELISA Kit 人β2糖蛋白 96T
21016 Human Alpha Lactalbumin, Alpha-La ELISA Kit 人α乳清蛋白 96T
21017 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit 人N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-* 96T
21018 Human Lactoferrin,LTF/LF ELISA kit 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 96T
21019 Human Neuroglobin,NGB ELISA Kit 人腦紅蛋白 96T
21020 Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 人的牛血清白蛋白殘留檢測(cè) 96T
21021 Human amyloid beta peptide 1-40,A Beta1-40 ELISA Kit 人β淀粉樣蛋白1-40 96T
21022 Human myelin basic protein,MBP ELISA Kit 人髓磷脂堿性蛋白 96T
21023 Human High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 人高遷移率族蛋白B1 96T
21024 Human desmin,Des ELISA Kit 人結(jié)蛋白 96T
21025 Human Soluble protein-100,S-100 ELISA Kit 人S100蛋白 96T
21026 Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit 人S100B蛋白 96T
21027 Human macrophage inflammatory protein 2,MIP-2 ELISA Kit 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2 96T
21028 Human gelson ELISA Kit 人凝膠原蛋白 96T
21029 Human talin ELISA Kit 人踝蛋白 96T
21030 Human keratinocyte autocrine factor/Amphiregulin,KAF/AR ELISA Kit 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子 96T
21031 Human ox-LDL ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
21032 Human ALR ELISA Kit 人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒人肝再生增強(qiáng)因子 96T
21033 Human T-box protein 3 ELISA Kit(human) 人轉(zhuǎn)錄因子Tbx3 ELISA試劑盒 96T
21034 human HMGB-1 ELISA Kit 人高遷移率族蛋白B1 ELISA Kit 96T
21035 GATA4 ELISA Kit muman 人GATA結(jié)合蛋白4 ELISA試劑盒 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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