人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

20802 mIgA(Human membrane IgA) ELISA Kit  人表面膜免疫球蛋白A  96T
20803 Ig-j(Human immunoglubin joining chain) ELISA Kit  *j鏈  96T
20804 HB- Beta(Human Beta-subunits of hemoglobin) ELISA Kit  人血紅蛋白β亞基  96T
20805 SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit  人分泌型免疫球蛋白A  96T
20806 SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit  人分泌型免疫球蛋白A（人唾液）  96T
20807 F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit  人活化*Ⅻ  96T
20808 Human Free Protein S,FP-S ELISA Kit  人游離蛋白S  96T
20809 APT(Human Abnormal prothrombin) ELISA Kit  人異常*原  96T
20810 CIC(Human circulating immune complex) ELISA Kit  人循環(huán)免疫復(fù)合物  96T
20811 PA-IgM(Human Plaet associated antibody) ELISA Kit  人血小板相關(guān)抗體IgM  96T
20812 FPA(Human fibrinopeptide A) ELISA Kit  人血纖肽/纖維蛋白肽A  96T
20813 Plg(Human Plasminogen) ELISA Kit  人纖溶酶原  96T
20814 CTLA-4/CD152(Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4) ELISA Kit  人細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原4  96T
20815 Lambda -IgLC(Human lambda immunoglobulin light chain) ELISA Kit  *輕鏈lambda  96T
20816 pMHC(Human peptide major histocompatibility complex) ELISA Kit  人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物  96T
20817 CLA(Human cutaneous lymphocyte-associated antigen) ELISA Kit  人皮膚淋巴細(xì)胞相關(guān)抗原  96T
20818 T-TM(Human thrombinthrombomodulin compound) ELISA Kit  人*血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物  96T
20819 Hc(Human Hemolytic complement) ELISA Kit  人溶血補(bǔ)體  96T
20820 TCR(Human T cell receptor) ELISA Kit  人T細(xì)胞受體  96T
20821 LAC/LA(Human lupus anticoagulant) ELISA Kit  人狼瘡抗凝抗體  96T
20822 Human soluble fibrin monomer complex,SFMC ELISA Kit  人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物  96T
20823 Human sreum albumin,HSA ELISA Kit  人血清白蛋白  96T
20824 Human 2,3-dinor thromboxane B2,2,3-dinor-TXB2 ELISA Kit  人2,3Dinor血栓烷B2  96T
20825 Human 11-dehydro-thromboxane B2,11-DH-TXB2 ELISA Kit  人11去氫血栓烷B2  96T
20826 Human thrombomodulin,TM ELISA Kit   人血栓調(diào)節(jié)蛋白  96T
20827 Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit  人纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物  96T
20828 Human plaet membrane glycoprotein II b III a,GP- II b III a ELISA Kit  人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa  96T
20829 Human thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit  人血小板反應(yīng)蛋白/*敏感蛋白1  96T
20830 Human alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit  人血漿α顆粒膜蛋白  96T
20831 Human terminal complement complex C5b-9,TCC C5b-9 ELISA Kit  人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9  96T
20832 Human Complement 4,C4 ELISA Kit   人補(bǔ)體蛋白4  96T
20833 Human Complement 3,C3 ELISA Kit  人補(bǔ)體蛋白3  96T
20834 Human coagulation factor II ,F II ELISA Kit  人*Ⅱ  96T
20835 Human leucocyte antigen B27,HLA-B27 ELISA Kit  人類白細(xì)胞抗原B27  96T
20836 Human Haptoglobin,Hpt/HP ELISA KIT  人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白  96T
20837 Human 50% complement hemolysis,CH50 ELISA Kit  人血清總補(bǔ)體  96T
20838 Human Complement fragment 4a,C4a ELISA Kit  人過敏毒素/補(bǔ)體片斷4  96T
20839 Human Complement fragment 5a,C5a ELISA Kit  人補(bǔ)體片斷5a  96T
20840 Human Complement fragment 3a,C3a ELISA Kit  人補(bǔ)體片斷3a  96T
20841 Human coagulation factor VIII related antigen,F VIII -Ag ELISA Kit  人*Ⅷ相關(guān)抗原  96T
20842 Human coagulation factor IX ,F IX ELISA Kit  人*Ⅸ  96T
20843 Human coagulation factor X ,F X ELISA Kit  人*Ⅹ  96T
20844 Human von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit  人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子  96T
20845 Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit  人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物  96T
20846 Human thrombin-antithrombin complex,TAT ELISA Kit  人*抗*復(fù)合物  96T
20847 Human anti-thrombin receptor,ATR ELISA Kit  人抗*受體  96T
20848 Human thrombin receptor,TR ELISA Kit  人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒人*受體  96T
20849 Human Factor VIII -related Antigen,F VIII Ag ELISA Kit  人第八因子相關(guān)抗原  96T
20850 Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit  人血纖蛋白原  96T
20851 Human major histocompatibility complex I ,MHC I /HLA I ELISA Kit  人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類  96T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人腫瘤標(biāo)志物(CA724)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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