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上海紀寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時間:2017-03-14 18:19:23瀏覽次數(shù):199次
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人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒,ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在酶聯(lián)免疫實驗得到了廣泛的應用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大,如不注意,有可能導致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒實驗ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照;與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗質(zhì)量。
18778 HK(Mouse Hexokinase) ELISA KIT 小鼠己糖激酶 96T
18779 6-OHDA(Human 6-hydroxydopamine) ELISA Kit 人6-羥多巴胺 96T
18780 TSGF ELISA Kit 大鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子 96T
18781 PDH E1(Mouse pyruvate dehydrogenase-E1) ELISA KIT 小鼠丙酮酸脫氫酶E1 96T
18782 ANF(Human atrial natriuretic factor) ELISA Kit 人心納素 96T
18783 Hyp ELISA Kit 大鼠羥* 96T
18784 PGE2 ELISA Kit(mouse) 小鼠前列腺素E2 96T
18785 p2(Human myelin protein 2) ELISA Kit 人神經(jīng)髓鞘蛋白 96T
18786 OPGL ELISA Kit 大鼠骨保護素配體 96T
18787 GSK(Mouse glycogen synthase kinase) ELISA KIT 小鼠糖原合成酶激酶 96T
18788 LF/LTF ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 96T
18789 CXCL16(Mouse CXC-chemokine ligand 16) ELISA KIT 小鼠CXC趨化因子配體16 96T
18790 AVP(Human arginine vasopressin) ELISA Kit 人*加壓素 96T
18791 PACAP(Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide) ELISA Kit 人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽 96T
18792 EMA IgA ELISA Kit 大鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA 96T
18793 u-T3(Mouse Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA KIT 小鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸 96T
18794 FE ELISA Kit 大鼠鐵蛋白 96T
18795 MAP-2(Human microtubule-associated protein 2) ELISA Kit 人微管相關(guān)蛋白2 96T
18796 Bcl-2(Mouse B-cell leukemia/lymphoma 2) ELISA KIT 小鼠B細胞淋巴瘤因子2 96T
18797 C1q rat (ELISA Kit) 大鼠補體片斷C1q 96T
18798 CA-2 ELISA Kit 大鼠碳酸酐酶2 96T
18799 CXCR3(Mouse CXC-chemokine receptor 3) ELISA KIT 小鼠CXC趨化因子受體3 96T
18800 NF(Human neurofilament protein) ELISA Kit 人神經(jīng)絲蛋白 96T
18801 TSGF(Mouse Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor) ELISA KIT 小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關(guān)因子 96T
18802 KP(Human kaliuretic peptide) ELISA Kit 人利鉀尿肽 96T
18803 PEDF ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子 96T
18804 NT(Human Neurotensin) ELISA Kit 人神經(jīng)降壓素 96T
18805 ADAM8 ELISA Kit 大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8 96T
18806 Hyp(Mouse hydroxyproline) ELISA KIT 小鼠羥* 96T
18807 OPGL(Mouse Osteoprotegerin Ligand) ELISA KIT 小鼠骨保護素配體 96T
18808 AT ELISA Kit 大鼠抗* 96T
18809 NKB(Human Neurokinins B) ELISA Kit 人神經(jīng)激肽B 96T
18810 Dyn(Human dynorphin) ELISA Kit 人強啡肽 96T
18811 ICA ELISA Kit 大鼠胰島細胞抗體 96T
18812 LF/LTF(Mouse Lactoferrin) ELISA KIT 小鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 96T
18813 EMA IgA(Mouse anti-Endomysial Antibody IgA) ELISA KIT 小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA 96T
18814 ENK(Human enkephalin) ELISA Kit 人腦啡肽 96T
18815 Kim-1 ELISA Kit 大鼠腎損傷分子1 96T
18816 AMA ELISA Kit 大鼠抗單核細胞抗體 96T
18817 FE(Mouse ferritin) ELISA KIT 小鼠鐵蛋白 96T
18818 P Gamma(Human Peptide Gamma) ELISA Kit 人γ肽 96T
18819 CA-2(Mouse carbonic anhydrase 2) ELISA KIT 小鼠碳酸酐酶2 96T
18820 CNP(Human C -type natriuretic peptide) ELISA Kit 人C型鈉尿肽 96T
18821 OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體 96T
18822 Orexin A(Human Orexin A) ELISA Kit 人阿立新A 96T
18823 ASMA ELISA Kit 大鼠抗平滑肌抗體 96T
18824 PEDF(Mouse pigment epithelium-derived factor) ELISA KIT 小鼠色素上皮衍生因子 96T
18825 ADAM8(Mouse A Disintegrin And Metalloprotease 8) ELISA KIT 小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8 人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒 96T
18826 NF-KapB p65 ELISA Kit 大鼠核因子κB亞基p65親和肽 96T
18827 NP-Y(Human neuropeptide Y) ELISA Kit 人神經(jīng)肽Y 96T
18828 AT(Mouse Anti-trypsin) ELISA KIT 小鼠抗* 96T
18829 BGP/Gehrelin(Human brain-gut peptides) Elisa kit 人腦腸肽 96T
18830 TAFI ELISA Kit 大鼠纖溶抑制因子/*激活的纖溶抑制物 96T
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴格按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標本分離不好即進行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時); 3)加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標本為血清:將血液先自然存放1-2小時后,再用3000rmp離心15分鐘;標本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測,可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時,請分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時未貼封片或加蓋,使標本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時間人為延長,導致非特異性結(jié)合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,導致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
5人白介素12(IL-12/P40)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時保持顯色劑不外流;
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時產(chǎn)生較多氣泡,導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現(xiàn)ELISA檢測標準自動化,有效提高檢測質(zhì)量。
在實際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴格按照操作步驟進行操作,同時作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L檢測每一份標本,才能保證檢測質(zhì)量?,F(xiàn)在國內(nèi)已有相當數(shù)量的單位擁有全自動酶標儀,這對于實現(xiàn)ELISA標準化檢測、提高檢測質(zhì)量起到了重要作用。
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