人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

20694 VD R(Human Vitamin D Receptor) ELISA Kit  人*受體  96T
20695 TSST-1(Human toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit  人毒性休克綜合征毒素1  96T
20696 SE(Human staphylococcus aureus enterotoxins) ELISA Kit  人金葡菌腸毒素  96T
20697 CNX(Human calnexin) ELISA Kit  人鈣聯(lián)蛋白  96T
20698 MIS/AMH(Human Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone) ELISA Kit  人繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素  96T
20699 BTC(Human beta cellulin) ELISA Kit  人β細胞素  96T
20700 FETU-A(Human Fetuin A) ELISA Kit  人胎球蛋白A  96T
20701 HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor) ELISA Kit  人胎盤核糖核酸抑止劑  96T
20702 PP(Human placental protein) ELISA Kit  人胎盤蛋白  96T
20703 HPL(Human placenta lactogen) ELISA Kit  人胎盤催乳素  96T
20704 HBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit  人胎兒血紅蛋白  96T
20705 anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit  人抗巨細胞病毒抗體IgM  96T
20706 anti-tox IgM(Human anti-toxoplasma IgG antibody) ELISA Kit  人抗弓形體IgM抗體  96T
20707 anti-RV IgG(Human anti-rubella virus IgG antibody) ELISA Kit  人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體  96T
20708 EBV(Human anti-Epstein-Barr virus antibody) ELISA Kit  人抗EB病毒抗體  96T
20709 PGR(Human progesterone receptor) ELISA Kit  人孕酮受體  96T
20710 N-TSH(Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit  人新生兒促甲狀腺素  96T
20711 SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit  人妊娠特異性β1糖蛋白  96T
20712 PL(Human placetal lactogen) ELISA Kit  人胎盤泌乳素  96T
20713 ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit  人雄激素結(jié)合蛋白  96T
20714 ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA ) ELISA Kit  人抗滋養(yǎng)膜細胞抗體  96T
20715 aZP(Human anti-zona pellucida antibody,aZP) ELISA Kit  人抗透明帶抗體  96T
20716 AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb) ELISA Kit  人抗卵巢抗體  96T
20717 anti-CMV IgG(Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG) ELISA Kit  人抗巨細胞病毒抗體IgG  96T
20718 BFP(Human basic fetoprotein,BFP) ELISA Kit  人堿性胎兒蛋白  96T
20719 anti-RV IgM(Human anti-rubella virus IgM antibody,anti-RV IgM) ELISA Kit  人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體  96T
20720 OT(Human oxytocin) ELISA Kit  人催產(chǎn)素  96T
20721 PAPP-A(Human pregnancy associated plasma protein A) ELISA Kit  人妊娠相關(guān)血漿蛋白A  96T
20722 EMAb(Human Endometrium Antibody,EMAb ) ELISA Kit  人抗子宮內(nèi)膜抗體  96T
20723 AsAb(Human anti-sperm antibody) ELISA Kit  人抗精子抗體  96T
20724 HG(Human Herpes Gestation) ELISA Kit  人妊娠皰疹抗體  96T
20725 PLGF(Human placenta growth factor) ELISA kit  人胎盤生長因子  96T
20726 TM(Human Thrombin) ELISA Kit  人*  96T
20727 F VII (Human coagulation factor VII ) ELISA Kit  人*Ⅶ  96T
20728 sHLA-G(Human soluble human leucocyte antigen G1) ELISA Kit  人可溶性白細胞抗原G  96T
20729 PT(Human Prothrombin0 ELISA Kit  人*原  96T
20730 CFD(Human complement factor D) ELISA Kit  人補體因子D  96T
20731 pFN(Human Plasma fibronectin) ELISA kit  人血漿纖維連接蛋白  96T
20732 cFn(Human cellular fibronectin) ELISA kit  人細胞纖維連接蛋白  96T
20733 TPS(Human Total protein S) ELISA Kit  人總蛋白S  96T
20734 SDPR(human serum deprivation response) ELISA Kit  人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白  96T
20735 HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3) ELISA Kit  人中性粒細胞防御素1-3  96T
20736 ECP(Human eosinophil cationic protein) ELISA Kit  人嗜酸性粒細胞陽離子蛋白  96T
20737 PS(Human plasma anticoagulant protein S) ELISA Kit  人血漿抗凝蛋白S  96T
20738 PC(Human plasma anticoagulant protein C) ELISA Kit  人血漿抗凝蛋白C  96T
20739 Fc Gamma(Human Fc region of immunoglobulin G) ELISA Kit  *G Fc片段  96T
20740 CyPB(Human cyclophilin B) ELISA Kit  人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B  96T
20741 C4BP(Human C4 binding protein) ELISA Kit  人C4結(jié)合蛋白  96T
20742 C3c(Human Complement fragment 3c) ELISA Kit  人補體片段3c  96T
20743 C7(Human Complement fragment 3c0 ELISA Kit  人補體7  96T
20744 A Beta1-42(Human amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit  人β淀粉樣蛋白1-42  96T
20745 Human chemerin ELISA Kit 人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒  人chemerin  96T
20746 F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit  人*Ⅻ  96T

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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