人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽(yáng)性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽(yáng)性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

19689 ASA(Human Anti-Somatic Muscle Antibody) ELISA Kit  人抗骨骼肌抗體  96T
19690 sP-selectin(Mouse soluble P-selectin) ELISA Kit  小鼠可溶性P選擇素  96T
19691 TAb(Human Thyroid Antibody) ELISA Kit  人甲狀腺抗體  96T
19692 S-100(Mouse Soluble protein-100) ELISA Kit  小鼠S100蛋白  96T
19693 MCP-3/CCL7 ELISA Kit  大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3  96T
19694 M-CSF ELISA Kit  大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子  96T
19695 IL-1(Mouse Interleukin 1) ELISA Kit  小鼠白介素1  96T
19696 ICA(Human islet cell antibody) ELISA Kit  人胰島細(xì)胞抗體  96T
19697 SDA(Human salivary duct autoantibody) ELISA Kit  人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體  96T
19698 MDC/CCL22 ELISA Kit  大鼠巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子  96T
19699 IL-1 Beta(Mouse Interleukin 1 Beta) ELISA Kit  小鼠白介素1β  96T
19700 MSA(Human mitotic spindle apparatus antibody) ELISA Kit  人抗紡錘體抗體  96T
19701 MYO/MB(Mouse Myoglobin) ELISA Kit  小鼠肌紅蛋白  96T
19702 MIP-2 ELISA Kit  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白2  96T
19703 AKA(Human Anti-keratin antibody) ELISA Kit  人抗角蛋白抗體  96T
19704 TXB2(Mouse Thromboxane B2) ELISA Kit  小鼠血栓素B2  96T
19705 MIP-3 Beta/ELC/CCL19 ELISA Kit  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β  96T
19706 MMP-1 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1  96T
19707 ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit  小鼠乙酰*  96T
19708 pANCA(Human Perinuclear anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit  人抗中性粒細(xì)胞核周抗體  96T
19709 cANCA(human anti-neutrophil cytoplasmic antibody) ELISA Kit  人抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體  96T
19710 MMP-10 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶10  96T
19711 LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit  小鼠白三烯B4  96T
19712 aPT1/aPT2(Human anti-prothrombins antibodies) ELISA Kit  人抗凝血素抗體  96T
19713 MMP-13 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13  96T
19714 LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit  小鼠白血病抑制因子受體  96T
19715 PF/PFP(Mouse Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit  小鼠穿孔素  96T
19716 PI Ab-IgG/IgM(human phosphatidylinositol antibody IgG/IgM) ELISA Kit  人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM  96T
19717 MMP-3 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶3  96T
19718 MMP-7 ELISA kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7  96T
19719 Synuclein mouse ELISA kit  小鼠突觸素  96T
19720 Beta2-GP1 IgA/G/M(Human Beta2-glycoprotein 1 antibody IgA/G/M) ELISA Kit  人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M  96T
19721 mouse IgG ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgG  96T
19722 mouse IgM ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgM  96T
19723 mouse IgA ELISA kit  小鼠免疫球蛋白IgA  96T
19724 Cath Ab(Human Cathepsin Antibodies) ELISA Kit  人組織蛋白酶抗體  96T
19725 MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit   大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A  96T
19726 MMP-8 ELISA Kit  大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶8/中性粒細(xì)胞膠原酶  96T
19727 LF/LTF Ab-Ig(Human Lactoferrin antibody IgG) ELISA kit  人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG  96T
19728 BPI-Ab(Human anti-Bactericidal permeability increasing protein antibody) ELISA Kit  人抗殺菌通透性增高蛋白抗體  96T
19729 5-NT ELISA Kit  大鼠5核苷酸酶  96T
19730 MPO-ANCA IgG(Human myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG) ELISA kit  人髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG  96T
19731 OPG ELISA Kit  大鼠骨保護(hù)素  96T
19732 BF ELISA Kit  大鼠B因子  96T
19733 PR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG) ELISA Kit  人抗蛋白酶3抗體IgG  96T
19734 Alpha-Fodrin IgG/IgA(Human anti-alpha-Fodrin IgG/IgA) ELISA Kit  人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA  96T
19735 OSM ELISA Kit  大鼠抑瘤素M  96T
19736 PLGF ELISA Kit  大鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子  96T
19737 ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit  人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體  96T
19738 Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit  人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體  96T
19739 RANTES/CCL5 ELISA kit   大鼠正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子  96T
19740 dsDNA(Human anti-double stranded DNA) ELISA KIT  人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體  96T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng)，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑，肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量?，F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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