人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法：
1)目測(cè)定性法：加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照；與陰性對(duì)照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2～3SD，作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。

18939 ACA-IgM ELISA Kit  大鼠抗心磷脂抗體IgM  96T
18940 ACA-IgA ELISA Kit  大鼠抗心磷脂抗體IgA  96T
18941 OT/BGP(Mouse Osteocalcin/Bone gla protein) ELISA Kit  小鼠骨鈣素/骨*蛋白  96T
18942 Human CA724 ELISA Kit  人腫瘤標(biāo)志物  96T
18943 GABA(Mouse Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit  小鼠γ氨基丁酸  96T
18944 NGAL(Human neutrophil gelatinase-associated lipocalin) ELISA Kit  人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白  96T
18945 AP12 ELISA Kit  大鼠apelin 12  96T
18946 IFN- Alpha ELISA Kit  大鼠α干擾素  96T
18947 LTA(Human nonsmall cell lung cancer/Lung tumor Antigen) ELISA Kit  人非小細(xì)胞肺癌抗原  96T
18948 5-HT(Mouse 5-Hydroxytryptamine) ELISA Kit  小鼠5羥色胺  96T
18949 DR-70TM(Human tumor marker DR-70 for lung cancer) ELISA Kit  人肺癌標(biāo)志物DR-70  96T
18950 SP-R(Mouse substance P receptor) ELISA Kit  小鼠P物質(zhì)受體  96T
18951 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)ELISA Kit  大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測(cè)  96T
18952 F II ELISA Kit  大鼠*Ⅱ  96T
18953 SP(Mouse Substance P) ELISA Kit  小鼠P物質(zhì)  96T
18954 FSA(Human fetal sulfoslycoprotein antigen) ELISA Kit  人胚胎性硫糖蛋白抗原  96T
18955 BJP(Human Bence-Jones protein) ELISA Kit  人本周蛋白  96T
18956 VIP(Mouse Vasoactive Intestinal Peptide) ELISA Kit  小鼠血管活性腸肽  96T
18957 ET ELISA Kit  大鼠內(nèi)毒素  96T
18958 PPAR- Gamma ELISA Kit  大鼠過氧化物酶體增殖因子活化受體γ  96T
18959 TPO(Mouse Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit  小鼠甲狀腺過氧化物酶  96T
18960 CEF(Human Carcinoembryonic Ferritin) ELISA Kit  人癌胚鐵蛋白  96T
18961 AFU(Mouse alpha-L-fucosidase) ELISA Kit  小鼠αL巖藻糖苷酶  96T
18962 SCCAg(Human squamous cell carcinoma related antigen) ELISA Kit  人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原  96T
18963 CsA ELISA Kit  大鼠*A  96T
18964 hs-CRP ELISA Kit  大鼠超敏C反應(yīng)蛋白  96T
18965 TSA(Human tumor specific antigen) ELISA Kit  人腫瘤特異性抗原  96T
18966 BK(Mouse bradykinin) ELISA Kit  小鼠血管舒緩激肽  96T
18967 PI(Mouse Proinsulin) ELISA Kit  小鼠胰島素原  96T
18968 MMSAM(Human melanoma metastasis surface adhesion molecule) ELISA Kit  人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子  96T
18969 Beta2-GP1 IgA/G/M ELISA Kit  大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M  96T
18970 EMAb ELISA Kit  大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體  96T
18971 BRCA-2(Human breast cancer susceptibility protein 2) ELISA Kit  人乳腺癌易感蛋白2  96T
18972 (Mouse anti-IgE receptor antibody) ELISA Kit  小鼠抗IgE受體抗體  96T
18973 ASK-1(Human apoptosis signal regulating kinase 1) ELISA Kit  人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I  96T
18974 (Mouse anti-IVIgG antibody) ELISA Kit  小鼠抗IVIgG抗體  96T
18975 LDL-IC ELISA Kit  大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物  96T
18976 15-LO/LOX ELISA Kit  大鼠15脂加氧酶  96T
18977 BAX(Human Bcl-2 associated X protein) ELISA Kit  人Bcl-2相關(guān)X蛋白  96T
18978 AMA(Mouse Anti-myocardial antibody) ELISA Kit  小鼠抗心肌抗體  96T
18979 TF(Human Transfer factor) ELISA Kit  人轉(zhuǎn)移因子  96T
18980 Tn- I ELISA Kit  大鼠肌鈣蛋白Ⅰ  96T
18981 CP/CER(Mouse Ceruloplasmin) ELISA Kit  小鼠銅藍(lán)蛋白  96T
18982 SAA ELISA Kit  大鼠血清淀粉樣蛋白A  96T
18983 CCA(Human Colon Cancer Antigen) ELISA Kit  人結(jié)腸癌抗原  96T
18984 p53(Mouse p53/tumor protein) ELISA Kit  小鼠p53  96T
18985 cGMP(Mouse Cyclic guanosine monophosphate) ELISA Kit  小鼠環(huán)磷酸鳥苷  96T
18986 Human H-ras ELISA Kit  人H-ras  96T
18987 Hpt/HP ELISA Kit  大鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白  96T
18988 Alpha1-AGP ELISA Kit  大鼠α1酸性糖蛋白  96T
18989 NOS(Mouse nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠一氧化氮合成酶  96T
18990 Human c-sis ELISA Kit  人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒人c-sis  96T
18991 iNOS(Mouse inducible nitric oxide synthase) ELISA Kit  小鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶  96T
18992 eNOS-3 ELISA Kit  大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶3  96T
18993 Human c-jun ELISA Kit  人c-jun  96T

下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因，并給出相應(yīng)的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因： 
1）血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣； 
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 3）加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法： 
1） 標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)檢測(cè)，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。 
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。 
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。 
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。 
5) 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。
3 孵育：可能原因： 
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 
2) 孵育時(shí)間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。解決辦法： 
1) 貼封片或加蓋； 
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板：可能原因： 
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。 
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量不足，導(dǎo)致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導(dǎo)致洗板效果差。 
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長。 解決辦法： 
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干； 
2) 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試劑盒顯色：可能原因： 
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長或使用過期顯色劑； 
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法： 
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅(jiān)持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流； 
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡，導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板：如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化，有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作，同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)，以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本，才能保證檢測(cè)質(zhì)量。現(xiàn)在國內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀，這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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