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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-22 21:48:24瀏覽次數(shù):148次
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人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
19743 sCD30L ELISA Kit 大鼠可溶性CD30配體 96T
19744 sCD40L ELISA Kit 大鼠可溶性CD40配體 96T
19745 SCL70/topo I (Human anti-scl70 antibody) ELISA Kit 人抗硬皮病抗體70 96T
19746 Human SS-B/La Antibody ELISA Kit 人抗SS-B/La抗體 96T
19747 SCFR ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體 96T
19748 SDF-1 Beta/CXCL12 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)細胞衍生因子1β 96T
19749 PF(Human Pemphigus Foliaceus) ELISA Kit 人落葉型天皰瘡抗體 96T
19750 Beta2-GP1 Ab IgA(Human Beta2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgA 96T
19751 ANG-R-Tie1 ELISA Kit 大鼠血管生成素受體Tie1 96T
19752 ACA-IgA(Human anti-cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit 人抗心磷脂抗體IgA 96T
19753 Tie-2 ELISA Kit 大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域*激酶2 96T
19754 TIMP-2 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2 96T
19755 Beta2-GP1 Ab IgM(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgM) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgM 96T
19756 TIMP-3 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3 96T
19757 Beta2-GP1 Ab IgG(Human Beta2-Glycoprotein 1 Antibody IgG) ELISA Kit 人β2糖蛋白1抗體IgG 96T
19758 ACA-IgM(Human anti-cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit 人抗心磷脂抗體IgM 96T
19759 TIMP-4 ELISA Kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4 96T
19760 ACA-IgG(Human anti-cardiolipin antibody IgG) ELISA Kit 人抗心磷脂抗體IgG 96T
19761 TNFsR- I ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ 96T
19762 TNFsR- II ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T
19763 AGAA(Human anti-golgi apparatus antibody) ELISA Kit 人抗高爾基體抗體 96T
19764 TNF- Beta ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子β 96T
19765 CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體 96T
19766 S100A9(Human S100 calcium binding protein A9/calgranulin B) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A9/鈣粒蛋白B 96T
19767 TRAIL-R3 ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3 96T
19768 TRAIL-R1 ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1 96T
19769 S100A8(human S100 calcium binding protein A8/calgranulin A) ELISA Kit 人S100鈣結(jié)合蛋白A8/鈣粒蛋白A 96T
19770 TRAIL-R4 ELISA Kit 大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4 96T
19771 Pim1(Human proviral integration site 1) ELISA Kit 人前病毒整合位點1 96T
19772 PEA(Human Pseudomonas Exotoxin A) ELISA Kit 人綠膿桿菌外毒素A 96T
19773 sTRAIL ELISA Kit 大鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體 96T
19774 uPA ELISA Kit 大鼠*型纖溶酶原激活物 96T
19775 FLU A(Human Influenza viruses A) ELISA Kit 人流感病毒A 96T
19776 PLAUR/uPAR ELISA Kit 大鼠*型纖溶酶原激活物受體 96T
19777 HBsAg(Human hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit 人乙型肝炎表面抗原 96T
19778 HBcAb(Human anti-hepatitis B virus core antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心抗體 96T
19779 IL-12/P70 ELISA Kit 大鼠白介素12 96T
19780 VEGF-B ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子B 96T
19781 HBcAb-IgM(Human anti-hepatitis B virus core IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體 96T
19782 HBsAb(Human anti-hepatitis B virus surface antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒表面抗體 96T
19783 IL-12/P40 ELISA Kit 大鼠白介素12 96T
19784 VEGF-C ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子C 96T
19785 HBeAb(Human anti-hepatitis B virus e antibody) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒e抗體 96T
19786 IL-11 ELISA Kit 大鼠白介素11 96T
19787 EHF(Human anti-epidemic hemorrhagic fever virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗流行性出血熱病毒抗體IgM 96T
19788 IGFBP-4 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4 96T
19789 anti-RV(Human anti-rabies virus antibody) ELISA Kit 人抗狂犬病毒抗體 96T
19790 anti-HAV(Human人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒 anti-hepatitis A virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgM抗體 96T
19791 IGFBP-3 ELISA Kit 大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3 96T
19792 VEGF-D ELISA Kit 大鼠血管內(nèi)皮細胞生長因子D 96T
19793 anti-HAV(Human anti-hepatitis A virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體 96T
19794 anti-PIV IgM(Human anti-parainfluenza virus IgM antibody) ELISA Kit 人抗副流感病毒IgM抗體 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人內(nèi)*肽-2(EM-2)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動酶標(biāo)儀,這對于實現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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