人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

20485 RANA(Human rheumatoid arthritis associated nuclear artigen) ELISA Kit  人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原  96T
20486 THP(Human T-H glycoprotein) ELISA Kit  人TH糖蛋白  96T
20487 GTE-AGE(Human Glomerular tissue extract-advanced glycosylation end products) ELISA Kit  人腎小球組織糖基化終末產(chǎn)物  96T
20488 UP(Human Proteinuria) ELISA Kit  人尿蛋白  96T
20489 LMP7/PSMB99Human low molecular-weight protein/proteasome beta-type subunit) ELISA Kit  人低分子質(zhì)量蛋白7/β型蛋白酶體9  96T
20490 Alpha2-MG(Human Alpha2 macroglobulin) ELISA Kit  人α2巨球蛋白  96T
20491 Kim-1(Human Kidney injury molecule 1) ELISA Kit  人腎損傷分子1  96T
20492 AQP-5(Human Aquaporin 5) ELISA Kit  人水通道蛋白5  96T
20493 AQP-4(Human Aquaporin 4) ELISA Kit  人水通道蛋白4  96T
20494 AQP-3(Human Aquaporin 3) ELISA Kit  人水通道蛋白3  96T
20495 AQP-2(Human Aquaporin 2) ELISA Kit  人水通道蛋白2  96T
20496 AQP-1(Human Aquaporin 1) ELISA Kit  人水通道蛋白1  96T
20497 AQP-0(Human Aquaporin 0) ELISA Kit  人水通道蛋白0  96T
20498 RF(Human rheumatoid factor) ELISA Kit  人類風(fēng)濕因子  96T
20499 ASO(Human anti-streptolysin O) ELISA Kit  人抗鏈球菌溶血素O/抗O  96T
20500 ACA(Human adrenal cortex antibody) ELISA Kit  人腎上腺皮質(zhì)抗體  96T
20501 GBM(Human glomerular basement membrane antibogy) ELISA Kit  人抗腎小球基底膜抗體  96T
20502 BMG/ Beta2-MG(Human Beta2-microglobulin) ELISA Kit  人β2微球蛋白  96T
20503 ANX- V (Human Annexin V ) ELISA Kit  人膜聯(lián)蛋白Ⅴ  96T
20504 TBM(Human tubular basement membrane antibogy) ELISA Kit  人抗腎小管基底膜抗體  96T
20505 AP13(Human apelin 13) ELISA Kit  人apelin 13  96T
20506 AP36(Human Apelin 36) ELISA Kit  人Apelin 36  96T
20507 Tn-T(Human Troponin T) ELISA Kit  人肌鈣蛋白T  96T
20508 ES-Ab(Human anti-Endostatin antibody) ELISA Kit  人血管內(nèi)皮抑素抗體  96T
20509 Agtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型  96T
20510 ANGPTL3(Human angiopoietin-like protein 3) ELISA Kit  人血管生成素樣蛋白3  96T
20511 Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit  人α肌動(dòng)蛋白  96T
20512 ANKRD1(Human cardiac ankyrin repeat domain 1) ELISA Kit  人心肌錨蛋白重復(fù)域1  96T
20513 LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit  人瘦素受體  96T
20514 AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體2  96T
20515 ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ受體1  96T
20516 ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit  人血管生成素4  96T
20517 sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit  人可溶性肌球蛋白重鏈1  96T
20518 HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  人熱休克因子1  96T
20519 VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit  人血管活性肽酶抑制劑  96T
20520 CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit  人心肌肌凝蛋白輕鏈1  96T
20521 IMA(Human Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit  人缺血修飾白蛋白  96T
20522 8-epi-PGF2 Alpha(Human 8-epi-prostaglandin F2alpha0 ELISA Kit  人8-異構(gòu)前列腺素F2α  96T
20523 sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit  人血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體  96T
20524 Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit  人α平滑肌肌動(dòng)蛋白  96T
20525 Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit  人α橫紋肌肌動(dòng)蛋白  96T
20526 SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit  人平滑肌肌球蛋白  96T
20527 cTnT(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit  人心肌特異性肌鈣蛋白T  96T
20528 MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit  人肌球蛋白重鏈  96T
20529 HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit  人熱休克蛋白27  96T
20530 ANG(Human angiostatin) ELISA Kit  人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白  96T
20531 h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit  人心型脂肪酸結(jié)合蛋白  96T
20532 b-FABP(Human brain fatty acid binding protein) ELISA Kit  人腦型脂肪酸結(jié)合蛋白  96T
20533 BK(Human Bradykinin) ELISA Kit  人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒人血管舒緩激肽  96T
20534 MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit  人肌球蛋白輕鏈  96T
20535 ACTN-3(Human Alpha-Actinin 3) ELISA Kit  人α-輔肌動(dòng)蛋白3  96T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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