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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-01-15 23:41:10瀏覽次數(shù):150次
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人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
19585 t-PA ELISA Kit 大鼠組織型纖溶酶原激活劑 96T
19586 AFA(Human anti-filaggrin antibody) ELISA Kit 人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體 96T
19587 CA(Mouse catecholamine)ELISA Kit 小鼠兒茶酚胺 96T
19588 TF ELISA Kit 大鼠組織因子 96T
19589 CCP(Human anti-cyclic citrullinated peptide) ELISA Kit 人抗環(huán)胍氨酸肽抗體 96T
19590 IL-27(Mouse Interleukin 27)ELISA Kit 小鼠白介素27 96T
19591 VD ELISA Kit 大鼠* 96T
19592 VK1 ELISA Kit 大鼠*1 96T
19593 APF(Human anti-perinuclear factor) ELISA Kit 人抗核周因子抗體 96T
19594 IL-23(Mouse Interleukin 23)ELISA Kit 小鼠白介素23 96T
19595 CT-1(Mouse cardiotrophln 1)ELISA Kit 小鼠心肌營養(yǎng)素1 96T
19596 VB12 ELISA Kit 大鼠*12 96T
19597 ANA(Human Anti-nuclear Antibody) ELISA Kit 人抗核抗體 96T
19598 VD3 ELISA Kit 大鼠*3 96T
19599 Alpha-Fodrin IgG/IgA(Mouse anti-alpha-Fodrin IgG/IgA)ELISA Kit 小鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA 96T
19600 LKM(Human liver kidney microsome autoantibody) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體抗體 96T
19601 IFN Alpha-Ab(Human Interferon AlphaAntibody) ELISA Kit 人抗α干擾素抗體 96T
19602 VD2 ELISA Kit 大鼠*2 96T
19603 AT- III (Mouse Anti-Thrombin III )ELISA Kit 小鼠抗*Ⅲ抗體 96T
19604 NP-Y(Mouse neuropeptide Y) ELISA Kit 小鼠神經(jīng)肽Y 96T
19605 Sc1-70-Ab(Human Sc1-70 Antibody) ELISA Kit 人抗Sc1-70抗體 96T
19606 VE ELISA Kit 大鼠* 96T
19607 GHRP(Mouse Growth Hormone Releasing Peptide) ELISA Kit 小鼠生長激素釋放多肽 96T
19608 Jo1/HRS(Human Jo-1 Antibody) ELISA Kit 人Jo1抗體/抗組氨酰tRNA合成酶抗體 96T
19609 VA ELISA Kit 大鼠* 96T
19610 RNP-Ab(Human anti-ribonucleo protein Antibody) ELISA Kit 人抗核糖核蛋白抗體 96T
19611 Gelsolin(Mouse Gelsolin ) ELISA Kit 小鼠凝溶膠蛋白 96T
19612 Beta-TG ELISA Kit 大鼠β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白 96T
19613 PF-4/CXCL4 ELISA Kit 大鼠血小板因子4 96T
19614 RANKL(Mouse receptor activator of nuclear factor kappa B ligand) ELISA Kit 小鼠核因子κB受體活化因子配基 96T
19615 n-DNA-Ab(Human natural deoxyribonucleic acid antibody) ELISA Kit 人抗天然脫氧核糖核酸抗體 96T
19616 TpP(Mouse thrombus precursor protein) ELISA Kit 小鼠血栓前體蛋白 96T
19617 DHT ELISA Kit 大鼠雙氫睪酮 96T
19618 ENA-Ab(Human anti-extractable nuclear antigen antibody) ELISA Kit 人抗可提取核抗原抗體 96T
19619 DNP-Ab(Human deoxyribonucleic protein antibody) ELISA Kit 人抗脫氧核糖核蛋白抗體 96T
19620 CTGF ELISA Kit 大鼠結(jié)締組織生長因子 96T
19621 GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠*釋放激素 96T
19622 INH-BGnRH(Mouse inhibin B) ELISA Kit 小鼠抑制素B 96T
19623 AsAb ELISA Kit 大鼠抗精子抗體 96T
19624 AAA(Human anti-Actin antibody) ELISA Kit 人抗肌動蛋白抗體 96T
19625 HIT(Human heparin associated antibody) ELISA Kit 人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體 96T
19626 PTH ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素 96T
19627 TRH(Mouse thyrotropin-releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素釋放激素 96T
19628 CRH(Mouse corticotropin releasing hormone) ELISA Kit 小鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素 96T
19629 HIS ELISA Kit 大鼠組胺 96T
19630 PR3Ab(Human Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit 人蛋白酶3抗體 96T
19631 SLA(Human Proteinase 3 Antibody) ELISA Kit 人抗肝可溶性抗原抗體 96T
19632 ISR- Beta(Mouse Insulin Receptor Beta) ELISA Kit 小鼠胰島素受體β 96T
19633 IL-13 ELISA KIT 人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒 大鼠白介素13 96T
19634 IL-15 ELISA KIT 大鼠白介素15 96T
19635 GHbA1c(Mouse Glycated hemoglobin A1c) ELISA Kit 小鼠糖化血紅蛋白A1c 96T
19636 Human Beta anti-galactan proteins IgG ELISA Kit 人β乳糖蛋白抗體IgG 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應(yīng)保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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