人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

20430 GSK(Human glycogen synthase kinase) ELISA Kit  人糖原合成酶激酶  96T
20431 Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit  人胱天蛋白酶9  96T
20432 Casp-3(Human Caspase 3) ELISA Kit  人胱天蛋白酶3  96T
20433 NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit  人中性粒細胞彈性蛋白酶  96T
20434 CA-2(Human carbonic anhydrase 2) ELISA Kit  人碳酸酐酶2  96T
20435 ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA Kit  人解整合素樣金屬蛋白酶8  96T
20436 MPO(Human myeloperoxidase) ELISA Kit  人髓過氧化物酶  96T
20437 Gzms-B(Human granzymes B) ELISA Kit  人顆粒酶B  96T
20438 Gzms-A(Human granzymes A) ELISA Kit  人顆粒酶A  96T
20439 CIAP(Human Calf intestinal alkaline phosphatase) ELISA Kit  人牛小腸堿性磷酸酶  96T
20440 SOD(Human Super Oxidase Dimutase) ELISA Kit  人超氧化物歧化酶  96T
20441 DPP IV (Human dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit  人二肽基肽酶Ⅳ  96T
20442 HD(Human Histone Deacetylase) ELISA Kit  人組織蛋白去乙?；? 96T
20443 Human Methylase ELISA Kit  人甲基化酶  96T
20444 TRACP-5b9Human tartrate-resistant acid phosphatase 5b) ELISA Kit  人抗酒石酸酸性磷酸酶5b  96T
20445 PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit  人磷酸肌醇3激酶  96T
20446 PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit  人蛋白激酶B  96T
20447 HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit  人血紅素氧合酶2  96T
20448 M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit  人丙酮酸激酶M2型同工酶  96T
20449 TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit  人甲狀腺過氧化物酶  96T
20450 AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit  人αL巖藻糖苷酶  96T
20451 eNOS(Human Endothelial nitric oxide synthase) ELISA Kit  人內(nèi)皮型一氧化氮合成酶  96T
20452 HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit  人血紅素氧合酶1  96T
20453 iNOS(Human inducible nitric oxide synthase) ELISA KIT  人誘導型一氧化氮合成酶  96T
20454 PL-A2(Human Phospholipidase A2) ELISA Kit  人磷脂酶A2  96T
20455 NOS(Human nitric oxide synthase) ELISA Kit  人一氧化氮合成酶  96T
20456 TE(Human omerase) ELISA Kit  人端粒酶  96T
20457 MMP-5(Human matrix metalloproteinase 5) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶5  96T
20458 MMP-4(Human matrix metalloproteinase 4) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶4  96T
20459 MMP-9/Gelatinase B(Human matrix metalloproteinase 9/Gelatinase B) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶9/明膠酶B  96T
20460 NSE(Human Neuron-specific enolase) ELISA Kit  人神經(jīng)特異性烯醇化酶  96T
20461 CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit  人肌酸激酶同工酶MB  96T
20462 PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit  人前列腺酸性磷酸酶  96T
20463 PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit  人前列腺素D合成酶  96T
20464 PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit  人*原C  96T
20465 PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit  人*原A  96T
20466 PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit  人*型纖溶酶原激活物受體  96T
20467 uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit  人*型纖溶酶原激活物  96T
20468 Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit  人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2  96T
20469 MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細胞膠原酶  96T
20470 (MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶7  96T
20471 MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶3  96T
20472 MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A  96T
20473 MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶13  96T
20474 MMP-10(Human Matrix metalloproteinase 10) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶10  96T
20475 MMP-1(Human Matrix metalloproteinase 1) ELISA kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶1  96T
20476 Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit  人FMS樣*激酶3  96T
20477 Flt-3L(Human FMS-like tyrosine kinase 3 ligand) ELISA Kit  人FMS樣*激酶3配體  96T
20478 ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit  人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶  96T
20479 AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit  人α1微球蛋白/bikunin前體 人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒 96T
20480 Human podocin ELISA Kit  人Podocin  96T
20481 Human Nephrin ELISA Kit  人腎病蛋白  96T
20482 Alpha1-MG(Human Alpha1-microglobulin) ELISA Kit  人α1微球蛋白  96T
20483 ALB(Human microalbunminuria) ELISA Kit  人尿微量白蛋白  96T

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。 
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人N端前腦鈉素(NT-proBNP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本，才能保證檢測質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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