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上海紀寧酶聯科技有限公司
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人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結果。
人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質量。
20642 Alpha2-PI (Human Alpha2-plasmin inhititor) ELISA Kit 人α2纖溶酶抑制物 96T
20643 人高香草酸(HVA) ELISA Kit 人高香草酸 96T
20644 人*腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH) ELISA Kit 人*腺嘌呤二核苷酸磷酸 96T
20645 CNR-1(Human cadherln-related neuronal receptor1) ELISA Kit 人鈣粘蛋白相關的神經受體1 96T
20646 ATM(Human Ataxia angiectasia mutated) ELISA Kit 人毛細血管擴張性共濟失調突變基因 96T
20647 AhR(Human aryl hydrocarbon receptor) ELISA Kit 人芳香烴受體 96T
20648 SMAF(Human Specifie Macrophage Arming Paetot) ELISA Kit 人特異性巨噬細胞武裝因子 96T
20649 MF/MPF(Human maturation promoting factor) ELISA Kit 人促有絲分裂因子 96T
20650 ATF-1(Human activating transcription factor-1) ELISA Kit 人轉錄因子抗體-1 96T
20651 HAMA(Human antimous antibody) ELISA 人抗鼠抗體 96T
20652 VGCC(Human voltage-gated calcium channel) ELISA Kit 人鈣離子通道抗體 96T
20653 BrdU(Human Bromodeoxyuridine) ELISA Kit 人溴脫氧核苷* 96T
20654 FSP(Human Fibroblast surface protein) ELISA Kit 人纖維母細胞表面抗原 96T
20655 SLPI(Human secretory leukocyte protease inhibitor) ELISA Kit 人分泌性白細胞蛋白酶抑制因子 96T
20656 POMC(Human pro-opiomelanocortin) ELISA Kit 人阿黑皮素原 96T
20657 ADMA(Human asymmetrical dimethylarginine) ELISA Kit 人不對稱二甲基* 96T
20658 ST(Human Serotonin) ELISA Kit 人血清素/血清胺 96T
20659 CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit 人細胞毒素 96T
20660 Alpha-SYN(Human Alpha-Synuclein) ELISA Kit 人α突觸核蛋白 96T
20661 CA19-9(Human Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit 人糖鏈抗原19-9 96T
20662 HRD(Human Hirudin) ELISA Kit 人水蛭素 96T
20663 Human Tacrolimus-FK506 ELISA Kit 人* 96T
20664 ESA(Human epithelial specific antigen) ELISA Kit 人上皮特異性抗原 96T
20665 EMA(Human Epithelial membrane antigen) ELISA Kit 人上皮膜抗原 96T
20666 CLU(Human clusterin) ELISA Kit 人凝聚素 96T
20667 OJ/IleRS(Human anti-OJ-antibody) ELISA Kit 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成酶抗體 96T
20668 ACA/CENP(Human Anticentromere Antibody) ELISA Kit 人抗著絲點抗體 96T
20669 MYOG(Human myogenin) ELISA Kit 人肌細胞生成素 96T
20670 ASP(Human antibody to group A streptococcal polysaccharide) ELISA Kit 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體 96T
20671 APCR(Human activated protein C resistance) ELISA Kit 人活化蛋白C抵抗素 96T
20672 Ext-N(Human N-terminal extein) ELISA Kit 人N端外顯肽 96T
20673 SC(Human secretory component) ELISA Kit 人分泌成分 96T
20674 ADP(Human Adenosine diphosphate) ELISA Kit 人二磷酸腺苷 96T
20675 PG(Human Proteoglycan) ELISA Kit 人蛋白聚糖 96T
20676 PYD(Human Pyridinoline) ELISA Kit 人吡啶酚 96T
20677 5-HIAA(Human 5-hydroxyindolacetic acid) ELISA Kit 人5羥基吲哚乙酸 96T
20678 12-HETE(Human 20-hydroxyeicosatetraenoic acid) ELISA Kit 人12羥二十烷四烯酸 96T
20679 Hyp(Human hydroxyproline) ELISA Kit 人羥* 96T
20680 NO(Human nitric oxide) ELISA Kit 人一氧化氮 96T
20681 ENA-78/CXCL5(Human Epithelial neutrophil activating peptide 78) ELISA Kit 人上皮中性粒細胞活化肽78 96T
20682 VC(Human Vitamin C) ELISA Kit 人* 96T
20683 VB6(Human Vitamin B6) ELISA Kit 人*6 96T
20684 sP-selectin(Human soluble P-selectin) ELISA Kit 人可溶性P選擇素 96T
20685 TIMP-1(Human tissue inhibitors of metalloproteinase 1) ELISA Kit 人基質金屬蛋白酶抑制因子1 96T
20686 VD(Human Vitamin D) ELISA Kit 人* 96T
20687 VK1(Human Vitamin K1) ELISA Kit 人*1 96T
20688 VB12(Human Vitamin B12) ELISA Kit 人*12 96T
20689 VD3(Human Vitamin D3) ELISA kit 人*3 96T
20690 VD2(Human人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒 Vitamin D2) ELISA Kit 人*2 96T
20691 VE(Human Vitamin E) EELISA Kit 人* 96T
20692 VA(Human Vitamin A) ELISA Kit 人* 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人P27蛋白(P27)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內質控、室間質評,以嚴謹的工作作風檢測每一份標本,才能保證檢測質量?,F在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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