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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-19 18:27:27瀏覽次數(shù):160次
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人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
20748 F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit 人*Ⅲ 96T
20749 C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit 人補體1q 96T
20750 GP- IV (Human plaet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ 96T
20751 Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit 人*α1 96T
20752 CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人補體調(diào)節(jié)蛋白 96T
20753 PBP/CXCL7(Human plaet basic protein) ELISA Kit 人血小板堿性蛋白 96T
20754 HLA-C(Human leukocyte antigen C) ELISA Kit 人類白細胞抗原C 96T
20755 HLA-E(Human leukocyte antigen E) ELISA Kit 人類白細胞抗原E 96T
20756 HLA-A(Human leukocyte antigen A) ELISA Kit 人類白細胞抗原A 96T
20757 SAP(Human Serum amyloid P) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白P 96T
20758 MBLR(Human Mannma binding lectin receptor) ELISA Kit 人甘露糖凝集素受體 96T
20759 PL/Fbn(Human plasmin/fibrinolysin) ELISA Kit 人纖溶酶/纖維蛋白溶酶 96T
20760 BCR(Human B cell receptor) ELISA Kit 人B細胞受體 96T
20761 mIgM(Human membrane IgM) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白M 96T
20762 mIgD(Human membrane IgD) ELISA Kit 人表面膜免疫球蛋白D 96T
20763 KIR(Human killer cell immnoglobulin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體 96T
20764 KLR(Human killer cell lectin-like receptor) ELISA Kit 人殺傷細胞凝集素樣受體 96T
20765 APC(Human activated protein C) ELISA Kit 人活化蛋白C 96T
20766 Human Protein C ELISA Kit 人蛋白C 96T
20767 PF-3(Human plaet factor 3) ELISA Kit 人血小板因子3 96T
20768 F1+2(Human prothrombin fragment 1+2) ELISA kit 人*原片段F1+2 96T
20769 MBP/MBL(Human Mannma binding protein/mannan binding lectin) ELISA Kit 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素 96T
20770 MAC(Human membrane attack complex) ELISA Kit 人膜攻擊復合物 96T
20771 EL(Human EuglobulinLysis) ELISA Kit 人優(yōu)球蛋白 96T
20772 f-Hb(Human free haemoglobin) ELISA Kit 人游離血紅蛋白 96T
20773 PRM1(Human Protamine 1) ELISA Kit 人*1 96T
20774 HbCO(Human carboxyhemoglobin) ELISA Kit 人一氧化碳血紅蛋白 96T
20775 PAIg(Human plaet-associated immunoglobulins) ELISA Kit 人血小板相關(guān)免疫球蛋白 96T
20776 PAC3(Human plaet-associated Complement 3) ELISA Kit 人血小板相關(guān)補體3 96T
20777 TX-A2(Human Thromboxane A2) ELISA Kit 人血栓素A2 96T
20778 HbH(Human Hemoglobin H) ELISA Kit 人血紅蛋白H 96T
20779 HbC(Human Hemoglobin C) ELISA Kit 人血紅蛋白C 96T
20780 Human Fibrin ELISA Kit 人纖維蛋白 96T
20781 FPB(Human fibrinopeptide B) ELISA Kit 人血纖肽/纖維蛋白肽B 96T
20782 PLGA(Human plasminogen activator) ELISA Kit 人纖溶酶原激活劑 96T
20783 SmIg(Human Surface Membrane Immunoglobulin) ELISA Kit 人細胞膜表面免疫球蛋白 96T
20784 PA(Human prealbumin) ELISA Kit 人前白蛋白 96T
20785 CG(Human Cryoglobulin) ELISA Kit 人冷球蛋白 96T
20786 EMP(Human erythrocyte membrane protein) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白 96T
20787 MHB(Human Methemoglobin) ELISA Kit 人高鐵血紅蛋白 96T
20788 LMWH(Human low molecular weight heparin) ELISA Kit 人低分子肝素 96T
20789 C3SP(Human Complement 3 split product) ELISA Kit 人補體3裂解產(chǎn)物 96T
20790 C3bR(Human Complement fragment 3b rccptor) ELISA Kit 人補體片段3b受體 96T
20791 C1INH(Human Complement 1 inhibitor autoantibody) ELISA Kit 人補體1抑制物抗體 96T
20792 BF(Human factor B) ELISA Kit 人B因子 96T
20793 HLA-G(Human leukocyte antigen G) ELISA Kit 人類白細胞抗原G 96T
20794 C3b(Human Complement fragment 3b) ELISA Kit 人補體片斷3b 96T
20795 C4b(Human Complement fragment 4b) ELISA Kit 人補體片斷4b 96T
20796 C4d(Human Complement fragment 4d) ELISA Kit 人補體片斷4d 96T
20797 C5b(Human Complement fragment 5b) ELISA Kit 人補體片斷5b 96T
20798 IgH(Human immunoglobulin heavy chain) ELISA Kit *重鏈 96T
20799 IgHV(Human immunoglobulin heavy chain variable region) ELISA Kit *重鏈可變區(qū) 人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒 96T
20800 poly-IgR(polyimmunoglobulinreceptor) ELISA Kit 人多免疫球蛋白受體 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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