人膽堿乙酰化酶(CHAc)ELISA試劑盒說(shuō)明書
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人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
20114 HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 96T
20115 Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 96T
20116 BV(Human bacterial vaginosis) ELISA Kit 人細(xì)菌性陰道病 96T
20117 HSV I Ab(Human Herpes simplexvirus I antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體 96T
20118 Human Estrogen-induced protein pS2 ELISA Kit 人雌激素誘導(dǎo)蛋白PS2 96T
20119 HPV-IgM(Human papillomavirus IgM) ELISA Kit 人乳頭狀瘤病毒抗體IgM 96T
20120 HPV-IgG(Human papillomavirus IgG) ELISA Kit 人乳頭狀瘤病毒抗體IgG 96T
20121 HSV-Ag2(Human Herpes simplex virus 2) ELISA Kit 人單純皰疹病毒抗原2 96T
20122 fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離前列腺特異性抗原 96T
20123 PSA(Human prostate specific antigen) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原 96T
20124 PS(Human phosphatidylserine) ELISA Kit 人磷脂酰* 96T
20125 PC/CPG(Human choline phosphoglyceride) ELISA Kit 人*磷酸甘油酯 96T
20126 TBA(Human Total bile acide) ELISA Kit 人總膽汁酸 96T
20127 Apo C3(Human Apolipoprotein C3) ELISA Kit 人載脂蛋白C3 96T
20128 CH(Human cholesterol) ELISA Kit 人血清總* 96T
20129 MT2(Human Metallothionein 2) ELISA Kit 人金屬硫蛋白2 96T
20130 sLOX-1(Human Soluble Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1) ELISA Kit 人可溶性凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1 96T
20131 3-NT(Human 3-Nitrotyrosine) ELISA Kit 人3-硝基* 96T
20132 GAG(Human glycosaminoglycan) ELISA Kit 人糖胺聚糖ELISA試劑盒 96T
20133 CysLTs(Human cysteinyl leukotrienes) ELISA Kit 人半胱氨酰白三烯 96T
20134 CALU(Human calumenin) ELISA Kit 人鈣腔蛋白 96T
20135 apo-A5(Human apoprotein A5) ELISA Kit 人載脂蛋白A5 96T
20136 DBP(Human Vitamin D-binding protein) ELISA Kit 人*結(jié)合蛋白 96T
20137 SEP1(Human selenoprotein 1) ELISA Kit 人硒蛋白1 96T
20138 SAA3(Human serum amyloid A3) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A3 96T
20139 Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4) ELISA Kit 人鳥苷酸結(jié)合蛋白4 96T
20140 cytb561(Human lipocalin 2) ELISA Kit 人細(xì)胞色素b561 96T
20141 LCN2(Human lipocalin 2) ELISA Kit 人脂質(zhì)運(yùn)載蛋白2 96T
20142 aFABP(Human adipocyte fatty acid-binding protein) ELISA Kit 人脂肪細(xì)胞型脂肪酸結(jié)合蛋白 96T
20143 GPC-3(Human Glypican-3) ELISA Kit 人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 96T
20144 GLUT3(Human Glucose transporter 3) ELISA Kit 人葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3 96T
20145 RBP(Human Retinol binding protein) ELISA Kit 人*結(jié)合蛋白 96T
20146 8-OHdG(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人8羥基脫氧鳥苷 96T
20147 Hyl(Human hydroxylysine) ELISA Kit 人羥賴氨酸 96T
20148 GAP(Human GTPase activating protein) ELISA Kit 人GTP酶活化蛋白 96T
20149 Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白H 96T
20150 GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇 96T
20151 PWM(Human pokeweed mitogen) ELISA Kit 人美洲商陸素 96T
20152 LPS(Human Lipopolysaccharides) ELISA Kit 人脂多糖/內(nèi)毒素 96T
20153 Human preptin ELISA Kit 人preptin 96T
20154 PPAR- Alpha(Human peroxisome proliferators activator receptors alpha) ELISA Kit 人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α 96T
20155 Apo-E(Human Apolipoprotein E) ELISA Kit 人載脂蛋白E 96T
20156 OGP(Human Osteogenic Growth Peptide) ELISA Kit 人成骨生長(zhǎng)肽 96T
20157 ODF(Human osteoclast differentiation factor) ELISA Kit 人破骨細(xì)胞分化因子 96T
20158 OH-PYD(Human Hydroxy-Pyridinium crosslinks) ELISA Kit 人羥基膠原吡啶交聯(lián) 96T
20159 DPD(Human Deoxypyridinoline crosslinks) ELISA Kit 人脫氧膠原吡啶交聯(lián) 96T
20160 PYD(Human Pyridinoline crosslinks) ELISA Kit 人膠原吡啶交聯(lián) 96T
20161 SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit 人葡萄球菌蛋白A 96T
20162 ConA(Human concanavalin A) ELISA Kit 人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒 人刀豆素A 96T
20163 FEP(Human Free erythrocyte proloporphyrin) ELISA Kit 人游離原卟啉 96T
20164 LBP(Human lipolysaccharide binding protein) ELISA Kit 人脂多糖結(jié)合蛋白 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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