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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人心納素(ANF)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人心納素(ANF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人心納素(ANF)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
19955 PI Ab-IgG/IgM)ELISA Kit 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM 96T
19956 Gp49a(Human glycoprotein 49A) ELISA Kit 人糖蛋白49A 96T
19957 Inhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制素β-B 96T
19958 CPSA ELISA Kit 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原 96T
19959 trypsin ELISA Kit 大鼠* 96T
19960 OXR(Human Orexin receptor) ELISA Kit 人食欲素受體 96T
19961 GHRP-Ghrelin(Human growth hormone releasing peptide-Ghrelin) ELISA Kit 人生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin 96T
19962 IFN- Beta/IFNB ELISA Kit 大鼠β干擾素 96T
19963 CAM(Human calmodulin) ELISA Kit 人鈣調(diào)素 96T
19964 PF-3 ELISA Kit 大鼠血小板因子3 96T
19965 sLR ELISA Kit 大鼠可溶性瘦素受體 96T
19966 TI(Human true insulin) ELISA Kit 人真胰島素 96T
19967 Cav-1 ELISA Kit 大鼠窖蛋白Caveolin1 96T
19968 NE-B(Human Noradrenaline Bitartas) ELISA Kit 人重酒石酸* 96T
19969 PGI(Human prostacycline) ELISA Kit 人前列環(huán)素 96T
19970 VEGF ELISA KIT 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 96T
19971 PCT(Human Procalcitonin) ELISA Kit 人降鈣素原 96T
19972 rT3(Human ReverseTri-iodothyronine) ELISA Kit 人反三碘甲狀腺原氨酸 96T
19973 TNF- Alpha ELISA KIT 大鼠腫瘤壞死因子α 96T
19974 6-keto-PGF1a(Human 6-keto-prostaglandin F1a) ELISA Kit 人6酮前列腺素F1a 96T
19975 TGF- Beta1 ELISA kit 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 96T
19976 Human Pentosidine ELISA Kit 人戊糖素 96T
19977 SCF/MGF ELISA Kit 大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子 96T
19978 NADPH ELISA Kit 大鼠*腺嘌呤二核苷酸磷酸 96T
19979 MN(Human metanephrine) ELISA Kit 人變腎上腺素 96T
19980 PDGF-AB ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB 96T
19981 D1R(Human Dopamine D1 receptor) ELISA Kit 人多巴胺D1受體 96T
19982 ADRA1A(Human adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 人腎上腺素能a1A受體 96T
19983 PDGFsR- Alpha ELISA Kit 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α 96T
19984 PS-2(Human Presenilin 2) ELISA Kit 人早老素2 96T
19985 NT-4 ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4 96T
19986 NT-3 ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3 96T
19987 iso-Hyd(Human Isoprenaline Hydrochloride) ELISA Kit 人異丙腎上腺素 96T
19988 NGF ELISA Kit 大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子 96T
19989 Human Pancreastatin ELISA Kit 人胰抑制素 96T
19990 AR(Human androgen receptor) ELISA Kit 人雄激素受體 96T
19991 MIP-3 Alpha/CCL20 ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α 96T
19992 LN ELISA Kit 大鼠層連蛋白/板層素 96T
19993 RLN(Human Relaxin) ELISA Kit 人松弛肽/松弛素 96T
19994 IL-6 ELISA KIT 大鼠白介素6 96T
19995 GHBP(Human Growth Hormone Binding Protein) ELISA Kit 人生長(zhǎng)激素結(jié)合蛋白 96T
19996 ADM(Human adrenomedullin) ELISA Kit 人腎上腺髓質(zhì)素 96T
19997 IL-4 ELISA KIT 大鼠白介素4 96T
19998 irGH(Human Immunoreactive growth hormone) ELISA Kit 人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素 96T
19999 IL-2 ELISA KIT 大鼠白介素2 96T
20000 IL-1 Alpha ELISA KIT 大鼠白介素1α 96T
20001 IL-18 Elisa Kit 人心納素(ANF)ELISA試劑盒大鼠白介素18 96T
20002 ADM(Human adrenomedullin) ELISA Kit 人腎上腺髓質(zhì)素 96T
20003 IL-10 mouse Elisa Kit 小鼠白介素10 96T
20004 irGH(Human Immunoreactive growth hormone) ELISA Kit 人免疫反應(yīng)性生長(zhǎng)激素 96T
20005 IGF-2 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子2 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人心納素(ANF)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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