人乙酰*(ACH)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人乙酰*(ACH)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

20273 PFKP(Human phosphofructokinase-plaet) ELISA Kit  人血小板型磷酸果糖激酶  96T
20274 UGCG(Human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase) ELISA Kit  人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶  96T
20275 Casp4(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit  人凋亡相關(guān)半*肽酶4  96T
20276 PDXK(Human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase) ELISA Kit  人吡哆醛/吡哆醇*6激酶  96T
20277 DPYSL2(human dihydropyrimidinase-like 2) ELISA Kit  人二氫嘧啶酶樣2  96T
20278 SGK2(Human serum/glucocorticoid regulated kinase 2) ELISA KIT  人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2  96T
20279 MKK6(Human mitogen activated protein kinase kinase 6) ELISA Kit  人絲裂原活化蛋白激酶激酶6  96T
20280 PDXP(Human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase) ELISA Kit  人吡哆醛/吡哆醇*6磷酸酶  96T
20281 Tgtp(Human T-cell specific GTPase) ELISA Kit  人T細(xì)胞特異性鳥苷三磷酸酶  96T
20282 FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit  人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1  96T
20283 D-LDH(Human D-Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit  人D-乳酸脫氫酶  96T
20284 Alpha1-AT(Human Alpha1-Antitrypsin) ELISA Kit  人α1抗*  96T
20285 KLK 1(Human Kallikrein 1) ELISA Kit  人*1  96T
20286 KLK 6(Human Kallikrein 6) ELISA Kit  人*6  96T
20287 PaCoA(Human Phosphorylated acetyl CoA) ELISA Kit  人磷酸化乙酰*  96T
20288 PGAM2(Human phosphoglycerate mutase 2) ELISA Kit  人磷酸甘油酸變位酶2  96T
20289 PTGDS(Human Prostaglandin D synthase) ELISA Kit  人前列腺素D合成酶  96T
20290 PPIL1(Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1) ELISA Kit  人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1  96T
20291 MAPKAPK3(Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3) ELISA Kit  人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3  96T
20292 ACE I (Human Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶  96T
20293 AP(Human Aprotinin) ELISA Kit  人*  96T
20294 Casp-12(Human Caspase 12) ELISA Kit  人胱天蛋白酶12  96T
20295 PKA(Human Protein kinase A) ELISA Kit  人蛋白激酶A  96T
20296 ADAM10(Human A Disintegrin And Metalloprotease 10) ELISA Kit  人解整合素樣金屬蛋白酶10  96T
20297 MMP11(Human matrix metalloproteinase 11) ELISA Kit  人基質(zhì)金屬蛋白酶11  96T
20298 TS(Human thymidylate synthetase) ELISA Kit  人胸苷酸合成酶  96T
20299 TPHuman thymidinephosphorylase) ELISA Kit  人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶  96T
20300 PARP(Human Poly ADP ribose polymerase) ELISA Kit  人多聚ADP核糖聚合酶  96T
20301 GCK(Human glucokinase) ELISA Kit  人葡萄糖激酶  96T
20302 MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit  人單胺氧化酶  96T
20303 cPLA2(Human cytosolic phospholipase A2) ELISA Kit  人胞漿型磷脂酶A2  96T
20304 DAO(Human diamine oxidase) ELISA Kit  人二胺氧化酶  96T
20305 COX-2(Human cyclooxygenase-2) ELISA Kit  人環(huán)加氧酶2  96T
20306 CDK5(Human Cyclin Dependent Kinase 5) ELISA Kit  人周期素依賴性激酶5  96T
20307 KLK 10(Human Kallikrein 10) ELISA Kit  人*10  96T
20308 PLC Gamma1(Human Phospholipase C Gamma1) ELISA Kit  人磷酯酶Cγ鏈  96T
20309 NA(Human neuraminidase) ELISA Kit  人神經(jīng)氨酸酶  96T
20310 PIPLC(Human phosphoinositide-specific phospholipase C) ELISA Kit  人磷酯酰肌醇特異性磷酯酶C  96T
20311 PLC(Human Phospholipase C) ELISA Kit  人磷酯酶C  96T
20312 Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit  人*激酶2  96T
20313 ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit  人白介素1β轉(zhuǎn)換酶  96T
20314 ILK-1(Human integrin-linked kinase 1) ELISA Kit  人整合素連接激酶1  96T
20315 CYP21B(Human Cytochrome P450c21/21-hydroxylase) ELISA Kit  人細(xì)胞色素P450c21B/21-羥化酶  96T
20316 TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit  人末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶  96T
20317 IDO(Human indoleamine 2,3-dioxygenase) ELISA Kit  人吲哚胺2,3-雙加氧酶  96T
20318 PRSS(Human serine protease) ELISA Kit  人*蛋白酶  96T
20319 Syk(Human spleen tyrosine kinase) ELISA Kit  人脾臟*激酶  96T
20320 STK(Human serine/threonine protein kinase) ELISA Kit  人*/*蛋白磷酸酶  96T
20321 IRAK(Human interleukin receptor associated kinase) ELISA Kit  人白介素受體相關(guān)激酶  96T
20322 UK(Human urokinase) ELISA Kit  人乙酰*(ACH)ELISA試劑盒人*  96T
20323 PCK(Human phosphoenolpyruvate carboxykinase) ELISA Kit  人磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶  96T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人乙酰*(ACH)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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