牛B淋巴細(xì)胞活化抗原B72(LAB72)ELISA試劑盒發(fā)表的sci文章
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人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀(guān)察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶(hù)帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
19424 25(OH)D3/25 HVD3 ELISA Kit 大鼠25羥基*3 96T
19425 Alpha1-AGP(Mouse Alpha1-Acid glycoprotein)ELISA Kit 小鼠α1酸性糖蛋白 96T
19426 AIRA(Human anti-insulin receptor antibody) ELISA Kit 人抗胰島素受體抗體 96T
19427 AGPA/PCA(Human anti-gastric parietal cell antibody) ELISA Kit 人抗胃壁細(xì)胞抗體 96T
19428 P III NP ELISA Kit 大鼠Ⅲ型前膠原肽 96T
19429 eNOS-3(Mouse Endothelial nitric oxide synthase 3)ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3 96T
19430 CH ELISA Kit (Mouse cholest) 小鼠*ELISA試劑盒 96T
19431 Col II ELISA Kit 大鼠Ⅱ型膠原 96T
19432 ARA(Human anti-gastric parietal cell antibody) ELISA Kit 人抗網(wǎng)硬蛋白抗體 96T
19433 VC ELISA Kit 大鼠* 96T
19434 LH(Mouse luteotropic hormone)ELISA Kit 小鼠促黃體激素 96T
19435 MCV(Human anti-mutated citrullinated vimentin antibody) ELISA Kit 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體 96T
19436 AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓磷脂抗體IgA 96T
19437 aGT(Mouse angiotensinogen)ELISA Kit 小鼠血管緊張素原 96T
19438 VB6 ELISA Kit 大鼠*6 96T
19439 Hsp-60(Mouse heat shock protein 60)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白60 96T
19440 MCV(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗突變型瓜氨酸波形蛋白抗體 96T
19441 Col I ELISA Kit 大鼠Ⅰ型膠原 96T
19442 P I CP ELISA Kit 大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽 96T
19443 CG(Mouse Chorionic Gonadotrophin)ELISA Kit 小鼠絨毛膜* 96T
19444 AMA IgA(Human anti-myelin antibody IgA) ELISA Kit 人抗髓磷脂抗體IgA 96T
19445 MDA(Mouse malondialchehyche)ELISA Kit 小鼠丙二醛 96T
19446 sP-selectin ELISA Kit 大鼠可溶性P選擇素 96T
19447 Human anti-parotid duct antibody ELISA Kit 人抗腮腺管抗體 96T
19448 Human anti-cartilage-antibody ELISA Kit 人抗軟骨抗體 96T
19449 SOD(Mouse Super Oxidase Dimutase)ELISA Kit 小鼠超氧化物歧化酶 96T
19450 S-100 ELISA Kit 大鼠S100蛋白 96T
19451 S-100B ELISA Kit 大鼠S100B蛋白 96T
19452 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗人絨毛膜*抗體 96T
19453 C-Peptide(Mouse C-Peptide)ELISA Kit 小鼠C肽 96T
19454 IL-1 ELISA Kit 大鼠白介素1 96T
19455 HSP gp96(Mouse Heat Shock Protein glycoprotein 96)ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白糖蛋白96 96T
19456 AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色體抗體 96T
19457 CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit 小鼠血清總補(bǔ)體 96T
19458 ABAb(Human anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 人抗腦組織抗體 96T
19459 IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 96T
19460 AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit 人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體 96T
19461 B7-2/sCD86(Mouse soluble Cluster of differentiation 86)ELISA Kit 小鼠可溶性CD86 96T
19462 MYO/MB ELISA Kit 大鼠肌紅蛋白 96T
19463 INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰島素 96T
19464 APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰*抗體 96T
19465 TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 96T
19466 TA(Human anti-teichoic acid antibody) ELISA Kit 人抗磷壁酸抗體 96T
19467 HIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α 96T
19468 Ach ELISA Kit 大鼠乙酰* 96T
19469 ALA/LCA(Human anti-lymphocytotoxic antibody) ELISA Kit 人抗淋巴細(xì)胞毒抗體 96T
19470 NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine)ELISA Kit 小鼠新生甲狀腺素 96T
19471 TRH ELISA Kit 大鼠促甲狀腺素釋放激素 96T
19472 ATGA/TGAB ELISA Kit 人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒 大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體 96T
19473 Human anti-macrophage antibody ELISA Kit 人抗巨噬細(xì)胞抗體 96T
19474 Amylin(Mouse Amylin) ELISA Kit 小鼠胰淀素 96T
19475 TPO-Ab(Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody) ELISA Kit 人抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 96T
19476 Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 小鼠游離三碘甲狀腺原氨酸 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿(mǎn)各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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