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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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更新時(shí)間:2017-03-14 18:19:22瀏覽次數(shù):197次
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人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
18725 OVA sIgE ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE 96T
18726 CNTF(Human Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit 人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 96T
18727 CD30(Human Cluster of differentiation 30) ELISA Kit 人CD30分子 96T
18728 CNP ELISA Kit 大鼠C型鈉尿肽 96T
18729 NT-4(Mouse Neurotrophin 4) ELISA kit 小鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子4 96T
18730 Alpha-GST ELISA Kit 大鼠α*S轉(zhuǎn)移酶 96T
18731 OPG(Mouse Osteoprotegerin) ELISA KIT 小鼠骨保護(hù)素 96T
18732 CXCR1(Human CXC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人CXC趨化因子受體1 96T
18733 XCR1(Human XC-chemokine receptor 1) ELISA Kit 人XC趨化因子受體1 96T
18734 BF(Mouse factor B) ELISA Kit 小鼠B因子 96T
18735 Hcy ELISA Kit 大鼠同型半* 96T
18736 GR- Beta ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體β 96T
18737 SLC/CCL21(Human secondary lymphoid-tissue chemokine) ELISA Kit 人二級(jí)淋巴組織趨化因子 96T
18738 OSM(Mouse Oncostatin-M) ELISA KIT 小鼠抑瘤素M 96T
18739 PDGFsR- Alpha(Mouse Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α 96T
18740 GR- Alpha ELISA Kit 大鼠糖皮質(zhì)激素受體α 96T
18741 E-Cad(Human E-Cadherin) ELISA Kit 人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白 96T
18742 BDNF(Human Brain derived neurotrophic facor) ELISA Kit 人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子 96T
18743 Col IV ELISA KIT 大鼠Ⅳ型膠原 96T
18744 PDGF-AB(Mouse Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA kit 小鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子AB 96T
18745 P-Selectin/CD62P(Mouse P-Selectin) ELISA kit 小鼠P選擇素 96T
18746 HK ELISA Kit 大鼠己糖激酶 96T
18747 ALCAM(Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule) ELISA Kit 人白細(xì)胞活化黏附因子 96T
18748 GSK ELISA Kit 大鼠糖原合成酶激酶 96T
18749 ACV-A(Human Activin A) ELISA Kit 人活化素A 96T
18750 PAL(Mouse L-Phenylalanine ammonla-lyase) ELISA Kit 小鼠L苯*解氨酶 96T
18751 sCD30L(Mouse Soluble Cluster of differentiation 30 ligand) ELISA Kit 小鼠可溶性CD30配體 96T
18752 NRG-1(human Neuregulin 1) ELISA Kit 人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1 96T
18753 CXCL16 ELISA Kit 大鼠CXC趨化因子配體16 96T
18754 ANP(Human Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 人心鈉肽 96T
18755 u-T3 ELISA Kit 大鼠高敏三碘甲狀腺原氨酸 96T
18756 SCF/MGF(Mouse Stem cell factor/mast cell growth factor) ELISA kit 小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長(zhǎng)因子 96T
18757 SDF-1 Beta/CXCL12(Mouse Stromal cell derived factor 1 Beta) ELISA kit 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1β 96T
18758 Bid ELISA Kit 大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白 96T
18759 D2R(Human dopamine D2 receptor) ELISA Kit 人多巴胺D2受體 96T
18760 EM-2(Human endomorphin-2) ELISA Kit 人內(nèi)*肽-2 96T
18761 TGF- Beta1(Mouse Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit 小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 96T
18762 Casp-9 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶9 96T
18763 Alpha-EP(Human Alpha-Endomorphin) ELISA Kit 人α-內(nèi)*肽 96T
18764 Orexin A ELISA Kit 大鼠阿立新A 96T
18765 TNFsR- I (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor I ) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ 96T
18766 Casp-3 ELISA Kit 大鼠胱天蛋白酶3 96T
18767 TNFsR- II (Mouse Tumor necrosis factor soluble receptor II ) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ 96T
18768 INH(Human Inhibin) ELISA Kit 人抑制素 96T
18769 NAIP(Human neuronal apoptosis inhibitory protein) ELISA Kit 人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白 96T
18770 TNF- Alpha(Mouse Tumor necrosis factor Alpha) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子α 96T
18771 Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2 96T
18772 CXCR3 ELISA Kit 人白介素12(IL-12/P70)ELISA試劑盒大鼠CXC趨化因子受體3 96T
18773 TNF- Beta(Mouse Tumor necrosis factor Beta) ELISA KIT 小鼠腫瘤壞死因子β 96T
18774 OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B 96T
18775 Col IV (Mouse Collagen Type IV ) ELISA KIT 小鼠Ⅳ型膠原 96T
18776 NE ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人白介素13(IL-13)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過長(zhǎng)或使用過期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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