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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
20219 GP-BB(Human Glycogen phosphorylase BB) ELISA Kit 人糖原磷酸化酶同工酶BB 96T
20220 Lp- Alpha(Human lipoprotein Alpha) ELISA Kit 人脂蛋白α 96T
20221 Cr(Human Crosslaps) ELISA Kit 人骨膠原交聯(lián) 96T
20222 C I CP(Human cross-linked C-opeptides of Type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型前膠原C末端肽 96T
20223 DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit 人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉 96T
20224 PY(Human pyridinium crosslink/PyriLinks) ELISA Kit 人吡啶交聯(lián)物 96T
20225 OPN(Human Osteopontin) ELISA Kit 人骨橋素 96T
20226 GABA(Human Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit 人γ氨基丁酸 96T
20227 SP-R(Human substance P receptor) ELISA Kit 人P物質(zhì)受體 96T
20228 cGMP(Human Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit 人環(huán)磷酸鳥苷 96T
20229 Lp-PL-A2(Human lipoprotein-associated phospholipase A2) ELISA Kit 人脂蛋白磷脂酶A2 96T
20230 EL(Human Endothelial lipase) ELISA Kit 人內(nèi)皮脂肪酶 96T
20231 sm Actinin- Alpha(Human skeletal muscle Actinin- Alpha) ELISA Kit 人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α 96T
20232 BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7) ELISA Kit 人骨成型蛋白7 96T
20233 25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羥基*3 96T
20234 LTB4(Human Leukotriene B4) ELISA Kit 人白三烯B4 96T
20235 iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit 人腸脂肪酸結(jié)合蛋白 96T
20236 OxLDL(Human oxidized lowdensity lipoprotein) ELISA Kit 人氧化低密度脂蛋白 96T
20237 MPIF-1/CCL23(Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1) ELISA Kit 人骨髓抑制因子1 96T
20238 ADP(Human adiponectin) ELISA Kit 人脂聯(lián)素 96T
20239 HIS(Human Histamine) ELISA KIT 人組胺 96T
20240 Human Resistin ELISA KIT 人抵抗素 96T
20241 ALP-B(Human Bone-specific Alkphase B) ELISA Kit 人骨特異性堿性磷酸酶B 96T
20242 OT/BGP(Human Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA kit 人骨鈣素/骨*蛋白 96T
20243 sRANKL(Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand) ELISA Kit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
20244 1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3(Human 1,25-dihydroxyvitamin D3) ELISA Kit 人1,25二羥基*3 96T
20245 Human histon-H2b ELISA Kit 人組蛋白H2b 96T
20246 OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保護(hù)素 96T
20247 BMPR- II (Human Bone morphogenetic protein receptor II ) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體Ⅱ 96T
20248 BMPR-1A(Human Bone morphogenetic protein receptor 1A) ELISA Kit 人骨成型蛋白受體1A 96T
20249 BMP-4(Human Bone morphogenetic protein 4) ELISA Ki 人骨成型蛋白4 96T
20250 BMP-2(Human Bone morphogenetic protein 2) ELISA Kit 人骨成型蛋白2 96T
20251 cAMP(Human cyclic adenosine monophosphate) ELISA Kit 人* 96T
20252 MASP(Human mannan binding lectin associated serine protease) ELISA Kit 人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)*蛋白酶 96T
20253 CDK-7(Human Cyclin-dependent kinase 7) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶7 96T
20254 CDK-2(Human Cyclin-dependent kinase 2) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶2 96T
20255 CDK-1(Human Cyclin-dependent kinase 1) ELISA Kit 人周期素依賴性激酶1 96T
20256 AMPK(Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase) ELISA kit 人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶 96T
20257 LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人乳酸脫氫酶 96T
20258 ADAM9(Human A Disintegrin And Metalloprotease 9) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶9 96T
20259 BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2) ELISA Kit 人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2 96T
20260 UPP1(Human uridine phosphorylase 1) ELISA Kit 人*核苷磷酸化酶1 96T
20261 ADH(Human alcohol dehydrogenase) ELISA Kit 人乙醇脫氫酶 96T
20262 RND1(Human Rho family GTPase 1) ELISA Kit 人Rho家族GTP酶1 96T
20263 RIPK2(Human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2) ELISA Kit 人受體TNFRSF結(jié)合**激酶2 96T
20264 PLSCR1(Human phospholipid scramblase 1) ELISA KIT 人磷脂爬行酶1 96T
20265 HMGCS1(Human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1) ELISA Kit 人3-羥基-3-甲基戊二酰*合酶1 96T
20266 EAR12(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12) ELISA KIT 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12 96T
20267 EAR3(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3 96T
20268 EAR2(Human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2)ELISA Kit 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2 人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒96T
20269 DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3) ELISA Kit 人二氫嘧啶酶樣3 96T
20270 WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶 96T
20271 WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase) ELISA Kit 人色氨酰tRNA合成酶 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人神經(jīng)肽Y(NP-Y)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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