人角化細(xì)胞生長(zhǎng)因子(KGF)ELISA試劑盒說明書
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人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
20907 human thyroid stimulating immunoglobulin,TSI ELISA Kit 人甲狀腺刺激免疫球蛋白 96T
20908 human Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit 人甲狀旁腺激素 96T
20909 human Prostaglandin D2-methoxime,PGD2-MOX ELISA KIT 人甲肟前列腺素D2 96T
20910 human Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit 人高敏甲狀腺素 96T
20911 human ultrasensitive thyroid-stimulating hormone,U-TSH ELISA Kit 人高靈敏度促甲狀腺激素 96T
20912 human dopamine,DA ELISA KIT 人多巴胺 96T
20913 human Azidothymidine,AZT ELISA Kit 人* 96T
20914 human adrencocorticotropic hormone,ACTH ELISA Kit 人促腎上腺皮質(zhì)激素 96T
20915 human corticotropin releasing hormone,CRH ELISA Kit 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素 96T
20916 Human Thyroglobulin,TG ELISA Kit 人甲狀腺球蛋白 96T
20917 Human Eukaryotic translation initiation factor 3a,eIF3a ELISA Kit 人真核翻譯起始因子3a 96T
20918 Human phospho-extracellular signal-regulated kinase,pERK ELISA Kit 人磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 96T
20919 Human phospholamban,PLN ELISA Kit 人受磷蛋白 96T
20920 Human tumour necrosis factor related weak inducer of apoptosis,TWEAK ELISA Kit 人腫瘤壞死因子相關(guān)弱凋亡誘導(dǎo)因子 96T
20921 Human IPO-38 ELISA Kit 人IPO-38蛋白 96T
20922 human excision repair cross-complementation group 1,ERCC1 ELISA kit 人切除修復(fù)交叉互補(bǔ)基因1 96T
20923 Human Protein Carbonyl,PC ELISA Kit 人羰基化蛋白 96T
20924 human phospho-inhibitory subunit of NF-KapB Alpha,pIKB Alpha ELISA kit 人磷酸化核因子κB抑制蛋白α(IKKα human ELISA kit) 96T
20925 Human paxillin,Pax ELISA Kit 人樁蛋白 96T
20926 Human small breast epithelial mucin,SBEM ELISA Kit 人小乳腺表皮粘蛋白 96T
20927 human Mus musculus similar to 60S ribosomal protein L12,LOC382344 ELISA kit 人類似60S核糖體蛋白L21 96T
20928 human orosomucoid 2,ORM2 ELISA Kit 人類粘蛋白2 96T
20929 human MAX dimerization protein 1,mxd1 ELISA Kit 人MAX二聚化蛋白1 96T
20930 human claudin 14,CLDN14 ELISA Kit 人水閘蛋白14 96T
20931 human lectin-galactose binding-soluble 3,Lgals3 ELISA Kit 人可溶性半乳糖苷結(jié)合凝集素3 96T
20932 human major vault protein,MVP ELISA Kit 人主要穹窿蛋白 96T
20933 human ubiquitin D,UBD ELISA Kit 人泛素蛋白D 96T
20934 human toll-like receptor 2,TLR2 ELISA Kit 人toll樣受體2 96T
20935 human hemochromatosis type 2/uvenile-uman homolog,HFE2 ELISA Kit 年2型血色素沉著癥/幼年型血色病相關(guān)蛋白2 96T
20936 human frizzled homolog 8,FZD8 ELISA Kit 人卷曲蛋白8 96T
20937 human snail homolog 2,SNAI2 ELISA Kit 人蝸牛同源物2 96T
20938 Human golgi protein 73,GP-73 ELISA Kit 人高爾基蛋白73 96T
20939 Human TU3A Protein ELISA Kit 人TU3A蛋白 96T
20940 Human electron-transfer-flavoprotein beta polypeptide,ETFB ELISA Kit 人電子轉(zhuǎn)移黃素蛋白β肽 96T
20941 Human dermato-pontin,DPT ELISA Kit 人皮膚蛋白 96T
20942 Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 人可溶性蛋白185 96T
20943 Human decay-accelerating factor,DAF ELISA Kit 人降解加速因子 96T
20944 Human Linker for activation of T cell,LAT ELISA Kit 人T細(xì)胞活化連接蛋白 96T
20945 Human SH2-containing protein,SHC/SLP-76 ELISA Kit 人SH2攜帶蛋白 96T
20946 Human B-Cell Linker Protein,BLNK ELISA Kit 人B細(xì)胞連接蛋白 96T
20947 Human urease related protein C,UreC ELISA Kit 人尿素酶相關(guān)蛋白C 96T
20948 Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人銜接蛋白酶活化因子1 96T
20949 Human ankyrin B,Ank-B ELISA Kit 人錨蛋白B 96T
20950 Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 人潛伏膜蛋白1 96T
20951 Human recombination activating gene 2,RAG-2 ELISA Kit 人重組激活基因2 96T
20952 Human recombination activating gene 1,RAG-1 ELISA Kit 人重組激活基因1 96T
20953 Human NOD-like receptor9,NLR ELISA Kit 人NOD樣受體 96T
20954 Human retinoic acid inducible gene/RIG-like receptor,RLR-9 ELISA Kit 人*誘導(dǎo)基因/RIG-1樣受體 人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒 96T
20955 Human scavenger receptor B,SRB ELISA Kit 人清道夫受體B 96T
20956 Human cecropin B,CecB ELISA Kit 人殺菌肽B 96T
20957 Human Attacin,Att ELISA Kit 人抗菌肽 96T
20958 Human granulysin,GNLY ELISA Kit 人顆粒溶素 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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