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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 18:21:51瀏覽次數(shù):418次
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人6-羥多巴銨(6-OHDA)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人6-羥多巴銨(6-OHDA)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測物的含量。
我們將在人6-羥多巴銨(6-OHDA)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
19902 FLU(Human Influenza viruses IgG) ELISA Kit 人流感病毒抗體IgG 96T
19903 ER ELISA Kit 大鼠雌二醇受體 96T
19904 ADV-IgM(Human Adenovirus IgM) ELISA Kit 人腺病毒IgM 96T
19905 Pro-ANP ELISA Kit 大鼠前心鈉肽 96T
19906 ADV-IgG(Human Adenovirus IgG) ELISA Kit 人腺病毒IgG 96T
19907 Big ET ELISA Kit 大鼠大內(nèi)皮素 96T
19908 VLA ELISA Kit 大鼠遲現(xiàn)抗原 96T
19909 RV(Human RotavirusIgM) ELISA Kit 人輪狀病毒IgM 96T
19910 CT ELISA Kit 大鼠降鈣素 96T
19911 ECHO IgM(Human EchoVirus IgM) ELISA Kit 人艾柯病毒IgM 96T
19912 RSV(Human anti-respiratory syncytial virus antibody) ELISA Kit 人抗呼吸道合胞病毒抗體 96T
19913 OT/BGP ELISA Kit 大鼠骨鈣素/骨*蛋白 96T
19914 MV IgM(Human measlesvirus IgM) ELISA kit 人麻疹病毒IgM 96T
19915 sRANKL ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基 96T
19916 TSH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素 96T
19917 Cox V-IgM(Human Coxsackie virus IgM) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgM 96T
19918 Cortisol ELISA Kit 大鼠* 96T
19919 Cox V-IgG(Human Coxsackie virus IgG) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgG 96T
19920 E2 ELISA Kit 大鼠雌二醇 96T
19921 TB-Ab IgG(Human tuberculosis antibody IgG) ELISA Kit 人結(jié)核菌桿抗體IgG 96T
19922 CP(Human cicatricial Pemphigoid) ELISA Kit 人瘢痕性天皰瘡抗體 96T
19923 HBV preS2Ab(Human hepatitis B virus) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒前S2抗體 96T
19924 T ELISA Kit 大鼠睪酮 96T
19925 HBV preS2Ag(Human hepatitis B virus) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒前S2抗原 96T
19926 F-TESTO ELISA Kit 大鼠游離睪酮 96T
19927 ASD ELISA Kit 大鼠雄烯二酮 96T
19928 HGV-IgM(Human Hepatitis G virus IgG) ELISA Kit 人庚型肝炎病毒IgM 96T
19929 TTV(Human transfusion transmitted virus) ELISA Kit 人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒 96T
19930 E3 ELISA Kit 大鼠雌三醇 96T
19931 17-OHP ELISA Kit 大鼠17羥孕酮 96T
19932 HEV-IgM(Human Hepatitis D virus IgM) ELISA Kit 人戊型肝炎病毒IgM 96T
19933 HEV-IgG(Human hepatitis E virus IgG) ELISA Kit 人戊型肝炎病毒IgG 96T
19934 T3 ELISA Kit 大鼠三碘甲狀腺原氨酸 96T
19935 HDV IgM(Human Hepatitis D virus IgM) ELISA Kit 人丁型肝炎IgM 96T
19936 T4 ELISA Kit 大鼠甲狀腺素 96T
19937 FT4 ELISA Kit 大鼠游離甲狀腺素 96T
19938 HDV IgG(Human Hepatitis D virus IgG) ELISA Kit 人丁型肝炎IgG 96T
19939 HCV-IgM(Human Hepatitis C virus IgM) ELISA Kit 人丙型肝炎IgM 96T
19940 Free-T3 ELISA Kit 大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸 96T
19941 NN-T4 ELISA Kit 大鼠新生甲狀腺素 96T
19942 HCV-IgG(Human Hepatitis C virus IgG) ELISA Kit 人丙型肝炎IgG 96T
19943 gp130(Human glucoprotein 130) ELISA KIT 人糖蛋白130 96T
19944 INS ELISA Kit 大鼠胰島素 96T
19945 C-Peptide ELISA Kit 大鼠C肽 96T
19946 CRF(Human corticotropin-releasing factor) ELISA Kit 人促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子 96T
19947 dDAVP(Human */1-desamino-8-D-arginine vasopressin) ELISA Kit 人*/1-去氨基-8-右旋-*加壓素 96T
19948 CG ELISA Kit 大鼠絨毛膜* 96T
19949 M-AChR M3(Human muscarinic acetylcholine receptor M3) ELISA Kit 人毒蕈堿型乙酰*受體亞型M3 人6-羥多巴銨(6-OHDA)ELISA試劑盒96T
19950 LH ELISA Kit 大鼠促黃體激素 96T
19951 AMA ELISA Kit 大鼠抗心肌抗體 96T
19952 TR(Human Testoterone recepter) ELISA Kit 人睪酮受體 96T
19953 ACA ELISA Kit 大鼠抗中性粒/中心體抗體 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機(jī)洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機(jī)。
5人6-羥多巴銨(6-OHDA)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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