人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質(zhì)量。

20325 BACE1(Human Beta-site APP-Cleaving Enzyme 1) ELISA kit  人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶1  96T
20326 PDI(Human Protein disulfide-isomerase precursor) ELISA Kit  人蛋白二硫化物異構(gòu)酶前體  96T
20327 PDIA3(Human protein disulfide-isomerase A3) ELISA Kit  人蛋白二硫化物異構(gòu)酶A3  96T
20328 SDH(Human sorbitol dehydrogenase) ELISA Kit  人*脫氫酶  96T
20329 PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit  人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶  96T
20330 OCT(Human ornithine carbamoyl transferase) ELISA Kit  人*氨基甲酰轉(zhuǎn)移酶  96T
20331 vaspin(Human Visceral adipose-specific serine protease inhibitor) ELISA Kit  人內(nèi)臟脂肪特異性*蛋白酶抑制劑  96T
20332 PP(Human Protein Phosphatase) ELISA Kit  人蛋白磷酸酶  96T
20333 TrxR(Human thioredoxin reductase) ELISA Kit  人硫氧還蛋白還原酶  96T
20334 HLE(Human leukocyte exastase) ELISA Kit  人白細(xì)胞彈性蛋白酶  96T
20335 Human Elastase ELISA Kit  人彈性蛋白酶  96T
20336 AMS/AMY(Human Alpha-Amylase) ELISA Kit  人α*  96T
20337 ALP(Human alkaline phosphatase) ELISA Kit  人堿性磷酸酶  96T
20338 AZU(Human azurocidin) ELISA Kit  人天青殺素  96T
20339 ATA(Human Angiotensinase A) ELISA Kit  人血管緊張肽酶A  96T
20340 PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit  人胰*  96T
20341 AlphaENOL(Human Alpha-enolase) ELISA Kit  人α烯醇化酶  96T
20342 Human Collagenase Type II ELISA Kit  人膠原酶II  96T
20343 Human Collagenase I ELISA Kit  人膠原酶I  96T
20344 P-PKC(Human phospho Protein Kinase C) ELISA Kit  人磷酸化蛋白激酶C  96T
20345 pERK(Human phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit  人磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶  96T
20346 AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit  人乙酰*酯酶  96T
20347 GOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit  人葡萄糖氧化酶  96T
20348 TH(Human tyrosine hydroxylase) ELISA Kit  人*羥化酶  96T
20349 DDC(Human dopamine decarboxylase) ELISA Kit  人多巴胺脫羧酶  96T
20350 NNE(Human non-neuronal enolase) ELISA Kit  人非神經(jīng)元性烯醇化酶  96T
20351 DBH(Human dopamine- Beta-hydroxylase) ELISA Kit  人多巴胺-β羥化酶  96T
20352 CHAc(Human choline acetylase) ELISA Kit  人*乙?；? 96T
20353 ICD(Human isocitrate dehydrogenase) ELISA Kit  人異檸檬酸脫氫酶  96T
20354 Try- II (Human Trypsinogen-2) ELISA Kit  人*原Ⅱ  96T
20355 ADA(Human adenosine deaminase) ELISA Kit  人腺苷脫氨酶  96T
20356 HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit  人透明質(zhì)酸酶  96T
20357 AST(Human Aspartate aminotransferase) ELISA Kit  人天*氨基轉(zhuǎn)移酶  96T
20358 ACP(Human Acid Phosphatase) ELISA Kit  人酸性磷酸酶  96T
20359 GPI(Human glucose-6-phosphate isomerase) ELISA Kit  人葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶  96T
20360 PGM(Human Phosphoglucomutase) ELISA Kit  人磷酸葡萄糖變位酶  96T
20361 LAP(Human Leucine aminopepridase) ELISA Kit  人亮氨酰氨基肽酶  96T
20362 SK(Human Streptokinase) ELISA Kit  人鏈激酶  96T
20363 RNASE(Human Ribonuclease) ELISA Kit  人核糖核酸酶  96T
20364 LPO(Human lipid peroxlde) ELISA Kit  人過氧化脂質(zhì)/乳過氧化物酶  96T
20365 PON(Human paraoxonase) ELISA Kit  人對氧磷酶  96T
20366 PK(Human pyruvate kinase) ELISA Kit  人丙酮酸激酶  96T
20367 BetaGD(Human Beta-glucuronidase) ELISA Kit  人β葡萄糖醛酸苷酶  96T
20368 Human Beta-glucosidase ELISA Kit  人β葡糖苷酶  96T
20369 Human Beta-lactamase ELISA Kit  人β內(nèi)酰胺酶  96T
20370 Beta Manase(Human Alpha mannosidase) ELISA Kit  人β甘露糖苷酶  96T
20371 BetaGAL(Human Alpha-galactosidase) ELISA Kit  人β半乳糖苷酶  96T
20372 IDUA(Human Alpha-L-iduronidase) ELISA Kit  人αL艾杜糖苷酸酶  96T
20373 Alpha2-AP(Human Alpha2-Antiplasmin) ELISA Kit  人α2抗纖溶酶  96T
20374 NAG(Human N-acetyl- Beta-D-glucosaminidase) 人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒ELISA Kit  人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶  96T
20375 PAL(Human L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit  人L苯*解氨酶  96T
20376 5-NT(Human 5-Nucleotidase) ELISA Kit  人5核苷酸酶  96T

下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機(jī)。
5人腦鈉素/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化，有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀，這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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