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上海紀(jì)寧酶聯(lián)科技有限公司
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人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒,ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。
人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)ELISA結(jié)果判定常用的幾種方法:
1)目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照;與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3)以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑;P/N小于1.5為陰性。
4)定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
我們將在人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下,以期給客戶帶來(lái)一些啟發(fā),提高試驗(yàn)質(zhì)量。
18618 Hp-IgG(Mouse Helicobacter pylori IgG) ELISA Kit 小鼠幽門(mén)螺旋菌IgG 96T
18619 IL-3(Human Interleukin 3) ELISA KIT 人白介素3 96T
18620 D1R(Mouse Dopamine D1 receptor) ELISA Kit 小鼠多巴胺D1受體 96T
18621 IL-2sR Beta (Human Interleukin 2) ELISA kit 人白介素2可溶性受體β鏈 96T
18622 P-PKC ELISA Kit 大鼠磷酸化蛋白激酶C 96T
18623 IL-2sR Alpha/CD25(Human soluble interleukin-2 receptor) ELISA kit 人白介素2可溶性受體α鏈 96T
18624 ADRA1A(Mouse adrenergic alpha-1A receptor) ELISA Kit 小鼠腎上腺素能a1A受體 96T
18625 pERK ELISA Kit 大鼠磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶 96T
18626 cath-K ELISA Kit 大鼠組織蛋白酶K 96T
18627 IL-2(Human Interleukin 2) ELISA kit 人白介素2 96T
18628 CR(Mouse Calretinin) ELISA Kit 小鼠鈣結(jié)合蛋白 96T
18629 AmAC-1 ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1 96T
18630 IL-1 Alpha (Human Interleukin 1 Alpha) ELISA Kit 人白介素1α 96T
18631 HABP(Mouse Hya]uronate binding protein) ELISA Kit 小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 96T
18632 CyPA(Mouse cyclophilin A) ELISA Kit 小鼠嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A 96T
18633 IL-1sR II (Human soluble interleukin-1 receptor II ) ELISA kit 人白介素1可溶性受體Ⅱ 96T
18634 BMPs ELISA Kit 大鼠骨形成蛋白 96T
18635 IL-1sR I (Human soluble interleukin-1 receptor ) ELISA kit 人白介素1可溶性受體Ⅰ 96T
18636 RBP-4 ELISA Kit 大鼠*結(jié)合蛋白4 96T
18637 BMP-6(Mouse Bone morphogenetic protein 6) ELISA Kit 小鼠骨形成蛋白6 96T
18638 6-keto-PGF1a ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素F1a 96T
18639 Mouse lymphocyte factor ELISA Kit 小鼠淋巴細(xì)胞因子 96T
18640 IL-16(Human Interleukin 16) ELISA KIT 人白介素16 96T
18641 IL-13(Human Interleukin 13) ELISA KIT 人白介素13 96T
18642 Pentosidine ELISA Kit 大鼠戊糖素 96T
18643 ADH/VP/AVP(Mouse antidiuretic hormone/vasopressin/arginine vasopressin) ELISA Kit 小鼠抗利尿激素/血管加壓素/*加壓素 96T
18644 AcSDKP(Mouse N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro) ELISA Kit 小鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-* 96T
18645 AGEs ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物 96T
18646 IL-12/P70(Human Interleukin 12) ELISA KIT 人白介素12 96T
18647 IL-11(Human Interleukin 11) ELISA KIT 人白介素11 96T
18648 NGAL ELISA Kit 大鼠中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白 96T
18649 PA-IgG/M/A(Mouse plaet antibodies IgG/M/A) ELISA Kit 小鼠抗血小板抗體IgG/M/A 96T
18650 FN(Mouse Fibronectin) ELISA Kit 小鼠纖連蛋白 96T
18651 Hp-IgG ELISA Kit 大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG 96T
18652 IL-10(Human Interleukin 10) ELISA KIT 人白介素10 96T
18653 ER ELISA Kit 大鼠雌激素受體 96T
18654 IGFBP-4(Human insulin-like growth factors binding protein 4) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4 96T
18655 Flt3(Mouse FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 小鼠FMS樣*激酶3 96T
18656 IGFBP-3(Human insulin-like growth factors binding protein 3) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3 96T
18657 IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1 96T
18658 Beta-DF ELISA Kit 大鼠β-防御素 96T
18659 IGFBP-2(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 2) ELISA Kit 小鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2 96T
18660 D1R ELISA Kit 大鼠多巴胺D1受體 96T
18661 IGFBP2(Human insulin-like growth factors binding protein 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白2 96T
18662 IGFBP-1(Human insulin-like growth factors binding protein 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1 96T
18663 ADRA1A ELISA Kit 大鼠腎上腺素能a1A受體 96T
18664 IL-16(Mouse Interleukin 16) ELISA Kit 小鼠白介素16 96T
18665 IL-3(Mouse Interleukin 3) ELISA Kit 小鼠白介素3 96T
18666 IGF-2(Human insulin-like growth factors 2) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子2 96T
18667 CR ELISA Kit 人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 大鼠鈣結(jié)合蛋白 96T
18668 IGF-1(Human insulin-like growth factors 1) ELISA Kit 人胰島素樣生長(zhǎng)因子1 96T
18669 HABP ELISA Kit 大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白 96T
18670 IL-4(Mouse Interleukin 4) ELISA Kit 小鼠白介素4 96T
18671 IL-5(Mouse Interleukin 5) ELISA Kit 小鼠白介素5 96T
下面我們分析Elisa試驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因,并給出相應(yīng)的解決辦法:
1 選擇試劑:選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣:可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí)); 3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。
解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒*混合5-10次,放置一段時(shí)間后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要貯存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動(dòng)加樣,選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3 孵育:可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決辦法:
1) 貼封片或加蓋;
2) 按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。
4 洗板:可能原因:
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,導(dǎo)致洗板不*;洗板針堵塞,抽吸不*;洗板不暢,導(dǎo)致洗板效果差。
3) 反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。 解決辦法:
1) 保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干;
2) 合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
5人白介素16(IL-16)ELISA試劑盒顯色:可能原因:
1) 顯色劑配制后放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或使用過(guò)期顯色劑;
2) 加顯色劑時(shí)濺出孔外造成液體回流。解決辦法:
1) 顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不用過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用; 2) 加樣時(shí)保持顯色劑不外流;
3) A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。
6 終止:可能原因如加終止液時(shí)產(chǎn)生較多氣泡,導(dǎo)致假陽(yáng)性增加。所以在加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
7 讀板:如讀板時(shí)板底不清潔等。應(yīng)保證酶標(biāo)板清潔。
所以在整個(gè)操作過(guò)程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸; 盡可能實(shí)現(xiàn)ELISA檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)自動(dòng)化,有效提高檢測(cè)質(zhì)量。
在實(shí)際操作中,除了選擇優(yōu)良試劑外,必須嚴(yán)格按照操作步驟進(jìn)行操作,同時(shí)作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng),以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測(cè)每一份標(biāo)本,才能保證檢測(cè)質(zhì)量?,F(xiàn)在國(guó)內(nèi)已有相當(dāng)數(shù)量的單位擁有全自動(dòng)酶標(biāo)儀,這對(duì)于實(shí)現(xiàn)ELISA標(biāo)準(zhǔn)化檢測(cè)、提高檢測(cè)質(zhì)量起到了重要作用。
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